Основные тесты (тесты первого уровня), используемые для оценки иммунного статуса
1. Количество лейкоцитов.
2. Количество лимфоцитов.
3. Количество Т-хелперов (CD4).
4. Количество Т-супрессоров (CD8).
5. Индекс соотношения CD4/CD8.
6. Количество Т-лимфоцитов (CD3).
7. Количество Т-лимфоцитов (CD25).
8. Количество нулевых лимфоцитов.
9. Количество В-лимфоцитов (CD20).
10. Спонтанная бластная трансформация лимфоцитов.
11. Активированная бластная трансформация лимфоцитов.
12. Торможение миграции лейкоцитов.
13. Количество иммуноглобулина А.
14. Количество иммуноглобулина М.
15. Количество иммуноглобулина G.
16. Уровень СЗ-компонента комплемента.
17. Уровень С4-компонента комплемента.
18. Фагоцитарная активность нейтрофилов в крови (фагоцитарное число, фагоцитарный
показатель, индекс завершенности фагоцитоза, фагоцитарная емкость крови, коли
чество активных фагоцитов).
19. Окислительный метаболизм гранулоцитов крови (ОМГ-тест).
20. Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) в сыворотке.
Более тщательный анализ иммунологического статуса целесообразно проводить на втором этапе, если имеются отклонения в ориентирующих тестах или при наличии специальных показаний. Для установления уровня и выраженности иммунологического дефекта, оценки механизмов функциональных нарушений определенных звеньев иммунитета рекомендуется выполнение следующих тестов, которые называются аналитическими, или тестами второго уровня.
Дополнительные тесты (тесты второго уровня), используемые для оценки иммунного статуса.
1. Бактерицидность нейтрофилов в спонтанном и активированном тесте с нитросиним
тетразолием (НСТ-тест).
2. Интерлейкин 2 в сыворотке.
3. Количество В-лимфоцитов, несущих IgA в крови.
4. Количество В-лимфоцитов, несущих IgM в крови.
5. Количество В-лимфоцитов, несущих IgG в крови.
6. Гемолитическая активность комплемента в крови.
Дополнительные тесты для оценки противовирусного, противоопухолевого и трансплантационного иммунитета.
1. Количество Т-киллеров (CD45).
2. Количество натуральных киллеров (CD56).
3. Колониестимулирующий фактор.
4. Фактор некроза опухолей.
5. Специфические антитела (титр).
6. Специфические онкомаркеры.
7. Бета-2-микроглобулин в сыворотке.
Исследование иммунного статуса в настоящее время включает оценку следующих его компонентов:
• гуморального иммунитета;
• клеточного иммунитета;
• неспецифической резистентности организма.
Иммунные реакции принято подразделять на два типа: гуморальный и клеточный. Первый основан на выработке антител, второй — на действии активированных тимусзависимых лимфоцитов (Т-лимфоцитов). Для иммунного ответа гуморального типа характерна выработка антител, которые одновременно являются эффекторами В-звена иммунной системы. Для оценки этого звена проводят исследования, которые характеризуют функциональную активность В-звена иммунитета и включают определение концентраций иммуноглобулинов, определение уровня антител после профилактической иммунизации, выявление циркулирующих иммунных комплексов. Клеточный тип ответа характеризуется выработкой большого количества антигенспецифических активированных В- и Т-лимфоцитов. Оптимальный иммунный ответ реализуется только при взаимодействии гуморального и клеточного звеньев иммунитета.
ГУМОРАЛЬНЫЙ ИММУНИТЕТ
Иммуноглобулины представляют собой характерный продукт секреции В-клеток на конечной стадии их дифференцировки, т.е. плазматических клеток. Концентрация иммуноглобулинов в сыворотке является результатом установившегося равновесия между их синтезом и распадом. Дефекты, связанные с нарушением метаболизма иммуноглобулинов, наблюдаются при многих заболеваниях. Уменьшение содержания иммуноглобулинов в сыворотке может происходить по трем причинам:
1) нарушение синтеза одного, нескольких или всех классов иммуноглобулинов;
2) увеличение деструкции иммуноглобулинов;
3) значительные потери иммуноглобулинов (например, при нефротическом синдроме).
Общим следствием указанных процессов является дефицит иммуноглобулинов, а тем самым и антител. Если имеет место 1-й тип (нарушение синтеза), нарушаются реакции иммунного ответа клеточного типа, опосредованные Т-лимфоцитами. Увеличение количества иммуноглобулинов может быть обусловлено усилением их синтеза или уменьшением интенсивности их распада. Повышенная выработка иммуноглобулинов является причиной гипер-гаммаглобулинемии.
IgA в сыворотке
Иммуноглобулины А включают два вида специфических белков: сывороточный и секреторный. IgA в сыворотке содержится в форме мономера (на 90 % IgA,),входит в фракцию бета-глобулинов и составляет до 15 % иммуноглобулинов сыворотки крови. Секреторный IgA содержится в секретах (молоко, слюна, слезная жидкость, секреты кишечного и респираторного тракта) и существует только в форме димера (IgA,и IgA2). Антитела класса IgA синтезируются в основном лимфоцитами слизистых оболочек в ответ на местное воздействие антигена, осуществляют защиту слизистых оболочек от патогенных микроорганизмов, потенциальных аллергенов и аутоантигенов. Связываясь с микроорганизмами, IgA-антитела тормозят их прилипание к поверхности клеток эпителия и препятствуют их проникновению во внутреннюю среду организма, предупреждая тем самым развитие хронических местных воспалительных процессов. Локальный синтез IgA обусловливает местный иммунитет. Проникая во внутреннюю среду организма, IgA инактивирует бактерии и вирусы, активирует комплемент по альтернативному пути. Время полужизни IgA — 6—7 сут.
У человека сывороточный IgA составляет менее 50 % всего пула IgA. Нормальные величины содержания IgA в сыворотке представлены в табл. 7.1. Снижение уровня свидетельствует онедостаточности гуморального и местного иммунитета, нарушении синтеза или усилении катаболизма IgA, а также адсорбции его на иммунных комплексах [Лебедев К.А., Понякина И.Д., 1990]. Изменения концентрации IgA при различных заболеваниях представлены в табл. 7.2.
Таблица 7.1. Содержание IgA в сыворотке в норме [Тиц Н., 1997]
Возраст | Величина, г/л |
Дети: 1—3 мес | 0,06-0,58 |
4-6 » | 0,1-0,96 |
7-12» | 0,36-1,65 |
2—3 года | 0,45-1,35 |
4—5 лет | 0,52-2,2 |
6-7 » | 0,65-2,4 |
10-11 лет | 0,91-2,55 |
12-13 » | 1,08-3,25 |
Взрослые | 0,9-4,5 |
Таблица 7.2. Изменения концентрации IgA при различных заболеваниях
Увеличение концентрации | Снижение концентрации |
Острые и хронические бактериальные, грибковые и паразитарные инфекции Хронические заболевания печени Цирроз печени Ревматоидный артрит Системная красная волчанка Хронический лимфолейкоз Эндотелиомы, остеосаркомы Моноклональная гаммапатия Миеломная болезнь Болезнь Вальденстрема Кандидоз, муковисцидоз Болезни дыхательных путей | Физиологическая гипогаммаглобулинемия (у детей в возрасте 3—5 мес), врожденная гипогаммаглобулинемия или агаммагло-булинемия Заболевания, приводящие к истощению иммунной системы: • новообразования иммунной системы; • состояние после удаления селезенки; • кишечные и почечные синдромы потери белка; • лечение цитостатиками и иммунодепрессантами Острая вирусная, хроническая бактериальная инфекции |
IgM в сыворотке
Иммуноглобулины М относятся к гамма-глобулиновой фракции и составляют в ней около 5 %. Они первыми вырабатываются в ответ на острую инфекцию. К ним относятся изогемагглютинины, антибактериальные, гетерофильные антитела, ревматоидный фактор. Осуществляют антибактериальный иммунитет. Время полужизни — 5 сут. IgM является полимером и состоит в норме из 5 субъединиц, число антигенсвязывающих центров равно 10. Содержание IgM в сыворотке в норме представлено в табл. 7.3.
Таблица 7.3. Содержание IgM в сыворотке в норме [Тиц Н., 1997]
Возраст | Величина, г/л |
Дети: 1—3 мес | 0,12-0,87 |
4-6 » | 0,25-1,2 |
2—3 года | 0,46-1,90 |
4—5 лет | 0,40-2,00 |
6-7 » | 0,55-2,1 |
10-11 лет | 0,66-1,55 |
12-13 » | 0,70-1,50 |
Взрослые: мужчины | 0,50-3,20 |
женщины | 0,60-3,70 |
Поскольку IgM-антитела появляются на первом этапе иммунного ответа и находятся в основном в сосудистом русле, они играют важную защитную роль при бактериемии на ранних стадиях инфекции. Многовалентность этих антител делает их особенно активными в реакциях агглютинации и лизиса. Снижение их уровня свидетельствует о недостаточности гуморального иммунитета, нарушении синтеза или усилении катаболизма IgM, а также адсорбции его на иммунных комплексах при воспалительных процессах. Изменения концентрации IgM при различных заболеваниях представлены в табл. 7.4.
Таблица 7.4. Изменения концентрации IgM при различных заболеваниях
Увеличение концентрации | Снижение концентрации |
Острые бактериальные, грибковые, паразитарные и вирусные инфекции Острые вирусные гепатиты Аутоиммунные заболевания Цирроз печени Ревматоидный артрит Системная красная волчанка Эндотелиомы, остеосаркомы Миеломная болезнь Макроглобулинемия Вальденстрема Кандидоз, муковисцидоз Болезни дыхательных путей Моноклональная гаммапатия Острый и хронический лимфолейкоз | Физиологическая гипогаммаглобулинемия (у детей в возрасте 3—5 мес) Врожденная гипогаммаглобулинемия или агаммаглобулинемия Заболевания, приводящие к истощению иммунной системы: • новообразования иммунной системы; • состояние после удаления селезенки; • кишечные и почечные синдромы потери белка Лечение цитостатиками и иммунодепрессантами, облучение ионизирующей радиацией Хроническая вирусная инфекция Недостаточность гуморального иммунитета |
IgG в сыворотке
Иммуноглобулины G — основной компонент гамма-глобулиновой фракции сыворотки крови. Они составляют основную часть всех иммуноглобулинов (80 %) человека, являются важнейшими эффекторами гуморального иммунитета. Разнообразные антитела против бактерий, их токсинов, вирусов и других антигенов относятся к IgG. Они содержатся не только в сосудистом русле, но и легко проникают в экстраваскулярное пространство, где осуществляют защитную функцию благодаря токсиннейтрализующей, вируснейтрализующей, опсо-низирующей и бактерицидной активности. Антитела этого класса являются основным защитным фактором у ребенка первых недель жизни (проникают через плацентарный барьер в сыворотку плода). При грудном вскармливании антитела из молока через слизистую оболочку кишечника новорожденного проникают в его кровь. Время полужизни составляет 21—24 дня. Активируют комплемент по классическому пути. Содержание иммуноглобулина G в сыворотке в норме представлено в табл. 7.5.
Снижение его уровня свидетельствует о недостаточности гуморального иммунитета. Изменения концентрации IgG при различных заболеваниях отражены в табл. 7.6.
Таблица 7.5. Содержание IgG в сыворотке в норме [Тиц Н., 1997]
Возраст | Величина, г/л |
Дети: 1—3 мес | 2,7-7,8 |
4-6 » | 1,9-8,6 |
7-12» | 3,5-11,8 |
2—3 года | 5,2-13,6 |
4—5 лет | 5,4-14,2 |
6-7 » | 5,7-14,1 |
10-11 лет | 7,3-13,5 |
12-13 » | 7,7-15,1 |
Взрослые | 8,0-17,0 |
Таблица 7.6. Изменения концентрации | gG при различных заболеваниях |
Увеличение концентрации | Снижение концентрации |
Острые и хронические бактериальные, грибковые и | Физиологическая гипогаммаглобулинемия |
паразитарные инфекции | (у детей в возрасте 3—5 мес), врожденная |
Острые и хронические заболевания печени | гипогаммаглобулинемия или агаммаглобу- |
Цирроз печени, вирусный гепатит | линемия |
Аутоиммунные заболевания | Гемоглобинопатии |
Ревматоидный артрит | Заболевания, приводящие к истощению им- |
Коллагенозы, ревматизм | мунной системы: |
Системная красная волчанка | • новообразования иммунной системы; |
Саркоидоз, муковисцидоз | • удаление селезенки; |
Болезнь Вальденстрема | • кишечные и почечные синдромы потери |
Миеломная болезнь | белка |
Моноклональная гаммапатия | Лечение цитостатиками и иммунодепрессан- |
Инфекционный мононуклеоз | тами, облучение ионизирующей радиацией |
Хронический лимфолейкоз | Хроническая вирусная инфекция |
Реконвалесценция первичной бактериальной инфекции | |
Острый период повторной инфекции, СПИД |
Комплексное определение содержания иммуноглобулинов IgA, IgM, IgG играет важную роль в проведении дифференциальной диагностики между различными заболеваниями печени, почек, инфекционными заболеваниями, системными ревматическими заболеваниями (табл. 7.7-7.10).
Таблица 7.7. Изменения концентрации иммуноглобулинов при заболеваниях
Печени
Заболевания | IgG | IgA | IgM |
Острый инфекционный гепатит | + | н/+ | Н/++ |
Хронический персистируюший гепатит | Н/+ | н | н/+ |
Хронический агрессивный гепатит | ++ | + | Н/++ |
Постгепатитный криптогенный цирроз | ++ | + | f |
Первичный билиарный цирроз | н/+ | н | +/++ |
Алкогольный цирроз | н/+ | ++ | н/+ |
Таблица 7.8. Изменения концентрации иммуноглобулинов при заболеваниях
Почек
Заболевания | IgG | IgA | IgM |
Острый пиелонефрит Хронический пиелонефрит Нефротический синдром | Н +/++ | н н | +/++ +/++ н/- |
Таблица 7.9. Изменения концентрации иммуноглобулинов при инфекционных
Заболеваниях
Заболевания | IgG | IgA | IgM |
Острая инфекция Хроническая инфекция | Н +/++ | н Н/+ | +/++ Н/+ |
Таблица 7.10. Изменения концентрации иммуноглобулинов при системных