Среда с теллуритом калия и флоромицином или полимиксином
(Бакулов и др. 1970).
К 1 л расплавленного МПА (рН 7,2-7,4) перед разливом добавляют 10 мл 2%-го водно-глицеринового раствора теллурита калия и 0,3-0,5 мл раствора флоримицина или полимиксина (500 тыс. ед. препарата разводят в 10 мл физиологического раствора).
Цвет колонии на среде с теллуритом калия черный.
Предоставленная далее рецептура NN 3-11 предложена Подкомитетом по таксономии листерий и является унифицированной для всех лабораторий, работающих с данным микроорганизмом.
Триптозно-фосфатный бульон (ТРВ).
| Триптоза | 20,0 мг |
| Декстроза | 2,0 г |
| Хлорид натрия | 5,0 г |
| Динатрий фосфат | 2,5 г |
| Дистиллированная вода | 1000,0 мл |
Добавьте ингредиенты к воде. Хорошо смешайте. Когда растворится, доведите рН до 7,3. Разлейте и стерилизуйте автоклавированием при 121°С в течение 15 минут.
Триптозно-фосфатный бульон с полимиксином В
(Бойсен-Мюллер).
| Триптоза | 20,0 мг |
| Декстроза | 2,0 г |
| Хлорид натрия | 5,0 г |
| Динатрий фосфат | 2,5 г |
| Дистиллированная вода | 1000,0 мл |
Добавьте ингредиенты к воде. Размешайте. Когда растворится, доведите рН до 7,3. Стерилизуйте автоклавированием при 121°С в течение 15 минут. Охладите и добавьте 5,0 г стерильной тиамин-HCl и 3,12 мг полимиксина В к 1 л ТРВ. Перемешайте.
Триптозный агар.
Все ингредиенты среды «ТРВ». После растворения добавить бакто-агар «Дифко» – 15,0 г. Стерилизовать автоклавированием при +121°С в течение 15 минут. После охлаждения добавить 5,0 г стерильного тиамин-НСl и перемешать.
Сывороточный агар.
После контролирования рН добавьте агар к бульону. Стерилизуйте автоклавированием при +121°С в течение 15 минут. Охладите до +48°..+50°С и добавьте бычью сыворотку. Осторожно перемешайте.
Кровяной агар.
| Триптоза | 10,0 г |
| Порошок «Лаб-Лемко» (Оксоид) | 3,0 г |
| Хлорид натрия | 5,0 г |
| Бакто-агар (Дифко) | 15,0 г |
| Дистиллированная вода | 1000,0 мл |
Суспендируйте ингредиенты в воде, кроме агара. Хорошо смешайте. Доведите рН до 7,3-7,4. Добавьте агар и стерилизуйте автоклавированием при 121°С в течение 15 минут. Охладите среду до +48°- +50°С и добавьте 50,0 мл стерильной дефибринированной овечьей (лошадиной) крови. Осторожно смешайте и разлейте в чашки Петри.
Бульон Левинталя с трипафлавином и налидиксиновой кислотой
(по Раловичу).
| Порошок «Лаб-Лемко» | 10,0 г |
| Пептон | 10,0 г |
| Хлорид натрия | 5,0 г |
| Дистиллированная вода | 1000,0 мл |
| Дефибринированная овечья кровь | 50,0 мл |
Поместите все ингредиенты в колбу и «проварите» на пару при 100°C в течение 1 часа. Отфильтруйте и доведите рН до 7,4. Стерилизуйте автоклавированием при +121°C в течение 15 минут. Добавьте 2,0 мл 1%-го триптофлавина и 20 мл 2%-го раствора налидиксиновой кислоты. Смешайте, разлейте в пробирки и закупорьте резиновыми пробками.
Среда с ацетатом таллия и налидиксовой кислотой (TN).
| Питательный бульон | 1000,0 мл |
| Глюкоза | 2,0 г |
| Ацетат таллия | 2,0 г |
| Налидиксовая кислота | 40,0 мкг/мл |
Налидиксовую кислоту 0,5 г в кристаллах растворяют в 0,5 мл 1%-го раствора NaOH при добавлении 4,5 мл дистиллированной воды и соответствующего объема основной среды перед 15-минутным автоклавированием при +121°С.
Среда с тиоцианатом и налидиксовой кислотой (PTN).
| Питательный бульон | 1000,0 мл |
| Тиоцианат калия | 37,5 г |
| Налидиксовая кислота | 40,0 мкг/мл |
Питательный бульон, содержащий тиоцианат калия, стерилизуют в течение 15 минут при +121°С. Затем добавляют налидиксовую кислоту.
Агар с триптофлавином и налидиксовой кислотой.
| Триптозный агар «Дифко» | 41,0 г |
| Налидиксовая кислота | 0,04 г |
| Дистиллированная вода | 1000,0 мл |
Налидиксовую кислоту 0,8 г растворяют в 10 мл NaOH. Затем, добавляя дистиллированную воду, доводят до 100,0 мл. 5 мл этого раствора, содержащего налидиксовую кислоту, добавляют к основной среде для получения конечной концентрации 40 мкг/мл. После 15-минутной стерилизации при +120°С среду охлаждают до 70°C. Акрифлавин нейтральный растворяют в стерильной дистиллированной воде для получения 0,5% (вес/объем) раствора. Два миллилитра этого раствора добавляют к среде, содержащей триптозно-налидиксовую кислоту, чтобы получить конечную концентрацию в 10 мкг/мл. Среду тщательно перемешивают и разливают по чашкам.
Мак Брайда листериозный агар MLA
(по прописи Lovett, 1988).
| Фенилэтаноловый агар «Дифко» | 35,5 г/л |
| Глицинангидрид | 19,0 г/л |
| Хлористый литий | 0,5 г/л |
| Овечья кровь | 5 % |
Модифицированный листериозный агар Мак Брайда
(по прописи Lovett, 1988)
Среда МLА, но вместо овечьей крови добавляют 0,2% циклогексамида.
Селективный агар Мак Брайда
(по прописи Schidt et. al., 1988)
| Казеин пептон с триптическими добавками | 15,0 г/л |
| Пептон соевой муки | 5,0 г/л |
| Хлористый натрий | 5,0 г/л |
| Фенилэтиловый спирт | 2,5 г/л |
| Глицин | 10,0 г/л |
| Хлористый литий | 0,5 г/п |
| Агар | 15,0 г/л |
| Дистиллированная вода | 1000,0 мл |
| рН – 7,3 |
Обогащенная среда для выделения листерий
(по прописи Lee, McClain, 1986).
В питательную среду добавляют:
| Протеаза пептона | 5 г/л |
| Триптон | 5 г/л |
| Порошок «Лаб-Лемко» | 5 г/л |
| Экстракт дрожжей | 5 г/л |
| Na2HPO4 | 12 г/л |
| NaCl | 20 г/л |
| КН2РО4 | 2,35 г/л |
| Эскулин | 1 г/л |
| Налидиксовая кислота | 20 мкг/л |
| Акрифлавин | 20 мкг/л |
Агаровая среда для выделения листерий
(по прописи Rodriquez et. al.).
| Пептон | 3,0 г/л |
| Неопептон | 3,0 г/л |
| Протеаза пептона | 3,0 г/л |
| Хлористый натрий | 5,0 г/л |
| Эскулин | 1,0 г/л |
| Na2HPO4 · 2Н2О | 12,0 г/л |
| Аммоний-железо сульфат | 1,0 г/л |
| Акрифлавин | 0,012 г/л |
| Налидиксовая кислота | 0,050 г/л |
| Агар | 15,0 г/л |
Среда для выделения листерий (LPM)
| Фенилэтаноловый агар «Дифко» | 35,5 г/л |
| Глицин ангидрид | 10,0 г/л |
| Хлористый литий | 5,0 г/л |
| Моксалат | 20 мкг/л |
Селективная среда FDA
(по прописи Schidt et. al., 1988).
| Триптический перевар (BBL) | 30,0 г/л |
| Экстракт дрожжей | 6,0 г/л |
| Акрифлавин-HCl | 16,0 мг/л |
| Налидиксовая кислота | 40,0 мг/л |
| Циклогексамид | 50,0 мг/л |