Лабораторная работа № 10

Морфология бактерий

Цель работы:ознакомится с основными формами бактерий.

Бактерии по форме делятся на несколько групп: сферические, цилиндрические, спиральные, необычной формы и нитчатые.

Сферические бактерии, или кокки (гр. κοκκοs - ягода, зерно), имеют округлую форму. В зависимости от расположения клеток после их деления подразделяются на группы:

1) Диплококки располагающиеся попарно.

2) Стрептококки. Деление происходит в одном направлении. Имеет патогенные виды.

3) Тетракокки. Деление происходит в двух перпендикулярных направлениях. Не имеют патогенных видов.

4) Сарцины. Деление происходит в трех измерениях. Они представляют собой соединение клеток в виде более или менее объемистых пакетиков. Встречаются в воздухе, воде - сапрофиты.

5) Стафилококки. Деление их происходит в 3 измерениях, но беспорядочно. Имеют патогенные виды.

Извитые формы бактерий различаются не только по длине и толщине нити, но и по количеству завитков. Они делятся на три группы:

1) спирохеты - гибкие, извилистые формы с большим количеством завитков;

2) спириллы - негибкие, извилистые формы с малым количеством завитков;

3) вибрионы - вид запятой.

Цилиндрическая форма (гр. Bacteria – палочка, лат. Bacillum – палочка)

характерна для большинства бактерий. Палочковидные бактерии подразделяются на образующие и не образующие эндоспор.

Палочки, образующие споры, называют бациллами. Спорообразование не есть способ размножения. Это - способ сохранения вида попавшего в неблагоприятные для него жизненные условия. В клетке всегда образуется только одна спора.

Споры - это самые устойчивые живые существа на земле. Попадая в благоприятные условия, спора прорастает. Процесс превращения споры в растущую (вегетативную) клетку начинается с поглощением ею воды и набухания споры. При этом происходят глубокие физиологические изменения: усиливается дыхание и активизируются ферменты. В этот же период спора теряет свою термоустойчивость. Затем внешняя оболочка ее разрывается и из образовавшейся структуры формируется вегетативная клетка.

Не все бактерии могут самостоятельно передвигаться. Таковы некоторые палочки и все без исключения кокки. Микробы же, обладающие подвижностью, движутся при помощи жгутиков. Было установлено, что они могут передвигаться со скоростью 20 микрон в секунду.

Оборудование и материалы:

1) микроскоп АЛЬТАМИ 136;

2) препараты бактерий.

Задание: промикроскопировать препараты основных форм бактерий.

Вопросы к отчету лабораторной работы № 10

1) Назвать основные формы бактерий.

2) Понятие патогенных и апатогенных микробов.

3) Особенности микроорганизмов.

Лабораторная работа № 11

Приготовление живых препаратов микроорганизмов для микроскопирования

Цель работы:ознакомится с техникой приготовления прижизненных (временных) препаратов микроорганизмов.

Для наблюдения микроорганизмов под микроскопом необходимо соответ­ствующим образом приготовить препарат. Препарат готовят обычно на пред­метных стеклах толщиной 1,2 – 1,4 мм. Применение более толстых стекол нарушает фокусировку конденсора, что резко снижает четкость изображе­ния. Весьма существенным моментом является подготовка предметных сте­кол. Поверхность стекла должна быть тщательно очищена и обезжирена, чтобы капля жидкости равномерно растеклась по стеклу, а не собиралась в выпуклые, медленно высыхающие капли. Для этого сухое стекло необхо­димо тщательно натереть мылом, после чего вытереть чистой хлопчатобу­мажной салфеткой.

Покровные стекла, применяемые обычно для приготовления препаратов живых микроорганизмов (бактерий), также должны быть тщательно вымы­ты. Толщина покровных стекол не должна превышать 0,15 – 0,17 мм. Для микроскопирования с иммерсией требуются покровные стекла толщиной 0,09 – 0,12 мм. Для приготовления препаратов студент получает чистые культуры микроорганизмов, выращенные в пробирках на различных пита­тельных средах. Пробирки с культурами закрыты ватными пробками, кото­рые предохраняют их содержимое от попадания посторонних микроорганиз­мов из окружающего воздуха. Эти культуры называются чистыми, так как они выращены изолированно от посторонних микроорганизмов.

Для определения формы бактерий, способности их к спорообразованию, подвижности достаточно исследовать их в живом состоянии на препаратах «раздавленная» и «висячая капля».

Метод «раздавленная капля». На чистое предметное стекло при помощи микробиологической петли наносится небольшая капля водопроводной воды; дистиллированную воду брать не рекомендуется, так как в ней отсутствуют необходимая для микробов концентрация солей, что может вызвать изменение формы клеток, потерю ими подвижности и т. д. В каплю воды бактериологической петлей, прокаленной в пламене горелки и охлажденной, помещают исследуемый материал. Им могут служить настои мяса, рыбы, белка яйца, навоза, сена, картофеля, гороха и прочие, а также чистые культуры микроорганизмов.

Покровное стекло ставят на ребро у края капли и постепенно опускают на нее. При осторожном опускании покровного стекла между стеклами не остается пузырьков воздуха, мешающих микроскопированию. Капля должна быть небольшой, чтобы после «раздавливания» жидкость не выступала за края покровного стекла.

В препарате можно найти микро-, дипло-, стрептококки, бактерии, бациллы.

По характеру их движения можно предположить тип жгутикования (сами жгутики в живом препарате увидеть не удается): перитрих – кувыркающиеся движения, монотрих, лофотрих – направленное, стремительное. Споры в водном препарате отличаются от микрококков резкой очерченностью, сильно преломляют свет и кажутся блестящими или темными.

Препарат «раздавленная капля» быстро готовится, и позволяет установить форму клеток микроорганизмов, их размеры, способ спорообразования, а также наличие или отсутствие подвижности, но, к сожалению, является недолговечным.

Метод «висячая капля».«Висячей каплей» удобнее пользоваться для наблюдения подвижности микробов, их развития, размножения, прорастанием спор.

На покровное стекло наносят бактериологической петлей очень небольшую каплю препарата. Покровное стекло должно быть абсолютно обезжиренным. Опрокидывают покровное стекло над углублением специального предметного стекла. Края углубления предварительно смазывают вазелином. Капля должна висеть на покровном стекле над углублением предметного. Препарат может хранится долго.

Оборудование и материалы:

1) микроскоп АЛЬТАМИ 136;

2) препараты бактерий, предметные и покровные стекла, микробиологические петли.

Задание: приготовить прижизненные препараты из полученных у преподавателя культур; промикроскопировать сделанные препараты и зарисовать в тетрадь.

Вопросы к отчету лабораторной работы № 11

1) Методика приготовления прижизненных (временных) препаратов микроорганизмов «раздавленная капля».

2) Методика приготовления прижизненных (временных) препаратов микроорганизмов «висячая капля».

Библиографический список

1) СанПиН 2.1.4.1074-01. Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества, 2002.

2) Баранова, А.Г. Практикум по химии воды: Учебное пособие/А.Г.Баранова.-Пенза: Изд-во Пензенского инженерно-строительного института, 1992.

3) Таубе, П.Р. Химия и микробиология воды/ П.Р. Таубе, А.Г. Баранова.-М.: Высшая школа, 1983.

4) Карюхина, Т.А. Химия воды и микробиология/ Т.А.Карюхина, И.Н.Чурбанова.- М.: Стройиздат, 1983.

Подписано в печать Формат 60×84/16.

Бумага офсетная. Печать трафаретная. Гарнитура «Таймс».

Усл. печ. л. 1,86. Уч.-изд. л. 1,76. Тираж 150 экз. Заказ №

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального образования

«Волгоградский государственный архитектурно-строительный университет»

Редакционно-издательский отдел

Сектор оперативной полиграфии ЦИТ

400074, Волгоград, ул. Академическая, 1