Диффузный метод дисков

Исследуемую бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар или среду АГВ в чашке Петри.

С р е д а АГВ : сухой питательный рыбный бульон , агар-агар, натрий фосфат двузамещенный. Среду готовят из сухого порошка в соответствии с инструкцией.
На засеянную поверхность пинцетом помещают на одинаковом расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определенные дозы разных антибиотиков. Посевы инкубируют при 37°С до следующего дня.

В зависимости от диаметра зоны задержки роста различают степень чувствительности испытуемого штамма: чувствительные, малочувствительные и устойчивые (отсутствие зоны).

Рис. 1. Зона задержки роста культуры вокруг диска, пропитанного антибиотиком.

Рис 2. Культура стрептококка, чувствительная (слева) и устойчивая (справа) к антибиотику Р.

Механизмы резистентности к антибактериальным препаратам ОБЩИЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИОсновой терапевтического действия антибактериальных препаратов является подавление жизнедеятельности возбудителя инфекционной болезни в результате угнетения более или менее специфичного для микроорганизмов метаболического процесса. Угнетение происходит в результате связывания антибиотика с мишенью, в качестве которой может выступать либо фермент, либо структурная молекула микроорганизма.Резистентность микроорганизмов к антибиотикам может быть природной и приобретенной.

· Истинная природная устойчивость характеризуется отсутствием у микроорганизмов мишени действия антибиотика. При наличии у бактерий природной устойчивости антибиотики клинически неэффективны. Природная резистентность является постоянным видовым признаком микроорганизмов и легко прогнозируется.

· Под приобретенной устойчивостью понимают свойство отдельных штаммов бактерий сохранять жизнеспособность при тех концентрациях антибиотиков, которые подавляют основную часть микробной популяции. Формирование резистентности обусловлено генетически: приобретением новой генетической информации или изменением уровня экспрессии собственных генов.

Хронизация инфекционного процесса, как правило, определяется несостоятельностью иммунологического ответа к возбудителю. Обязательным условием развития инфекционных заболеваний, индуцированных условно-патогенными микроорганизмами, является иммуносупрессивное состояние хозяев, т. е. наличие иммунодефицита. Особенности антибактериального иммунитета.При тех бактериальных инфекциях, при которых имеется продукция экзотоксинов. определяющим является не антибактериальный, а антитоксический иммунитет (дифтерия, столбняк, ботулизм и др.). Ведущая роль в нейтрализации токсинов принадлежит антителам. Молекула антитела, присоединившись вблизи активного центра токсина, может стереохимически блокировать его связь с рецептором. В комплексе с антителами токсин теряет способность к диффузии в тканях и может стать объектом фагоцитоза. Основным механизмом антибактериальной защиты является фагоцитоз. Внутриклеточно паразитирующие бактерии. микобактерии туберкулеза, бруцеллы, сальмонеллы и др., а также риккетсии, хламидии и микоплазмы отличаются повышенной устойчивостью к гибели после фагоцитоза. Они защищаются от механизмов уничтожения, подавляя слияние фагосом с лизосомами, образуя наружную оболочку или выходя из фагосом в цитоплазму. Эти бактерии уничтожаются механизмами клеточного иммунитета. Поэтому напряженность антибактериального иммунитета при таких инфекциях определяется не гуморальным, а клеточным иммунитетом. Выраженность и сила этого иммунитета определяется путем постановки кожно-аллергических проб или в тестах оценки клеточного иммунитета in vitro (PTMЛ, РБТЛ и др.). В большинстве случаев для оценки уровня противобактериального иммунитета используют различные методы выявления специфических антител в сыворотке крови, даже если их уровень и не определяет напряженности антибактериального иммунитета. Приобретенный антибактериальный иммунитет, как правило, является типоспецифическим и нестойким. Этим объясняются частые случаи повторных заболеваний бактериальными инфекциями и необходимость проведения частых ревакцинаций при использовании бактериальных профилактических вакцин, формирование нестерильного иммунитета или неэффективность вакцинации при отдельных бактериальных инфекциях. Таким образом, иммунитет к инфекциям представляет собой постоянное поле сражения между защитными механизмами хозяина и мутирующими микробами, стратегия которых состоит в том как противостоять действию этих механизмов.

Классификация возбудителей бактериальных инфекций. Источники инфекции, пути заражения.