Количественное определение. Рибофлавин.0,05 г лекарственной формы растворяют в воде в мерной колбе емкостью 25 мл при нагревании на водяной бане

Рибофлавин.0,05 г лекарственной формы растворяют в воде в мерной колбе емкостью 25 мл при нагревании на водяной бане. После охлаждения доводят объем раствора водой до метки и измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 445 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Раствор сравнения – вода. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора, содержащего 2,5 мл 0,004% раствора рибофлавина и 7,5 мл воды. Содержание рибофлавина в граммах (Х) в лекарственной форме вычисляют по формуле:

Приготовление стандартного раствора рибофлавина

0,0100 г рибофлавина (точная навеска) растворяют в 150 мл воды в мерной колбе на 250 мл при нагревании на водяной бане. После охлаждения объем раствора доводят водой до метки. В 1 мл стандартного раствора содержиться 0,00004 г рибофлавина (0,004%). Раствор устойчив в течение месяца при хранении в защищенном от света месте.

Аскорбиновая кислота. 0,1 г лекарственной формы растворяют в 2 мл воды и тируют раствором йода (0,1 моль/л) до буро-синего окрашивания (индикатор крахмал).

Глюкоза. 0,3 г лекарственной формы растворяют в 2 мл воды (точно пипеткой) и определяют показатель преломления раствора. Содержание глюкозы вычисляют по формуле:

Контрольные вопросы и задачи.

1. История открытия витамина В₁. Распространение в природе. Биологическая роль в организме, биотрансформация, связь строения с действием.

2. Химические свойства тиамина.

3. Строение, латинские и химические названия препаратов (тиамина бромид, тиамина хлорид, фосфотиамин, кокарбоксилаза).

4. Источники и способы получения.

5. Методы идентификации.

6. Химическая структура и номенклатура фолиевой кислоты, составные части молекулы.

7. Биологическая роль, связь структуры с биологическим действием.

8. Физико-химические свойства. Определение подлинности фолиевой кислоты.

9. Количественное определение фолиевой кислоты и ее лекарственных форм.

10. Химическая структура и номенклатура рибофлавина, рибофлавина мононуклеотид, флавината, бензафлавина.

11. Биологическая роль рибофлавина в биохимических процессах организма человека. Биотрансформация при этих процессах.

12. Методы получения рибофлавина и рибофлавина мононуклеотида.

13. Физико-химические свойства рибофлавина и рибофлавина мононуклеотида. Определение подлинности на основе химических свойств.

14. Определение чистоты и методы количественного определения рибофлавина и рибофлавина мононуклеотида.

15. Обоснуйте методики ГФ:

1. Реакции подлинности рибофлавина

2. Определение примеси люмифлавина, количественное определение рибофлавина

3. Первая реакция подлинности и количественное определение фолиевой кислоты

16. Решите задачи:

16.1. Какой объем 0,1 моль/л раствора хлористоводородной кислоты израсходуется при количественном определении рибофлавина по методу Кьельдаля, если навеска для определения 0, 1205 г. М.м. рибофлавина = 376, 37 г/моль.

16.2. Какую навеску 1% раствора рибофлавина мононуклеотида следует взять, чтобы на титрование ее израсходовалось 5 мл 0,1 моль/л раствора хлористоводородной кислоты. М.м. рибофлавина мононуклеотида (безводн.) = 487,3 г/моль.

16.3. Рассчитайте удельное вращение рибофлавина, если для определения взят 0,5% раствор, длина поляриметрической трубки 20 см, угол вращения -1,2°

16.4. Рассчитайте потерю в массе при высушивании рибофлавина, если взята навеска 0, 5002 г, навеска после высушивания - 0, 4952 г.

16.5. Рассчитайте содержание рибофлавина впрепарате, если при определении по методике ГФ оптическая плотность раствора составила 0,51. Сделайте заключение о качестве препарата.

Приложение 1.