Методические указания к выполнению. рабочий раствор: трилон б, сэ = 0,01 моль экв/л.
РАБОТЫ:
Рабочий раствор: трилон Б, Сэ = 0,01 моль экв/л.
Исследуемый раствор: плазма крови.
Вспомогательный раствор: аммиачно-буферный (рН = 9,5-10).
Индикатор: хромоген черный.
Способ титрования: прямой.
Для установления точки эквивалентности используется индикатор хромоген черный, который в зависимости от рН раствора ионизирует по-разному:
H3V ↔ H2V- + H+ ↔ HV2- + 2H+ ↔ V3- + 3H+
рН<6 pH=6 pH=7-11 pH=11,5
винно-красный синий оранжевый
При рН = 9,5-10 комплекс Са2+ с индикатором имеет винно-красную окраску:
Са2+ + HV2- → СаV- + H+
синий винно-красный
При титровании трилоном Б в точке эквивалентности наблюдается полный переход металла из непрочного комплекса с индикатором в более прочный комплекс с трилоном Б (бесцветным), и винно-красная окраска меняется на синюю:
СаV- + Na2H2Y Na2СаY + HV2- + H+
винно-красн. б/цветн. б/цветн. синяя
или:
В коническую колбу с помощью пипетки отмерьте 10 мл плазмы крови. Добавьте 5 мл буферного раствора мерной пробиркой и несколько кристалликов индикатора. Исследуемый раствор приобретает винно-красную окраску. Титруйте из бюретки трилоном Б до перехода винно-красного окрашивания в синее. Показания бюретки отметьте с точностью до 0,1 мл. Титрование повторите до получения трех результатов, отличающихся не более чем на 0,1±0,2 мл. Результаты титрования занесите в табл. 17.
По рассчитайте содержание ионов Са2+ в плазме, в мг % и мг/л, сравните с нормой, сделайте вывод.
Таблица 17
№ опыта | V иссл.р-ра, мл | Vтр., мл | Относит. ошибка | Содержание Са2+, мг/л | ||
10,0 | ||||||
10,0 | ||||||
10,0 |
КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ:
1. Почему определение ионов Са2+ необходимо проводить в щелочной среде?
2. Возможно ли применение метода трилонометрии для анализа магния, железа, других биогенных элементов в живых организмах?
3. Как рассчитывается эквивалент определяемого элемента в методе трилонометрии?
4. Рассчитайте содержание ионов Са2+ в исследуемой плазме в моль ион/л по результатам титрования.
5. Возможны ли другие аспекты применения комплексонов в биологии и в медицине, кроме аналитических целей?
ЛИТЕРАТУРА:
1. С. 250-252; 2. С. 226; 4. С. 151-155; 6. С. 263-265.
РАБОТА 15. МЕТОД КОМПЛЕКСОНОМЕТРИИ.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ КАЛЬЦИЯ
В СЛЮНЕ (для стоматологического факультета)
Метод трилонометрии находит широкое применение в стоматологической практике. Стоматологи используют его для определения содержания кальция в биоптатах зубной эмали. По соотношению кальция и фосфора в биоптатах судят о резистентности эмали (устойчивости против кариозного разрушения) и ряде других заболеваний.
Слюна может обладать деминерализующей активностью. Состав ее может нарушить равновесие процессов де- и минерализации эмали и быть одним из пусковых механизмов возникновения кариеса зубов.
В норме содержание ионов Са2+ в слюне колеблется в пределах 5,2-9,7 мг/100 мл. При кариесе отклонений нет. При беременности и после родов наблюдается снижение содержания кальция в слюне.
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
1. Ознакомиться с возможностями метода трилонометрии.
2. Научиться записывать реакции образования внутрикомплексных соединений.
3. Ознакомиться с условиями проведения анализа, выбором индикатора.
4. Освоить методику титрования.
5. Овладеть методикой трилонометрического определения содержания ионов кальция в слюне.
6. Научиться на основании результатов титрования рассчитывать содержание ионов кальция (Са2+) в слюне.
ЗАДАНИЕ:
Выполните трилонометрическое определение и рассчитайте содержание ионов кальция в слюне в мг/100мл. Представьте отчет по работе.