Проба используется в клинике для обнаружения белка.

Работа 18. Изучение процесса высаливания белка

Задача работы:изучить особенности процесса высаливания белка.

Оборудование, материалы:яичный белок, насыщенный раствор сульфата аммония, спирт, 10%-й раствор щелочи, 1%-й раствор сульфата меди, фильтры, пипетки, пробирки.

Выполнение работы:

а) Осаждение белков сульфатом аммония.

1. К 15 каплям раствора белка добавляют 15 капель насыщенного раствора сульфата аммония и перемешивают. Получается полунасыщенный раствор сульфата аммония, в котором выпадает осадок глобулинов (небольшое количество белых хлопьев).

2. Через 5 минут отфильтровывают содержимое пробирки. В фильтрате остаются альбумины.

3. К фильтрату добавляют тонкоизмельченный порошок сульфата аммония до полного насыщения, т.е. до тех пор, пока новая порция порошка останется нерастворенной. Выпадает осадок яичного альбумина.

4. Альбумин отфильтровывают.

5. Проверяют фильтрат на отсутствие белка с помощью биуретовой реакции: к 1 мл исследуемого фильтрата приливают 1 мл 10% раствора гидроксида натрия и 3-5 капель 1% раствора сульфата меди и перемешивают. Фиолетовое окрашивание должно отсутствовать. Содержимое пробирки при наличии белка приобретает фиолетовый цвет в результате образования комплексного соединения.

O O O O

NH₂-CH- C- NH-CH -C- NH-CH -C- NH-CH -C- NH - - - - CH-СООН

| | | | | + Cu(OH)₂

R₁ R₂ R₃ R₄ R_n

Cu

O O OH O

NH₂-CH- C= N -CH –C= N -CH –C= N -CH -C- NH - - - - CH-СООН

| | | | |

R₁ R₂ R₃ R₄ R_n

БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ

Рассмотрены лабораторные работы, касающиеся теоретических основ строения и реакционной способности различных классов органических соединений. Приобретенные теоретические знания, практические навыки и умения составят базу для дальнейшего изучения биохимии. Они будут востребованы также при изучении фармакологии, гигиены и других дисциплин.

ТЕМА 1. СПИРТЫ, ФЕНОЛЫ

В этом разделе представлены работы по изучению свойств спиртов и фенолов.

Спирты и их производные находят широкое применение в практической медицине. Так, этиловый спирт, обладая антисептическими свойствами, применяется для обеззараживания хирургических инструментов и операционного поля. Большое количество спирта идет на изготовление настоек и экстрактов из различных лекарственных трав. По фармакологическим свойствам этиловый спирт относится к наркотическим веществам. Поливиниловый спирт входит в состав антисептического средства йодинола. Этот спирт замедляет выделение йода из лекарственного средства и удлиняет взаимодействие йодинола с тканями организма. Глицерин используется в качестве основы для приготовления мазей, паст и других средств. Некоторые из спиртов являются сильными ядами. Так, употребление метилового спирта в незначительном количестве вызывает ослабление зрения или полную слепоту, а дозы более 10 мл могут оказаться смертельными, так как в организме человека превращается в формальдегид и муравьиную кислоту. Сильным токсическим эффектом обладает также этиленгликоль.

Фенолы и его гомологи используются при производстве полимеров, антиоксидантов, а также в качестве антисептиков. Так, лизол (раствор крезола в калийном мыле) используется для обеззараживания выделений, предметов и вещей, зараженных возбудителями кишечных и других инфекций. Резорцин входит в состав лекарственных средств, применяющихся при кожных заболеваниях, тимол является противоглистным средством. Производные пирокатехина — адреналин и норадреналин синтезируются в надпочечниках и обладают заметным биологическим действием: регулируют кровяное давление, уровень глюкозы в крови и др. Токсичные фенолы образуются в нашем организме и обезвреживаются в печени.

Задача работ:изучить физико-химические свойства спиртов и фенолов. Познакомиться с качественными реакциями на многоатомные спирты и фенолы.

Оборудование, материалы:10%-й раствор щелочи, 1%-й раствор сульфата меди, глицерин, маннит, этиловый спирт, 5%-ные растворы фенола, пирокатехина, резорцина, гидрохинола, пирогаллола. 1%-ный раствор хлорида железа (III), адреналин, пипетки, пробирки.