Раздел vi обмен и функции липидов
ЗАНЯТИЕ 1
ТЕМА: Строение и свойства липидов.
ЦЕЛЬ: Изучить структурную организацию всех классов липидов.
ОСНОВНЫЕ ВОПРОСЫ
1.Общая характеристика и классификация липидов.
2. Строение и свойства жирных кислот и ациглицеролов.
3. Строение и свойства фосфолипидов и сфинголипидов.
4. Строение и свойства стероидов.
Оснащение занятия:
Реактивы: 1. Растительное масло или рыбий жир, раствор в хлороформе
2. Бром или йод, раствор в хлороформе
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 1. Открытие непредельных жирных кислот в жире.
Принцип метода:Непредельные жирные кислоты легко присоединяют галогены по месту двойных связей, образуя галогенпроизводные жирных кислот, что доказывается обесцвечиванием раствора брома или йода. О содержании непредельных жирных кислот в жире можно судить по его “йодному числу”, показывающему количество граммов йода, присоединенных к 100 г жира.
Ход работы:К 15-20 каплям раствора жира в хлороформе прибавляют, помешивая, по одной капле хлороформенного раствора брома или йода(окрашен).
Вначале наблюдают обесцвечивание растворов брома или йода. После насыщения всех непредельных связей в жире дальнейшее добавление растворов галогенов обесцвечивания их не вызывает.
Делают выводы по работе.
ЗАНЯТИЕ 2
ТЕМА:Переваривание и всасывание липидов. Транспортные формы липидов.
ЦЕЛЬ: Изучить процессы переваривания пищевых липидов в ЖКТ и механизм всасывания и транспорта по организму продуктов их гидролиза.
ОСНОВНЫЕ ВОПРОСЫ
1.Общая характеристика и строение желчных кислот. Эмульгирование жиров.
2. Переваривание ациглицеролов.
3. Переваривание фосфолипидов. Роль фосфолипаз в этом процессе.
4. Переваривание эфиров холестерина. Роль холестеролэстеразы в этом процессе.
5. Всасывание продуктов расщепления липидов. Ресинтез жиров.
6. Транспорт липидов. Строение хиломикронов.
7. Транспортные липопротеины - строение, классификация.
Оснащение занятия:
Реактивы: 1. Желчь разведенная в два раза
2. Яичный белок - 1%-ный раствор
3. Мыло - 1%-ный раствор
4. Углекислый натрий - 1%-ный раствор
5. Растительное масло
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 1. Эмульгирование жиров.
Принцип метода:Под действием различных эмульгаторов жир распадается на мельчайшие капельки, образуя эмульсию. Образование эмульсии обусловлено тем, что на поверхности жировых капель располагаются молекулы поверхностно-активных веществ (детергентов, эмульгаторов), которые препятствуют их слиянию.
Ход работы:
Берут 5 пробирок. В пробирку №1 наливают 1 мл воды, в пробирку №2 - 1 мл разведенной желчи, в пробирку №3 - 1 мл 1%-го раствора яичного белка, в пробирку №4 - 1 мл 1%-го раствора мыла и в пробирку №5 - 1 мл 1%-го раствора углекислого натрия. Во все пробирки добавляют по две капли растительного масла и тщательно перемешивают. Во всех пробирках, кроме первой, образуется стойкая эмульсия.
Делают выводы по работе.
ЗАНЯТИЕ 3
ТЕМА: Обмен триацилглицеролов, жирных кислот и кетоновых тел.
ЦЕЛЬ: Изучить процессы синтеза и распада в организме человека триацилглицеролов, жирных кислот и кетоновых тел.
ОСНОВНЫЕ ВОПРОСЫ
1. Синтез жиров в жировой ткани и печени. Мобилизация жиров из жировой ткани.
2. Роль карнитина в транспорте жирных кислот из цитоплазмы в митохондрии.
3. Механизм b-окисления жирных кислот.
4. Энергетический баланс процесса b-окисления.
5. Биосинтез жирных кислот.
6. Синтез кетоновых тел в печени.
7. Окисление кетоновых тел в периферических тканях.
Оснащение занятия:
Реактивы: 1. Моча, содержащая кетоновые тела
2. едкий натр - 10%-ный раствор
3. раствор йода (1 г йода и 2 г йодистого калия в 10 мл воды)
4. Хлорное железо - 10%-ный раствор
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 1. Проба Либена на ацетон.
Принцип метода:При взаимодействии ацетона с йодом в щелочной среде образуется йодоформ, присутствие которого узнается по появлению желтого осадка и характерному запаху.
Ход работы:К 10 каплям мочи добавляют 1-2 капли 10%-го раствора щелочи и по каплям раствор йода в йодистом калии до появления бледно-желтого осадка иодоформа с характерным запахом.
Делают выводы поработе.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 2. Проба Герхарда на ацетоуксусную кислоту.
Принцип метода:При взаимодействии ацетоуксусной кислоты с хлорным железом образуется комплексное соединение железа с енольной формой ацетоуксусной кислоты, имеющее красно-фиолетовую окраску. При стоянии окраска постепенно бледнеет, а при кипячении быстро исчезает вследствие декарбоксилирования ацетоуксусной кислоты.
Ход работы:В пробирку вносят 1 мл мочи и прибавляют по каплям 10%-ный раствор хлорного железа. При этом выпадает осадок фосфатов в виде FePO4. При дальнейшем добавлении хлорного железа появляется фиолетово-красное окрашивание.
Делают выводы по работе.
ЗАНЯТИЕ 4
ТЕМА: Обмен фосфолипидов и холестерина.
ЦЕЛЬ: Изучить процессы синтеза и распада в организме человека фосфолипидов и холестерина.
ОСНОВНЫЕ ВОПРОСЫ
1. Синтез глицерофосфолипидов.
2. Синтез сфингомиелинов.
3. Основные этапы синтеза холестерина
4.Транспорт холестерина.
Оснащение занятия:
Реактивы: 1.Реактив Либермана-Бурхарда
2.Стандартный(200 мг%) раствор холестерина
3.Сыворотка крови
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 1. Количественное определение холестерина колориметрическим методом Илька.
Принцип метода:Холестерин в присутствии смеси уксусного ангидрида, уксусной и серной кислоты в соотношении 1 : 5 : 1 дает зеленое окрашивание ( реакция Либермана-Бурхарда). Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации холестерина.
Ход работы:Берут 5 пробирок. В каждую добавляют по 2,1 мл реактива Либермана-Бурхарда. В пробирки №№ 1,2,3,4 добавляют по 0,1 мл стандартных растворов холестерина с концентрацией 25, 50, 100, 200 мг%. В пробирку №5 осторожно добавляют 0,1 мл негемолизированной сыворотки так, чтобы она стекла по стенке пробирки. Пробирки энергично встряхивают и термостатируют при 37°С 20 минут. Величину экстинкции измеряют на ФЭКе при 670 нм в кювете с толщиной слоя 5 мм. В качестве контроля используют реактив Либермана-Бурхарда. На миллиметровой бумаге строят калибровочный график, по которому определяют концентрацию холестерина в сыворотке крови.
Делают выводы по работе, исходя из того, что норма содержания холестерина в крови составляет 115 - 240 мг%.