Кинетика ферментативных реакций
I. Зависимость скорости реакции от концентрации субстрата:
Vmax – это такая V ферментативной реакции, при которой достигается полное насыщение фермента субстратом, т.е. когда все активные центры фермента связаны с субстратом.
KM – константа Михаэлиса:
1) KM численно равна концентрации субстрата, при которой скорость реакции равна ½ Vmax.
2) KM показывает сродство E к S. Чем меньше KM, тем больше сродство и наоборот.
II. Зависимость скорости реакции от температуры:
При нагревании:
рвутся слабые связи в молекуле фермента (гидрофобные, ионные и водородные) => меняется конформация E => нарушается структура активного центра E => уменьшается активность E.
III. Зависимость скорости реакции от pH среды:
Оптимум pH – это такое значение pH, при котором E проявляет максимальную активность.
Для каждого E характерен довольно узкий интервал pH, при котором он активен:
При изменении pH среды в сторону от оптимума активность E уменьшается:
Причины:
изменяется ионизация ионогенных групп => рвутся ионные и некоторые водородные связи в молекуле фермента => меняется конформация E => нарушается структура активного центра E => уменьшается активность E.
Кофакторы ферментов и их роль в катализе.
Если фермент является сложным белком, то в его состав всегда входит небелковый компонент, который называется: Кофактор.
Белковая часть такого фермента называется: Апофермент.
А комплекс апофермента с кофактором получил название: Холофермент:
Апофермент + Кофактор Холофермент
Каталитическую активность в этом случае проявляет только Холофермент.
Кофакторы
Коферменты Ионы металлов
Роль ионов металлов в катализе:
1) участвует в присоединении субстрата (Mg2+, Mn2+, Zn2+)
2) принимают участие в катализе (Zn2+, Cu2+, Fe2+)
3) принимают участие в стабилизации третичной и четвертичной структуры фермента (K+, Ca2+, Zn2+)
4) активаторы ферментов (Ca2+)
Коферменты:
Органические вещества, предшественниками которых, как правило, являются витамины;
Принимают непосредственное участие в катализе, наряду с радикалами аминокислот.
Некоторые коферменты непрочно связаны с апоферментом (NAD+, NADP+, HS-KoA, H4-фолат).
Есть коферменты, прочно связанные с апоферментом, т.е. представляют с собой простетическую группу (гем, FAD, FMN, биотин).
Примеры коферментов
Тиаминдифосфат (ТДФ):
Биотин (витамин H):
Кофермент A:
Классификация ферментов.
В основе классификации ферментов лежит тип катализируемой ими реакции.
Все ферменты делятся на 6 классов:
I. Оксидоредуктазы – катализируют окислительно-восстановительные реакции.
Основные подклассы:
Оксидазы
Гидроксилазы
3. Дегидрогеназы – катализируют реакции присоединения / отщепления атомов водорода (дегидрирования).
По типу кофермента различают:
1) NAD+ и NADP+ – зависимые дегидрогеназы (предшественник: витамин PP);
2) FAD и FMN – зависимые дегидрогеназы (предшественник: витамин B2)
Коферменты NAD+, NADP+, FAD и FMN выполняют роль акцепторов атомов водорода.
Строение коферментов NAD+и NADP+:
+ |
+ |