Временные границы полуколичественного анализа мочи с помощью тест-полосок
Занятие 30
Биохимия почек в норме и при патологии
Цель занятия: изучить особенности метаболизма почек и биохимическую основу их основных функций в норме и при патологии. Научиться определять основные физико-химические параметры мочи в норме и при патологии.
Исходный уровень знаний и навыков
Студент должен знать:
1 Строение и функции, особенности кровоснабжения почки нефрона.
2 Механизм образования мочи.
3 Механизмы действия гормонов – альдостерона, вазопрессина, натрийурического фактора.
4 Метаболизм и механизм действия витамина D.
5 Принципы и механизмы регуляции кислотно-основного состояния (КОС).
6 Метаболизм углеводов, липидов и аминокислот.
7 Механизмы регуляции уровня глюкозы в крови, глюконеогенез.
Студент должен уметь:
1 Проводить титрометрический анализ.
Структура занятия
Теоретическая часть
Основные функции почек.
Экскреторная функция почек. Строение нефрона, особенности его кровоснабжения. Механизм образования мочи (фильтрация, реабсорбция, секреция). Механизм активного транспорта глюкозы, аминокислот. Нарушение процессов фильтрации, реабсорбции и секреции. Общие свойства мочи в норме и при патологии (суточное количество, цвет, прозрачность, плотность, pH и др.). Органические (мочевина, мочевая кислота, креатинин, креатин, пигменты, аминокислоты, пептиды, гормоны) и неорганические (натрий, калий, кальций, магний, аммиак, хлориды, фосфаты, сульфаты, бикарбонаты) компоненты мочи в норме и при патологии. Патологические компоненты мочи (кровь, белок, сахар, билирубин, аминокислоты).
Клиренс, его определение и диагностическое значение.
1.2 Гомеостатические (неэкскреторные) функции почек. Роль почек в регуляции:
а) объема циркулирующей крови, внеклеточной жидкости, артериального давления. Ренин-ангиотензиновая система. Вазопрессин. Механизмы действия диуретиков;
б) баланса электролитов. Роль альдостерона в регуляции работы Na/K-АТФазы. Механизмы транспорта H+, Na+, K+, Ca++, Cl-, HCO3-. Почки и метаболизм витамина D. Почечные камни;
в) кислотно-основного состояния. Механизмы ацидогенеза, аммониогенеза;
г) уровня глюкозы в крови. Особенности глюконеогенеза в почках;
д) эритропоэза.
1.3 Метаболическая гетерогенность почечной ткани. Особенности углеводного, липидного и белкового обменов в почке. Почка как орган катаболизма биологически активных веществ.
1.4 Нарушение обмена при острой и хронической почечной недостаточности.
Практическая часть
2.1 Решение задач.
2.2 Лабораторная работа.
2.3 Проведение контроля конечного уровня знаний.
Задачи
1 Определение клиренса характеризует:
а) концентрационную способность почек; б) клубочковую фильтрацию; в) транспорт электролитов; г) канальцевую секрецию; д) кислотно-основное состояние; е) количество функционирующих клубочков; ж) объем циркулирующей крови; з) интенсивность метаболизма почки?
2 Содержание каких компонентов сыворотки крови характеризует нарушение выделительной функции почек:
а) электролитов; б) мочевины; в) креатинина; г) гамма-глобулина; д) “средних” молекул; е) глюкозы; ж) кетоновых тел; з) жирных кислот; и) С-пептида; к) альбумина; л) адреналина; м) гаптоглобина?
3 При каких заболеваниях наблюдается внепочечная ретенционная азотемия:
а) гломерулонефрит; б) почечная недостаточность; в) пиелонефрит; г) нефротический синдром; д) опухоли простаты; е) инфаркт миокарда; ж) тиреотоксикоз; з) атеросклероз; и) гепатит; к) кариес; л) цирроз печени; м) анемия?
4 При каких заболеваниях наблюдается гиперурикемия:
а) острый гломерулонефрит; б) хронический гломерулонефрит; в) лейкемия; г) почечно-каменная болезнь; д) подагра; е) рахит; ж) инфаркт миокарда; з) анемия?
5 В каких случаях наблюдается продукционная азотемия:
а) тяжелые инфекционные заболевания; б) гломерулонефрит; в) почечная недостаточность; г) нефролитиаз; д) злокачественные опухоли; е) инфаркт миокарда?
6 При каких заболеваниях наблюдается абсолютная ретенционная внепочечная азотемия:
а) опухоли мочевого пузыря; б) почечной недостаточности; в) гломерулонефрите; г) острой желтой атрофии печени; д) перитоните; е) пневмонии; ж) перелом костей?
7 Глюкозурия наблюдается при:
а) сахарном диабете; б) почечном диабете; в) стрессовых состояниях; д) гиперинсулинизме; е) синдроме Иценко-Кушинга; ж) почечной недостаточности; з) гломерулонефрите; и) острой атрофии печени; к) перитоните; л) пневмонии?
8 Когда отмечается повышение экскреции катехоламинов с мочой:
а) феохромоцитома; б) бронхиальная астма; в) гипертермия; г) стенокардия покоя; д) гиподинамия; е) гломерулонефрит; ж) почечная недостаточность; з) нефролитиаз; и) злокачественные опухоли; к) инфаркт миокарда?
9 Когда снижается экскреция с мочой 17-кетостероидов:
а) болезнь Аддисона; б) адреногенитальный синдром; в) гиперплазия коры надпочечников; г) опухоли коры надпочечников; д) болезнь Иценко-Кушинга; е) стрессовые состояния; ж) инфаркт миокарда; з) сахарный диабет?
10 Способностью растворяться в воде и выделяться через почечный фильтр с мочой обладают:
а) глюкурониды билирубина; б) a-изомер билирубина; в) b-изомер билирубина; г) g-изомер билирубина; д) d-изомер билирубина?
11 При каких заболеваниях (состояниях) отмечается относительная азотемия:
а) холера; б) тяжелые инфекционные заболевания; в) камни мочевых путей; г) гломерулонефрит; д) почечная недостаточность; е) хроническая сердечная недостаточность; ж) глистная инвазия; з) неукротимая рвота?
12 При каких состояниях наблюдается ретенционная почечная азотемия:
а) почечная недостаточность; б) камни мочевыводящих путей; в) нефротический синдром; г) опухоли мочевого пузыря; д) цирроз печени; е) инфаркт миокарда; ж) полиартрит?
13 В каких случаях наблюдается увеличение содержания индикана в крови и моче:
а) начальные стадии развития почечной недостаточности; б) длительные запоры; в) непроходимость кишечника; г) гангрена легких; д) гипертоническая болезнь; е) почечно-каменная болезнь; ж) сахарный диабет; з) дерматит?
14 В каких случаях возникает резко выраженная миоглобинурия:
а) краш-синдром (разможжение тканей); б) тромбоэмболии легочной артерии; в) гипоксия; г) цирроз печени; д) болезнь Аддисона; е) инфаркт миокарда; ж) полиартрит?
15 Какие изменения выявляются при краш-синдроме (длительном раздавливании тканей):
а) снижение диуреза; б) азотемия; в) миоглобинурия; г) увеличение активности в сыворотке крови КФК; д) увеличение активности в сыворотке крови АСТ; е) увеличение активности в сыворотке крови ЛДГ; ж) снижение уровня мочевины?
16 С каким состоянием проводят дифференциальную диагностику миоглобинурий:
а) гемоглобинурия; б) билирубинемия; в) железодефицитная анемия; г) протеинурия; д) азотемия; е) гематурия?
17 Появление миоглобинурии при инфаркте миокарда наблюдается:
а) через 2,5–3 часа; б) через 8 часов; в) на следующие сутки; г) через неделю; д) на 2–3-ю неделю; е) не появляется?
18 В регуляции объема внеклеточной жидкости участвуют системы:
а) ренин-ангиотензин-альдостероновая; б) гипоталамус-вазопрессин; в) гипоталамус-гипофиз-кора надпочечников; г) калликреин-кининовая; д) симпато-адреналовая; е) гемостаза?
19 Гипоосмолярный синдром обусловлен наличием:
а) гипонатриемии; б) гипоальбуминемии; в) избыточной секреции АДГ; г) гиперсекрецией альдостерона; д) голодании; е) сахарного диабета; ж) гипертиреоза; з) гиперпаратиреоидизма; и) рвоты; к) диареи?
20 Ацидогенез в почках активируется при:
а) алкалозе; б) гиперосмолярности крови; в) гиперхлоремии; г) гиперкапнии; д) гипокалиемии; е) гиперкалиемии; ж) пневмонии; з) рвоте; и) диарее; к) гиперкортицизме?
21 Диуретики тиазидового ряда, действуют путем: а) увеличения выведения хлоридов; б) увеличения выведения бикарбонатов; в) уменьшения выведения бикарбонатов; г) усиления реабсорбции калия; д) увеличения выведения натрия; е) ингибирования реабсорбции натрия; ж) ингибирования реабсорбции хлоридов?
22 Диуретики – ингибиторы карбангидразы могут вызвать развитие метаболического ацидоза вследствие увеличения:
а) выведения хлоридов; б) выведения сульфатов; в) выведения бикарбонатов; г) реабсорбции натрия; д) активности ГНГ; е) реабсорбции калия; ж) выведения натрия; з) реабсорбции хлоридов?
Лабораторная работа.Анализ мочи с помощью тест-полосок корпорации "Байер"
Данные тест-полоски позволяют определить в одной пробе исследуемой мочи 10 показателей: pH мочи, содержание глюкозы, билирубина, уробилиногена, белка, кетоновых тел, нитритов, эритроцитов, лейкоцитов и удельный вес (плотность) мочи.
Реактивы и оборудование: химический стакан, моча, тест-полоска, индикаторная цветная шкала (стандарт), лист белой бумаги, часы с секундной стрелкой.
Ход работы. В сухой чистый химический стакан набирают свежую (находящуюся при комнатной температуре не более одного часа после сбора пробы), хорошо перемешанную нецентрифугированную мочу. Затем быстро опускают в него тест-полоску таким образом, чтобы все реагентные зоны были полностью погружены в мочу. Через 2 с тест-полоску вынимают, удаляя избыток мочи путем соприкосновения полоски с краем стакана и протягиванием ее в таком положении снизу вверх под углом приблизительно 45 градусов.
Примечание – не прикасаться к аналитической зоне тест-полоски руками и не допускать попадания на нее прямых солнечных лучей, влаги и т. п.
Затем помещают тест-полоску на лист белой бумаги в горизонтальное положение и визуально сравнивают цвет реагентных зон на тест-полоске с цветной шкалой стандарта.
Временные границы полуколичественного анализа мочи с помощью тест-полосок
| Показатель | Время определения, c |
| Содержание глюкозы ” билирубина ” кетоновых тел Удельный вес (плотность) pH Содержание белка ” эритроцитов ” уробилиногена ” нитритов ” лейкоцитов | До 60 ” 60 |
| Примечание – Возможное изменение окраски реагентных зон, происходящие после 2 мин от начала анализа, не имеет диагностического значения. |
Качественный результат тестирования по всем параметрам тест-полоски, за исключением содержания лейкоцитов, можно получить через 1–2 мин. Для получения полуколичественного результата анализа следует точно соблюдать время по каждому параметру.
Можно провести исследование пригодных для тестирования полосок при помощи анализатора мочи "КЛИНИТЕК" (в случае наличия такового), строго соблюдая инструкцию по эксплуатации данного прибора (количественный анализ).
Определение индивидуальных показателей
Вначале целесообразно определить цвет, прозрачность и запах мочи.
1 Определение pH мочи
Принцип метода. Реагентная зона содержит 2 индикатора кислотности, которые способны изменять свою окраску при определенной pH среды: 0,2 % метилового красного; 2,8 % бромтимолового синего и 97 % нереактивных элементов. Диапазон чувствительности лежит в пределах pH = 5,0 … 8,5.
Метиловый красный – основной индикатор [интервал pH перехода окраски красной (более кислая среда) в желтую (более основная среда) – 4,2–6,3]:
| Красный |
| Желтый |
Бромтимоловый голубой – кислый индикатор [интервал pH перехода окраски желтой (более кислая среда) в синюю (более основная среда) – 6,0–7,6]:
| Жёлтый |
| Синий |
| Синий |
Реакция мочи изменяется при патологических состояниях. Кислая моча отмечается при голодании, сахарном диабете (в основном за счет кетоацидоза), лихорадочных состояниях, подагре (гиперурикурия). Щелочная моча бывает при рвоте (потеря Н+ с содержимым желудка), приеме некоторых препаратов (питьевая сода и т. п.), воспалении мочевого пузыря (цистит), пиелите, что связано с повышением уреазной активности патологической микрофлоры:
Карбамидамидогидролаза
| СО(NН2)2 + Н2О | СО2 + 2NН3 | |||
| Мочевина | Уреаза, КФ 3.5.1.5 | Защелачивание мочи | ||
2 Определение содержания глюкозы в моче
| Глюкозооксидаза |
| Глюконовая кислота |
Принцип метода. Глюкоза в присутствии фермента глюкозооксидазы (КФ 1.1.3.4) окисляется кислородом воздуха с образованием перекиси водорода.
Перекись водорода при участии фермента пероксидазы тут же реагирует с иодидом калия, вызывая коричневое окрашивание:
| Пероксидаза |
| Коричневый |
Состав реагентной зоны: глюкозооксидаза – 2,2 %; пероксидаза хрена – 1,0 % (сопряженные ферментные системы); иодид калия (хромоген) – 8,1 %; буфер (для создания оптимума pH действия ферментов) – 69,8 %; нереактивные элементы – 18,9 %. Границы чувствительности, т. е. минимально определяемая концентрация – 75–125 мг/дл (4–7 ммоль/л). Физиологические концентрации не учитываются – проба отрицательна. Положительна при концентрации глюкозы в моче выше 5,5 ммоль/л. Цвет реагентной зоны изменяется от зеленого до коричневого. Диапазон чувствительности: 5,5 – больше или равен 111 ммоль/л, 1 – больше или равен 20 г/л.
Примечание – При высокой концентрации в моче глюкозы окрашивание реагентной зоны может быть неравномерным. В этом случае оценку следует проводить по наиболее темному тону. Чувствительность реакции снижается при увеличении удельного веса мочи и может зависеть от колебания температуры. Высокая концентрация аскорбиновой кислоты (и других восстанавливающих веществ) и/или кетоновых тел при низкой концентрации глюкозы может привести к неправильному (ложноотрицательному) результату, а присутствие производных фенолфталеина и сульфофталеина – к ложноположительному.
Клинико-диагностическое значение. В моче здорового человека глюкоза присутствует в виде следов (не более 0,4 г/л) и не определяется обычными химическими реакциями, так как она практически полностью реабсорбируется в проксимальных канальцах нефронов. В этом процессе принимают участие ферменты Е1 гексокиназа (глюкокиназа) и E2 щелочная фосфатаза:
| Тканевая жидкость |
| Клетка канальца |
| Просвет почечного канальца |
| Глюкоза |
| Глюкоза |
| Глюкозо-6-фосфат |
| H2O |
| H3PO4 |
| АТФ |
| АДФ |
| E1 |
| E2 |
Повышение концентрации глюкозы в моче – глюкозурия. Различают 2 группы глюкозурий: гипергликемические и нормогликемические. В случае гипергликемических глюкозурий увеличение содержания глюкозы в моче связано с повышением ее концентрации в плазме крови. Почечный порог для глюкозы составляет приблизительно 9,9 ммоль/л. Среди гипергликемических глюкозурийвыделяют физиологические и патологические.
Физиологические:
1 Алиментарная – при приеме пищи, богатой углеводами.
2 Эмоциональная – при психоэмоциональном напряжении (связана в основном с повышенной стимуляцией адреналином мобилизации гликогена печени, а также с инициацией кортикостероидами процессов глюконеогенеза).
3 При воздействии некоторых лекарственных препаратов: преднизолона, кофеина (повышение концентрации внутриклеточной цАМФ приводит к активации каскадного механизма мобилизации гликогена).
Патологические:
1 Нарушения эндокринной регуляции углеводного обмена – сахарный диабет, синдром Иценко-Кушинга (увеличение концентрации глюкокортикоидов и, как следствие, усиление глюконеогенеза – стероидный диабет), акромегалия (интенсификация контринсулярных эффектов соматотропного гормона), феохромоцитома (избыточная продукция катехоламинов), тиреотоксикоз (гиперфункция тиреоидных гормонов).
2 Поражения центральной нервной системы – инсульты, травмы, опухоли головного мозга, энцефалиты.
3 Недостаточность продукции инсулина поджелудочной железой (опухоль, операция, панкреатит).
4 Болезни печени – гепатиты, цирроз, гемохроматоз.
5 Заболевания сердечно-сосудистой системы – гипертонический криз, инфаркт миокарда.
6 Интоксикации – воспаление легких, инфекции, диспепсии новорожденных, ожоги, отморожения, наркоз, лечение глюкокортикоидами и адренокортикотропином.
Нормогликемическая глюкозурия связана в основном с нарушением реабсорбции глюкозы в почечных канальцах. Причины:
1 Интоксикации ртутью, угарным газом, стрихнином, хлороформом, эфиром, морфином, флоридзином, кодеином, снотворными препаратами (например, барбитуратами), алкоголем (в последних случаях эффект связан с гипервосстановленностью пиридиновых коферментов).
2 Гломерулонефрит, хронический пилонефрит, нефросклероз, диабетический гломерулосклероз, врожденные тубулопатии (синдром Фанкони); беременность; почечный диабет (наследственная патология, связанная с генетически обусловленным изменением активности ферментов реабсорбции глюкозы в почечных канальцах).
3 Патологические процессы самой почечной ткани – хронический нефрит с проявлением нефротического синдрома при острой почечной недостаточности, вторичный почечный диабет.
3 Определение содержания билирубина в моче
Принцип метода. Диазониевая соль 2,4-дихлоранилина образует с билирубином азобилирубин – комплекс, окрашенный в лиловый цвет.
Состав реагентной зоны: 0,4 % диазониевой соли 2,4-дихлоранилина; 37,3 % – буфер; 62,3 % – нереактивные элементы. Границы чувствительности – 0,4–0,8 мг/дл (7–14 мкмоль/л).
Примечание – большое количество аскорбиновой кислоты в моче может привести к неправильному негативному результату.
Клинико-диагностическое значение. В норме моча содержит минимальные количества билирубина, не выявляемые обычными качественными пробами. Моча, содержащая желчные пигменты, будет иметь желтовато-коричневый или зеленый цвет. Незначительная билирубинурия (в виде щелочных солей) указывает на раннюю стадию заболевания печени. Значительное увеличение билирубина в моче связано с обтурационными желтухами ( например, закупорке желчного протока), а также с прогрессирующими паренхиматозными желтухами. Увеличение идет в основном за счет прямого билирубина. Непрямой билирубин появляется в моче при значительных поражениях почек.
4 Определение уробилиногена в моче
Принцип метода. Уробилиноген при взаимодействии с пара-диметиламинобензальдегидом образует комплексное соединение розового цвета – уробилиногенальдегид.
Состав реагентной зоны: 0,2 % пара-диметиламинобензальдегида; 99,8 % – нереактивные элементы.
Границы чувствительности – 0,2 мг/дл (3,2 мкмоль/л). Диапазон чувствительности: 0,2–8 мг/дл (3,2–131 мкмоль/л).
Примечание – Ложный позитивный результат может быть вызван реакцией с аминосалициловой кислотой и сульфанил-мочевиной; ложное окрашивание наблюдается и в присутствии бензойной кислоты. Ложный негативный результат может быть вызван формалином. Реактивность теста увеличивается с повышением температуры. Оптимум температуры 22 … 26 °C.
Клинико-диагностическое значение. У здоровых людей концентрация уробилиногена в моче составляет от 0,2 до 1,8 мг/дл. С 2 мг/дл начинается область патологии.
Уробилиноидурия наблюдается при:
1) паренхиматозных заболеваниях печени (гепатиты, циррозы, отравления, лихорадочные состояния, сопровождающиеся токсическим поражением печени) вследствие потери печенью способности задерживать и разрушать уробилиноген, всосавшийся из кишечника;
2) гемолитических состояниях (гемолитическая желтуха, гемоглобинурия, рассасывание больших кровоизлияний, обширные инфаркты миокарда) из-за избыточного поступления билирубина во внепеченочные желчные пути и кишечник, где он восстанавливается бактериями в уробилиноген, который всасывается в тонком кишечнике и через venus portae попадает в печень, где в норме разрушается до три- и дипирролов (пропент-диопента и мезобилилейкана);
3) кишечных заболеваниях, связанных с усиленной реабсорбцией желчных пигментов слизистой оболочкой кишечника (энтероколиты, запоры).
Отсутствие в моче уробилиногена при повышенном содержании билирубина указывает на обтурационную желтуху.
5 Определение содержания белка в моче
Принцип метода. При взаимодействии альбумина с бромфеноловым голубым образуется комплекс зелено-голубого цвета, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна содержанию альбумина.
Состав реагентной зоны: 0,3 % тетрабромфенолового голубого; 97,3 % – буфера; 2,4 % – нереактивных элементов.
Границы чувствительности – 15–30 мг/дл.
Диапазон чувствительности – 30 и больше или равно 2000 мг/дл (0,30 –больше или равно 20 г/л).
Примечание – Данный тест характеризует в основном содержание в моче альбумина. Глобулин, тела Бенс-Джонса, микропротеины выявляются слабее. Негативный результат наличия белка не исключает его присутствия. Сильно щелочная моча или растворение в моче антисептиков и средств дезинфекции, например хлоргексидина, может вызвать неправильный позитивный результат.
Клинико-диагностическое значение: В нормальной моче содержатся лишь следы белка (представлен главным образом уромукоидом – продуктом функционирования почечной ткани), не выявляющиеся обычными химическими методами. Появление белка в моче – протеинурия – свидетельствует о нарушении баланса между процессами его фильтрации и реабсорбции.
Виды протеинурий: преренальная, ренальная (клубочковая и канальцевая), постренальная, смешанная.
Причины протеинурий:
1 Преренальной: повышенное артериальное давление, сердечная декомпенсация; функциональные протеинурии, обусловленные:
а) усиленным распадом белков тканей при физической нагрузке, психо-эмоциональном напряжении, стрессорном состоянии;
б) повышенным гемодиализом, связанным с увеличением активности ренина в плазме.
2 Ренальной клубочковой (гломерулярной): усиление проницаемости базальной мембраны почечного фильтра (из-за уменьшения содержания в ней сиалогликопротеинов при врожденном нефротическом синдроме и при атаке протеазами нейтрофилов; из-за снижения отрицательного заряда на мембране, например, при сахарном диабете). Гломерулярная протеинурия встречается и при других патологических состояниях, сопровождающихся поражением почек: токсикозе беременных, амилоидозе, инфекционных и злокачественных заболеваниях, гломерулонефрите, нефропатиях.
3 Ренальной канальцевой (тубулярной) – тубулярные и интерстициальные нефропатии, нефрозы (нарушение реабсорбции – энергозависимого процесса, происходящего путем эндоцитоза белка с образованием эндосом, сливающихся с лизосомами, где идет протеолиз, и образовавшиеся аминокислоты через базальную мембрану тубулоцитов возвращаются в кровоток).
4 Смешанной ренальной – хронический пиелонефрит, диффузный абактериальный интерстициальный нефрит, хроническая почечная недостаточность при хроническом гломерулонефрите.
5 Постренальной (вызванной патологией мочевыводящих путей) – воспалительная экссудация, когда в мочу попадают слизь, кровь, гной из мочевыводящих путей.
6 Определение содержания кетоновых тел в моче
| Ацетон |
| Оранжево-красный комплекс |
| Нитропруссид натрия |
Принцип метода. Кетоновые тела образуют с нитропруссидом натрия комплексные соединения оранжево-красного (щелочная среда) и вишневого (при подкислении) цвета:
| Вишневый комплекс |
Состав реагентной зоны: 7,1 % – нитропруссида натрия; 92,9 % – буфера (ацетатного).
Граница чувствительности – 5–10 мг/дл (0,5–1,0 ммоль/л). Диапазон чувствительности – 0,05–1,6 г/л (0,5–16 ммоль/л).
Примечание – Неправильный позитивный результат может возникнуть в сильнопигментированных пробах мочи или при наличии L-дофа-продуктов обмена в моче.
Клинико-диагностическое значение. Кетоновые тела в нормальной моче встречаются в самых ничтожных количествах. Появление небольшой концентрации кетонов в моче может быть вызвано физическими нагрузками, голоданием, недостаточным углеводным питанием (кетогенная диета), во время беременности или при занятии профессиональным спортом. Часто кетоны можно определить в моче до того, как повысится их концентрация в сыворотке крови (из-за действия физико-химических и физиологических механизмов коррекции нарушений кислотно-основного состояния) – ранняя диагностика. Значительная кетонурия наблюдается при сахарном диабете (недостаточность потребления глюкозы тканями приводит к активации альтернативных энергопродуцирующих метаболических путей: липолиза, бета-окисления жирных кислот; и синтеза других транспортных форм субстратов энергообмена – кетоновых тел); увеличении концентрации контринсулярных гормонов (акромегалия, стероидный диабет и т. п.); тиреотоксикозе (повышение расхода углеводов); подпаутинных кровоизлияниях в мозг; черепно-мозговых травмах; возбуждении ЦНС; болезни Гирке. В раннем детском возрасте продолжительные заболевания желудочно-кишечного тракта (дизентерия, токсикоз) могут привести к кетонурии в результате голодания и истощения.
7 Определение содержания нитритов в моче
Принцип метода и клинико-диагностическое значение. Принцип тестирования основан на том, что при патологии мочевыводящих путей находящиеся в них бактерии (граммотрицательные микробы) превращают нитраты мочи в нитриты. Розовые пятна или уголки не стоит воспринимать как позитивный результат. Если же возникает легкое окрашивание всей реагентной зоны в розовый цвет, то это указывает на существование характерных бактерий (более 106 микробов/мл). Интенсивность окрашивания не пропорциональна количеству бактерий, и негативный результат не является показателем полного отсутствия бактерий.
Состав реагентной зоны: 1,4 % пара-арсаниловой кислоты; 1,3 % 1,2,3,4-тетрагидробензохинолин-3-ола; 10,8 % буфера; 86,5 % нереактивных элементов.
Границы чувствительности – 0,06–0,10 мг/дл (13–22 мкмоль/л) NO2-.
Примечание – Ложный негативный результат может возникнуть если: 1) время нахождения мочи в мочевом пузыре менее 4 часов (поэтому для анализа рекомендуется брать утреннюю мочу, т. к. чем больше время нахождения мочи в мочевом пузыре, тем точнее результат анализа); 2) возбудитель инфекции мочевыводящих путей действует непроизводительно; 3) в силу особенностей питания в моче мало нитратов. Ложнонегативный результат также может быть при высоких концентрациях в моче аскорбиновой кислоты и одновременном низком содержании нитритов.
8 Определение содержания эритроцитов в моче
Принцип метода. Основан на том, что гемоглобин эритроцитов, обладая пероксидазной активностью, разлагает диизопропиленбензона дигидропероксид с выделением атомарного кислорода, который окисляет 3,5,3',5'-тетраметилбензидин в соединение зеленого цвета:
| зеленый |
Состав реагентной зоны: 6,8 % диизопропиленбензона дигидропероксида, 4 % – 3,5,3',5'-тетраметилбензидина, 48 % – буфера; 41,2 % – нереактивных элементов.
Границы чувствительности – 0,015–0,062 мг/дл Hb.
Диапазон чувствительности – 10–200 эритроцитов/мкл.
Для свободного гемоглобина реагентная зона окрашивается равномерно в зеленый цвет. Целые (неповрежденные) эритроциты появляются на реагентной зоне в виде зеленых точек.
Примечание – Повышенный удельный вес или повышенная концентрация белка может снизить реактивность теста.
Клинико-диагностическое значение: В норме кровь в моче отсутствует. Появление крови с форменными элементами в моче – гематурия; появление в моче кровяных пигментов (гемоглобина и метгемоглобина) – гемоглобинурия. При гематурии моча непрозрачна, имеет красноватый оттенок; при гемоглобинурии моча чаще окрашена в кофейно-бурый цвет. В случае гематурии и гемоглобинурии в моче содержится белок. Гематурии подразделяются на почечные и внепочечные. Почечная гематурия – основной симптом острого нефрита (сопровождается гемоглобинурией). Внепочечные гематурии связаны с воспалительными процессами и травмами мочевых путей (мочевые камни, рак мочевого пузыря, цистит). Гемоглобинурия отмечается при отравлении гемолитическими ядами, тяжелых инфекциях, ожогах, при которых происходит разрушение (гемолиз и связанная с ним гемоглобинемия) эритроцитов.
9 Определение содержания лейкоцитов в моче
Принцип метода. Переход окраски индикаторной зоны от бежевой через серую к сиреневой и далее фиолетовой свидетельствует о пропорциональном увеличении числа лейкоцитов в моче, соответствующим шкале [15 (следы) – 70 – 125 – 500 лейкоцитов/мкл].
Состав реагентной зоны: 0,4 % производного пиррола аминокислотного; 0,2 % соли диазония; 40,9 % буфера; 58,5 % нереактивных элементов.
Границы чувствительности – 5–15 лейкоцитов/поле.
Диапазон чувствительности – 15–500 лейкоцитов/мкл.
Примечание – Повышенная концентрация глюкозы, щавелевой кислоты, медикаментов (цефалексин, цефалотин, тетрациклин) приводит к ослаблению реакции. Сильно окрашенные пробы мочи могут повлиять на цвет реагентной зоны. Иногда у пациентов женского пола позитивный результат может быть вызван примесями вагинальных выделений в моче.
Клинико-диагностическое значение. В норме моча не содержит лейкоцитов (до 10 в одном микролитре). Лейкоциты мочи представлены главным образом нейтрофилами, но могут быть обнаружены эозинофилы и лимфоциты. Увеличение числа лейкоцитов в моче (лейкоцитурия) до очень больших количеств (пиурия) свидетельствует о воспалительных процессах в почках и мочевыводящих путях (туберкулез почки, пиелиты, циститы, пиелонефриты).
10 Определение плотности мочи
Принцип метода. Тест основан на pKs (показатель эмпирической константы высаливания) – изменении различных электролитов в зависимости от концентрации (определяющей ионную силу) ионов в моче.
Состав реагентной зоны: 2,8 % бромотимолового голубого; 97,2 % поли-(метил-, винил-, эфир-малеиновой кислоты натриевая соль).
Диапазон чувствительности – 1,000–1,030 г/л. Изменение окраски от сине-зеленой через морскую, зеленую, защитную, травяную, хаки до охристой.
Примечание – При уровне pH мочи выше 6,5 результат увеличивается на 0,005. Повышенное значение плотности может быть вызвано присутствием небольшого количества (1–7,5 г/л) белка в моче.
Клинико-диагностическое значение: Плотность мочи в норме колеблется в широких пределах (1,002–1,035 г/л). Она зависит от количества растворенных в ней веществ и количества выделяемой мочи, с одной стороны, и от соотношения количества жидкости, поступившей в организм и выведенной из организма внепочечными путями (потоотделение, диарея и т. п.) – с другой.
Плотность мочи дает представление о приблизительном количестве о растворенных в ней веществ. Ориентировочно расчет плотного остатка (в г/л) получают, умножив 2 последние цифры (сотые и тысячные доли единицы) относительной плотности на коэффициент 2,6. В норме с мочой выделяется 50–75 г/сут плотных веществ. (В норме чем больше объем выделяемой мочи, тем меньше ее плотность и наоборот).
Изостенурия – выделение мочи с постоянной плотностью, равной плотности первичной мочи (1,010 г/л) – свидетельствует о почечной недостаточности. Постоянно низкое значение плотности мочи – гипоизостенурия – указывает на нарушения концентрационной функции почек (хронический нефрит, первично или вторично сморщенная почка). При несахарном диабете резко снижается плотность мочи, что связано с нарушением обратной реабсорбции воды.
При лихорадочных состояниях, общем венозном застое отмечается увеличение плотности и уменьшение объема выделяемой мочи. Сахарный диабет приводит к несоответствию между количеством мочи (наблюдается полиурия) и ее плотностью, повышенной из-за присутствия больших концентраций глюкозы и кетоновых тел.
РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ. Оформление результатов исследования проводится по следующей форме:
Клинический анализ мочи.
Ф. И. О. исследуемого ________________________ Пол______ Дата анализа____________
| Показатель | Результат анализа | Вывод | |
| качественного | (полу) количественного | ||
| 1 Цвет | Оценка цвета | Насыщенность | В данной графе результат анализа сравнивается с нормальными величинами, и в случае несоответствия норме на основе клинико-диагностического значения дается предварительная оценка возможных причин патологии |
| 2 Прозрачность | Оценка прозрачности | Степень прозрачности | |
| 3 Запах | Наличие / отсутствие | Характер запаха | |
| 4 Плотность | - | г/л | |
| 5 Реакция мочи | Кисл./нейтр./осн. | pH | |
| 6 Содержание глюкозы | +, – | Здесь указываются конкретные величины содержания вещества в случае положительной пробы и нижняя граница чувствительности в случае отрицательной пробы | |
| 7 Содержание белка | +, – | ||
| 8 Содержание билирубина | +,– | ||
| 9 Содержание уробилиногена | Норма или выше нормы | ||
| 10 Содержание кетоновых тел | +, – | ||
| 11 Содержание нитритов | +, – | ||
| 12 Содержание эритроцитов (Hb) | +, – | ||
| 13 Содержание лейкоцитов | +, – |
Общий вывод. Делается запись об освоении данного метода анализа и предположительный диагноз, поставленный на основе полученных результатов анализа мочи.
Рекомендуемая литература
Основная
1 Материал лекций.
2 Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1990. С. 473–487; 1998. С. 608–624.
3 Николаев А. Я. Биохимия. М.: Высшая школа, 1989. С. 358–368.
Дополнительная
4 Уайт А. и др. Основы биохимии. Т. 3. М.: Мир, 1981.
5 Наточин Ю. В. Основы физиологии почки. Л.: Медицина, 1982.
Почки и гомеостаз в норме и при патологии. М.: Медицина, 1987