Таксономия микроорганизмов

Вид- _________________________________________________________________

__________________

Чистая культура -___________________________________________________ ______________________________________________________________________

Штамм - __________________________________________________________

______________________________________________________________________

Клон - ____________________________________________________________

______________________________________________________________________

Биовар - __________________________________________________________

______________________________________________________________________

ОСНОВНЫЕ ТАКСОНОМИЧЕСКИЕ ГРУППЫ МИКРООРГАНИЗМОВ, ИМЕЮЩИХ МЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Определение	Пример
Царство ЭУКАРИОТА
Простейшие -
Грибы -
Царство ПРОКАРИОТА
Бактерии -
Микоплазмы -
Риккетсии -
Хламидии-
Спирохеты -
Царство ВИРА

Занятие № 2 Дата______________

Тема: МОРФОЛОГИЯ БАКТЕРИЙ. КАПСУЛЫ И СПОРЫ БАКТЕРИЙ, МЕТОДЫ ИХ ИЗУЧЕНИЯ. СЛОЖНЫЕ СПОСОБЫ ОКРАСКИ БАКТЕРИЙ. ОКРАСКА ПО ГРАМУ, ОКРАСКА КИСЛОТОУСТОЙЧИВЫХ БАКТЕРИЙ.НЕГАТИВНЫЕ СПОСОБЫ ОКРАСКИ. ЯДЕРНАЯ СУБСТАНЦИЯ. СПОРЫ. ОКРАСКА СПОР.ОКРАСКА ЖГУТИКОВ.

Цель: Научиться окрашивать фиксированный препарат по Граму и изучать мор­фологические и тинкториальные свойства микроорганизмов. Изучить строение бактериальной клетки, функции и методы выявления отдельных органоидов.

Основные вопросы, разбираемые на занятии:

1. Отличия клеток прокариотов от эукариотов.

2. Облигатные компоненты клеток прокариотов.

3. Факультативные компоненты клеток прокариотов.

4. Выявление различий в строении клеточной стенки бактерий с помощью окраски по Граму.

5. Особенности сложных методов окраски – по Цилю-Нильсену, по Бурри-Гинсу, по Ожешке, по Нейссеру.

6. Бактериоскопический метод диагностики, его достоинства и недостатки.

СТРУКТУРА БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ

Органоид	Функция	Метод выявления
Облигатные органоиды
Клеточная стенка
Цитоплазматиче-ская мембрана
Нуклеоид
Рибосомы
Мезосомы
Факультативные органоиды
Пили
Жгутики
Капсула
Спора
Плазм иды
Включения

ОБЩАЯ СХЕМА СЛОЖНЫХ (ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫХ) МЕТОДОВ ОКРАСКИ:

• основной краситель;

• дифференцирующее вещество;

• дополнительный краситель.

СЛОЖНЫЕ МЕТОДЫ ОКРАСКИ

ОКРАСКА ПО ГРАМУ

Схема метода:

Этап	Вещество	Время обработки
Основной краситель	Генцианвиолет (кристаллвиолет)	1мин
Фиксатор	Р-р Люголя	1 мин
Дифференцирующее ве­щество	Спирт этиловый 96°	5-10 сек
Промывка	Вода	5-10 сек
Дополнительный краси­тель	Водный фуксин	« 1 мин
Промывка	Вода	5-10 сек

Принцип метода:

Генцианвиолет связывается с пептидогликаном клеточной стенки. Толстый слой пептидогликана грамположительных бактерий связывает много красителя, тонкий слой - грамотрицательных - мало. Раствор Люголя фиксирует краситель за счет образования комплсса краситель-пептидогликан-йод. При обработке мазка спиртом грамотрицательные микроорганизмы быстро теряют краситель и обесцвечиваются, а грамположительные - остаются окрашенными в синий цвет. Дополнительный краситель окрашивает грамотрицательные микроорганизмы в красный цвет.

	бактерии
грамположительные	грамотрицательные
Структура клеточной стенки 1. Пептидогликан 2. Внешняя мембрана (липополисахарид) 3. Тейхоевые кислоты
Результат окраски по Граму (рисунок) Гр(+) бактерии     Гр(-) бактерии     Смесь Гр(+) и Гр(-) бактерий

ВЫЯВЛЕНИЕ КАПСУЛ ПО БУРРИ И БУРРИ-ГИНСУ.

Схема метода:

Этап	Вещество	Воемя обработки
Негативное контрастирование (по Бурри)	Черная тушь (смешивается с ис­следуемой культурой и высуши­вается)
Фиксация	В пламени спиртовки
Окраска микробных клеток (по Гинсу)	Водный фуксин	1 мин
Промывка	Вода	5-10 с

Принцип метода:

Капсула не воспринимает красители, поэтому её выявляют, создавая в препарате черный тушевой фон (метод Бурри). Дополнительная окраска тела микробной клетки позволяет визуализировать капсулу (метод Бурри-Гинса).

Klebsiella pneumomae.

Окраска по Бурри-Гинсу. Увеличение х_