Реагент №3. П- Нитрофенилфосфат
п- Нитрофенилфосфат…………………………………………27,0ммоль/л
Калибратор
п- Нитрофенилфосфат………………………………………50мкмоль/л
Жинақтың аналитикалық сипаттамалары:
Тараптар бойынша ---------------------------------- 20 мг/100 мл (1200мкмоль/л)
Вариация коэффиценті мәні---------------------------------- 5 % артық емес
Инкубация уақыты -------------------------------------------- 20-25оС – 10 мин.
Сезімталдығы -------------------------------------------------- 40 мкмоль/л
Бояудың қанымдылығы ------------------------------------- 40 минуттан кем емес.
Анализ үшін реагенттерді дайындау және олардың тұрақтылығы:
Жинақтың сақталу мерзімі – 2 -8оС 12 ай. Дайындалған күні, каталог бойынша сериясы және номері қаттамада көрсетілген.
Жұмысшы реагент:
реагент №1 және реагент №3 4 :1 қатынасында араластырады.Реагент 2-8°С температурада 10 күн қараңғыда немесе -20°С температурада 3 ай тұрақты сақтауға болады.
№2 реагенттің жұмысшы ерітіндісі: №2 құтының құрамы дистилденген сумен 10 есе сұйытылады; ерітінді тығыз жабылған полиэтилен пакетте тұрақты сақталады.
| Тәжірибелік сынама, мл | Бақылау сынама, мл | |
| жұмысшы реагент | 0,5 | 0,5 |
| Қан сарысуы/плазма | 0,05 | - |
Сынамаларды 37 оС температурада 30 минут (инкубация) ұстайды. инкубация аяқталғаннан кейін сынамалар суытылады. Тәжірибелік және бақылау сынамаларға №2 реагенттің жұмысшы ерітіндісінен 5мл қосады, бақылау сынамаға 0,05 мл қан сарысуын қосады және қалыңдығы 1 см кюветада 405 нм толқын ұзындығында фотометрия жүргізеді.
Фермент белсенділігін калибрлік сызық бойынша есептейді. Негізгі калибрлік ерітіндіден төменде көрсетілгендей жұмысшы ерітінділер дайындалады.
| № сынама | Калиброатор | Жұмысшы ерітінді реагент№2.мл | ферменттің белсенділігі нмоль |
| 0,5 | 5,05 | ||
| 1,0 | 4,55 | ||
| 1,5 | 4,05 | ||
| 2,5 | 3,05 | ||
| 3,5 | 2,05 |
Қалыпты мәндері: 278-830 нмоль (с.л)**1ед/л=16,67нмоль (с . л)
Назар аударыңыз: 1. Жұмысшы реагент үнемі қараңғы жерде, тығыз жабылған күйде, 4°С температурада сақталынады. 2. Калибрлік сызық тұрғызғанда калибратор мен реагент №2 мөлшері пропорцтоналды кемітіледі.
«Витал Дагностикс СПб»Санкт – Петербург, Россия 194156, пр. Энгельса,27, корп.12В.
Тел.8-800-200-23-24 (812)293-21-32,(812)293-23-24.Факс (812)326-61-98
ҚАН САРЫСУЫНДАҒЫ ЖАЛПЫ БИЛИРУБИННІҢ САНДЫҚ АНЫҚТАЛУЫ.
Билирубин - қызыл - сары пигмент, түзу сызықты тетрапиррол. Оның көпшілік бөлігі организмде бауырмен көк бауырдың ретикулоэндотелиальді жүйесінде гемоглабиннің,миоглобиннің ситрохомдардан ыдыраған кезінде түзіледі.
Себебі.Қан сарысуындағы билирубинді анықтау тәсілімен танысу,диагноз қою үшін және кейбір бір қатар гемолитикалық анимия,бауыр және басқадай ауыруларды емдеу барысында бықылау үшін қажет.
Қан сарысуындағы белерубиннің жалпы құрамы қалыпты жағдайда 8,55-20,52 мкмоль/л,бос күйіндегі 5-16 мкмоль/л,байланысқан түрде 2-5 мкмоль/л.
Реактивтер. Кофиінді реактив,физиологиялық ерітінді,диазоқосылыс 30% - натрий ерітіндісі.
Қағида. Бұл әдіс билирубин мен диазореактивтің интенсивті бояғыш өнімдерінің өзара әрекеттесуі колориметриялық анықтауға негізделген. Бұл өнім сілтінің қатысуымен жасыл түске боялған.
| Реактивтер | Бақылау | Тәжірибе |
| Сарысу Кофейнді реактив Физиологиялық ерітінді Диазоқосылыс | 0,5 1,75 0,25 - | 0,5 1,75 - 0,25 |
| Бөлме темпиратурасында 20 минут |
| 30 %натрий ертіндісі 4 тамшы 4 тамшы |
Алынған тәжірбиемізді жақсылап араластырамыз да қарсы бақылауға қойылған қалыңдығы 5 мл кюветаға құйып толқын ұзындығы 670 нм/ қызыл жарық фильтр/билирубин құрамын есептеу калибрлі графикпен есептеледі.
Клиникалық-диагностикалық маңызы.
Қандағы билирубиннің деңгейінің жоғарылау 27-34 мкмоль/л жоғары сары аурудың пайда болу мен анықталуы.
Гемолитикалық анемия болған жағдайдағы сарыауру бос билирубин деңгейінің жоғарылаумен бітеді. Бауырдың паренхимотозды зақымданған жағдайындағы сарыаура байланысқан түрдегі билирубин деңгейінің жоғарылаумен бітеді. Механикалық сары ауру билирубин құрамынының жоғарылауы негізінен байланысқан билирубин есебіне беріледі.
4 КРЕДИТ
9-шы сабақ
Тақырыбы: Зертханалық практикум: «Коагуляциалық гемостаздың көрсеткіштері»
Цель: коагулограмма көрсеткіштерін анықтау әдістерінің клиникалық диагностикалық маңыздылығын көрсету.
Сабақтың міндеттері:
· коагулограмма көрсеткіштерін және гемостаздың скринингтік тесттерін талдау зерттеу әдістерін үйрету
Тақырыптың негізгі сұрақтары:
1. Қан кету уақыты.
2. Тромбоцит тер саны
3. АЧТВ
4. Протромбиндік уақыт (Квик бойынша)
5. Тромбиндік уақыт және /немесе фибриноген
Оқыту және үйрету әдістері: биохимиялық әдістерді өткізу, хаттаманы құрастыру, алынған нәтижелерді талдау (TBL)
Әдебиет:
1. Биохимия: Оқулық (5 шығарылым) Северин Е.С. редакциясы, аударма Сейтембетова А.Ж. . – М.: ГЕОТАР-МЕД., 2014. – 750б.
2. Сеитов З.С. Биохимия : Оқулық / З. С. Сеитов. - Алматы : Эверо, 2012. - 570 б
3. Сейтембетов Т.С. Биологиялық химия : оқулық / Т. С. Сейтембетов, Б. И. Төлеуов, А. Ж. Сейтембетова. - Алматы : Эверо, 2011. - 420 б. : сур.
4. Биохимия сұрақтары мен жауаптары = Биохимия в вопросах и ответах : оқу құралы / құраст. Т. С. Сейтембетов [и др.]. - Алматы : Эверо, 2010. - 312 б
5. Сейтембетов Т.С. Биологиялық химия : Оқулық / Сейтембетов, Талғат Сұлтанұлы, Төлеуов Б.И., Сейтембетова А. Ж. - Карағанды, 2007. - 426 с
Бақылау: зерттеу хаттамасы
Құралдар: приборлар (ФЭК АР – 101, ФЭК - 02, термостат ТСО 1/80, су моншасы, ультрадыбыстық жуғыш, рН-метр 150м, рН-метр С830Р спектрофотометр, зертханалық таразы SPU 401,торсиондық және аналитикалық таразы, центрифугалар, дистиллятор АДЭ – 5, компьютерлер.
Жабдықтар: реактивтер жиыны, зертханалық химиялық ыдыс, штативтер, компьютерлік анимациялар, тест тапсырмалар, ситуациялық тапсырмалар.