Качественные реакции на адреналин
Адреналин – гормон, вырабатывающийся хромаффинными клетками различной локализации. По химическому строению принадлежит к пирокатехинам, которые как все фенолы дают с хлорным железом характерные цветные реакции, обусловленные образованием комплексных фенолятов железа.
Реакция на адреналин с хлоридом железа
Ход определения
В пробирку поместите 1-2 мл раствора адреналина (1:1000) и прибавьте по каплям 1%-ный раствор хлорида железа. Жидкость окрашивается в яркий изумрудно-зеленый цвет, постепенно переходящий в желтый. Добавление по каплям концентрированного NН4ОН вызывает изменение окраски на зеленую, быстро преобразующуюся в красную, а затем в коричневую.
Реакция на адреналин с йодатом калия
Ход определения
В сухую пробирку налейте около 1 мл раствора адреналина (1:1000), прибавьте по каплям (5-10) 10%-го раствора КIО3 и столько же 10%-го раствора СН3СООН. Полученную жидкость слегка нагрейте, появляется красно-фиолетовое окрашивание.
Диазореакция на адреналин
Ход определения
В пробирку налейте 1-2 мл 1%-го раствора сульфаниловой кислоты, добавьте равное количество 5%-го азотистокислого натрия, а затем 1-2 мл раствора адреналина (1:1000) и такое же количество 10%-го раствора Nа2СО3. После перемешивания жидкость окрашивается в красный цвет.
Количественное определение адреналина (по Фолину)
Метод основан на колориметрическом определении интенсивности синего окрашивания, которое образуется при взаимодействии адреналина с реактивом Фолина. Реактив Фолина состоит из солей фосфорновольфрамовой и фосфорномолибденовой кислот. Эти соли при взаимодействии с адреналином восстанавливаются с образованием более жидких окислов металлов, комплексы которых окрашиваются в синий цвет.
Ход определения
В сухую пробирку отмерьте пипеткой 1 мл испытуемого раствора адреналина, 4 мл 10% раствора углекислого натрия и 0,5 мл реактива Фолина. Содержимое пробирки стряхните, через 5 минут интенсивность полученного синего окрашивания измерьте на ФЭК при длине волны 620-650 нм против контроля, содержащего 1 мл дистилированной воды, 4 мл 10% раствора углекислого натрия и 0,5 мл реактива Фолина.
Зная оптическую плотность испытуемого раствора по калибровочной кривой, определите концентрацию адреналина в г/л. Калибровочную кривую постройте с пробами, содержащими 0,01, 0,02, 0,04 г/л стандартного раствора адреналина.
Качественная реакция на фолликулин (эстрон)
Женские полые гормоны (эстрон, эстрадиол, эстриол, прогестерон) синтезируются из холестерина, основа которого циклопентанпергидрофенантрен при окислении может давать окрашенные производные.
Ход определения
К 1 капле фолликулина (маслян. раствора) добавьте 10 капель концентрированной серной кислоты; пробирку поставьте на водяную баню на 10 минут. Жидкость в сосуде постепенно окрашивается в желтый, а затем в оранжево-бурый цвет.
Контроль выполнения лабораторной работы
1. Какими цветными реакциями можно обнаружить адреналин?
2. Объясните механизм реакции адреналина с хлорным железом.
3. С помощью какой реакции регистрируется фолликулин?
4. В чем заключается химизм реакции на фолликулин?
5. Что лежит в основе количественного определения адреналина?
Темы рефератов:
1. Ятрогенная надпочечниковая недостаточность.
2. Методы лабораторной диагностики феохромоцитомы.
3. Мужской и женский гермафродитизм.
4. Участие гормонов в обеспечении памяти.
5. Влияние гормона роста на углеводный, липидный метаболизм.
6. Видовая специфичность соматотропного гормона.
7. Роль лептина в организме.
8. Стресс, общий неспецифический синдром адаптации.
Практическое занятие № 27
Коллоквиум по теме: «Биологически активные вещества»
1. Понятие о витаминах как биологически активных веществах, их общие биологические свойства, суточная потребность в них.
2. Классификация витаминов, общая характеристика липо- и гидровитаминов. Классификация незаменимых пищевых факторов по функциональному признаку, характеристика гормоновитаминов, энзимовитаминов и редокс-витаминов.
3. Судьба витаминов в организме. Происхождение. Особенности всасывания в тонком кишечнике. Роль печени в обмене витаминов.
4. Гипо- и гипервитаминозы, их причины. Экзогенные гиповитаминозы, обусловленные абсолютной или относительной недостаточностью. Эндогенные первичные гиповитаминозы как варианты наследственной патологии. Эндогенные вторичные гиповитаминозы как следствие каких-либо заболеваний.
5. Антивитамины, механизмы их действия. Примеры. Методы исследования витаминов.
6. Витамины группы А, особенности их строения, провитамины. Транс-ретиноевая кислота как гормоновитамин. Каротины и каротиноиды. Биологическая роль, участие в процессах зрения.
7. Основные звенья в патогенезе гиповитаминозов (экзогенного и эндогенного) витамина А. Токсичность, пищевые источники, суточная потребность.
8. Витамины группы D, химическая природа, функции, механизм активации. Роль кальцитриола в фосфорно-кальциевом обмене. Пищевые источники, суточная потребность.
9. Гиповитаминоз витамина D. Рахит, причины, основные симптомы, профилактика. Остеопороз. Токсичность витамина Д. Поражение органов при гипервитаминозе.
10.Витамины группы К, викасол. Роль в организме, пищевые источники, суточная потребность. Симптомы гипо-, гипервитаминоза. Антивитамины.
11.Витамины группы Е, основной механизм их действия, природные источники. Патогенез дефицита.
12.Витамины группы F. Строение, биологическая функция, содержание в продуктах питания. Клинические симптомы и патохимия гиповитаминоза; применение с лечебной целью.
13.Убихиноны, строение, сходство с витаминами К и Е в строении. Участие в биологическом окислении. Использование КоQ в качестве лечебного средства.
14.Витамин В1. Строение тиаминдифосфата, его коферментные функции. Тиаминтрифосфат, его значение для центральной нервной системы.
15.Бери-бери – экзогенный гиповитаминоз витамина В1. Клинические симптомы заболевания. Пищевые источники, суточная потребность, токсичность тиамина.
16.Активные формы витамина В6. Участие данного незаменимого пищевого фактора как кофермента энзимов в реакциях метаболизма аминокислот (реакциях декарбоксилирования, дезаминирования, трансаминирования).
17.Экзогенный и первичные эндогенные гиповитаминозы витамина В6, их клинические проявления. Природные источники, суточная потребность.
18.Витамины, участвующие в регуляции кроветворения (В12 и Вс), особенности строения. Усвоение организмом, суточная потребность, пищевые источники, биологическая роль. Мегалобластическая злокачественная макроцитарная анемия Аддисона-Бирмера как вариант гиповитаминоза. Использование кобаламина и фолиевой кислоты в клинике. Их токсичность.
19.Витамины, нормализующие проницаемость сосудистой стенки: витамины С и Р, механизм их действия.Природные источники аскорбиновой кислоты и биофлаваноидов, суточная потребность. Цинга – экзогенный полигиповитаминоз витаминов С и Р. Токсичность.
20.Витамины - компоненты коферментов дегидрогеназ. Особенности строения НАД+, НАД+Ф, ФМН, ФАД. Основные клинические проявления гиповитаминозов, пищевые источники, суточная потребность. Токсичность никотинамида.
21.Участие биотина и витамина В3 в обмене жирных кислот. Принцип строения HSКоА, его роль в реакциях ацилирования, значение. Симптомы гиповитаминозов, суточная потребность, источники. Токсичность.
22.Гормоны, определение. Иерархия эндокринной системы. Классификация гормонов (анатомическая, гистологическая, по масштабности действия, по строению). Свойства гормонов.
23.Взаимодействие гормонов между собой и субстратами (синергическое, антагонистическое, пермиссивное, ±- взаимодействие). Судьба гормонов в организме (синтез, транспорт, рецепция, распад).
24.Виды рецепции (трансмембранная, внутриклеточная). Передача сигнала путем внутриклеточной рецепции. Варианты окончательных эффектов (изменение концентраций ферментов, мембранных белков).
25.Трансдукция гормонов пептидной природы. Механизмы синтеза циклических нуклеотидов (цАМФ, цГМФ). Их роль в качестве аллостерических эффекторов протеинкиназ. Активация фосфолипазы С. Образование диацилглицеролов, их участие в работе протеинкиназы С. Варианты протеинкиназ, особенности активации каждой из них (протеинкиназы А,С,G, тирозинкиназа). Механизм образования ИФ3, их роль в качестве second messenger.
26.Понятие о десенситизации гормона: пути инакцивации.
27.Причины избыточного и недостаточного эффектов гормонов.
28.Тироидные гормоны; строение, синтез, органы – мишени, вид рецепции. Роль йода, селена в функционировании данных гормонов. ТТГ - основной регулятор статуса тироидных гормонов. Интимные механизмы влияния тироидных гормонов на углеводный, липидный, азотистый, энергетический обмены.
29.Механизмы развития симптомов нарушения функционирования гормонов щитовидной железы (болезнь Грейвса, зоб Хашимото, эндемический зоб, кретинизм и др. IДД).
30.Кальций, механизмы его действия в тканях. Взаимосвязь с фосфатами. Гормоны, регулирующие обмен ионов данного металла (кальцитриол, тирокальцитонин, паратгормон).
31.Тирокальцитонин, природа, механизм активации, органы – мишени, вид рецепции. Влияние на обмен кальция.
32.Паратгормон, природа, механизм активации, органы – мишени, вид рецепции, биологическая роль. Патология (болезнь Реклингаузена, паратиреопривная тетания), причины, основные симптомы.
33.Поджелудочная железа, ее эндокринная функция. Природа, виды рецепции, клетки – мишени основных гормонов (инсулина, глюкагона, соматостатина). Влияние на различные звенья метаболизма. Роль голода, глюкозы в регуляции секреции гормонов.
34.Гормоны коры надпочечников; классификация, схема синтеза, строение отдельных представителей.
35.Глюкокортикостероиды, транспорт к клеткам–мишеням, вид рецепции. Механизм влияния на углеводный, липидный, азотистый обмены. Роль АКТГ; применение ГКС в клинике.
36.Альдостерон, строение, органы–мишени, вид рецепции, механизм действия. Система ренин – ангиотензин – альдостерон. Натрийуретический предсердный полипептид как антагонист МКС.
37.Катехоламины, химическая природа, последовательность реакций синтеза. Медиаторный и гормональный эффекты. Механизм трансдукции сигнала, виды рецепторов, окончательные эффекты в клетках – мишенях. Биохимия стресса. Инактивация катехоламинов.
38.Патология надпочечников (синдром Иценко – Кушинга, синдром Конна, феохромоцитома, бронзовая болезнь, кортикоэстрома, адреногенитальный синдром), механизмы развития специфических симптомов страданий.
39.Половые гормоны. Места выработки, химическая природа, способ транспорта, органы–мишени, вид рецепции. Роль гонадотропных гормонов гипофиза.
40.Мужские половые гормоны (андростерон, тестостерон), биологическая роль. Влияние на психо–эмоциональное состояние. Применение синтетических аналогов в клинической практике.
41.Цикличность действия женских половых гормонов. Эстрогены, гестагены, схема синтеза, строение, влияние на различные обмены веществ, на психологическое состояние.
42.Гипофиз. Классификация гормонов аденогипофиза (семейство проопиомеланокортина, гормоны - гликопротеиды, гормоны – белки со сходной аминокислотной последовательностью).
43.Гормоны продукты гидролиза ПОМК (АКТГ, МСГ, энкефалины, эндорфины, β- липотропин), химическая природа, органы–мишени, механизмы трансдукции сигнала, биологическая роль. Участие в обеспечении памяти.
44.Гормоны – гликопротеиды (ТТГ, ФСГ, ЛГ), особенности строения, влияние на органы – мишени.
45.СТГ, лактотропный гормон, хорионический гонадотропин; сходство в строении и механизме действия.
46.Патология (гигантизм, акромегалия, болезнь Иценко – Кушинга и др.), основные симптомы.
47.Гормоны нейрогипофиза, место синтеза. Клетки – мишени, виды рецепции; механизм действия вазопрессина в органах–мишенях. Симптомы несахарного диабета. Окситоцин, его участие в акте родов, предположительная роль в иммунитете.
48.Гормоны эпифиза, химическая природа, вид рецепции, органы– мишени, биологическая роль.
49.Факторы гипоталамуса (либерины и статины), химическая природа, виды рецепции, регуляция функций гипофиза.