Вопрос №33. Характеристика возбудителя дифтерии

Морфология:

Прямая или слегка изогнутая тонкая грам + палочка, неподвижная, обладает полиморфизмом, концы заостренные или булавовидные. Спор и капсул нет. Утолщены на концах за счет наличия зерен волютина ( выявляют при окраске по Леффлеру и Нейссеру) В мазках располагаются под углом , напоминают букву V.

Культуральные св-ва:

Факультативный анаэроб. Температура 37. На простых пит. средах не растет. Используют дифференциально – диагностические среды, содержащих гемолизированную кровь и теллурит Na или K, которые подавляют рост сопутствующей микрофлоры. На этих средах обр. колонии черного или серого цвета. Элективные среды накопления – агар+ нормальная лошадиная сыворотка ( среда Ру) или свернутую кровяную сыворотку + сахарный бульон ( среда Ру – Леффлера). Образуются точечные, выпуклые желто-кремовые колонии с гладкой или слегка зернистой поверхностью.

Gravis обр. плоские, крупные, серо-черные колонии с волнообразными краями. На жидкой – пленка и крупнозернистый осадок.

Mitis обр. мелкие, гладкие, блестящие, черные, полупрозрачные колонии с ровными краями. На жидкой – помутнение + порошкообразный осадок.

Б/х св-ва:

· Ферментация глюкозы и мальтозы с обр. кислоты,

· не разлагает сахарозу,

· не продуцирует уреазу и не обр. индол,

· продуцирует цистиназу,которая расщепляет цистеин, в следствие чего наблюдается почернение столбика агара.

Антигенные св-ва:

· к-антигены

Вопрос №34. Характеристика возбудителей газовой анаэробной инфекции.

С. perfringens, С. novyi и С. Septicum.

С. peifringens — длинная грамположительная папочка .Имеет серовары А, В, С, D и F. В жидких питательных средах, приготовленных из гидролизатов мяса или казеина (pH 7,4). при 37—43 °С растет быстро (3—8 ч) с бурным газообразованием и изменением pH в кислую сторонуСуществует три устойчивых варианта колоний С. perfringens\ гладкий (S). слизистый (М) и шероховатый (R). Колонии, выросшие на поверхности кровяного агара, часто окружены одной или двумя зонами гемолиза и при выдерживании на воздухе приобретают зеленоватую окра ску. Многие штаммы вырабатывают ферменты, расплавляющие желатин. Все штаммы сбраживают с образованием кислоты и газа глюкозу, галактозу, мальтозу, лактозу, левулезу, сахарозу и не ферментируют маннит и дульцит. Некоторые штаммы разлагают глицерин и инулин.

С. septicum — полиморфная грамлоложительная палочка с суб- терминальными спорами. Строгий анаэроб. На поверхности плотных питательных сред только через 48 ч образует блестящие полупрозрачные колонии диаметром до 4 мм с неровными бахромчатыми краями, имеет тенденцию к ползучему росту. Чаще образует R-форму колоний. В глубине 1% агара образует колонии диаметром 1—2 мм с уплотненным центром и радиально отходящими перепутанными нитями. В 2% агаре колонии имеют вид чечевиц, сердца и т.п., иногда с протуберанцами. На кровяном агаре узкая зона гемолиза появляется вокруг колонии только на 2-е сутки. Ферментирует с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, лактозу, галактозу, фруктозу, салицин и не разлагает глицерин и маннит, разжижает желатин и свертывает лакмусовое молоко с образованием кислоты и газа. Очень редко разлагает сахарозу. Не образует индол, не восстанавливает нитраты в нитриты и не вырабатывает большого количества сероводорода.

Вопрос №35. Бактериологический метод исследования при дифтерии.

Исследуемый материал: дифтеритические пленку или отделяемое пораженной слизистой оболочки зева, носа, смывы с различных предметов, продукты питания ( молоко, мороженное)

1 день: Питательные среды:кровяно-теллуритовый агар,сывороточно-теллуритовая среда, Среда Бучина.

Материал втирают на поверхность среды тампотом. Термостат, Т= 37, 24 ч.

2 день: На средах с теллуритом: Gravis обр. плоские, крупные, серо-черные колонии с волнообразными краями.

Mitis обр. мелкие, гладкие, блестящие, черные, полупрозрачные колонии с ровными краями.

Среда Бучина: колонии синего цвета.

Окраска по Граму, Нейссеру.

ВЧК. Пересев на сывороточную среду в чашку с фосфатно-пептонным агаром. Термостат.

3 день: Учет результатов. ВЧК сеют на пестрый ряд, среду с цистеином.

4 день:Учет результатов.

Вопрос №36. Бактериологический метод исследования при газовой анаэробной инфекции.

Исследуемый материал: кусочки пораженных и некротизированных тканей. экссудат, гной, кровь, отделяемое ран.

1 день: исследуемый материал гомогенируют, посев на среду Китта- Тароцци ( или на др. среды с анаэробными условиями). В термостат.

2 день: учет результатов. Микроскопия. Мазок. Пересев на питательные среды.( возможно применение трубки Вейон - Виньяля. )Т=37, 24ч. Для ВЧК.

3 день: учет результатов. Микроскопия. Мазок.

На кровяных средах образуют зоны гемолиза. Колонии имеют тенденцию к сливному росту.

Пересев на среду Китта- Тароцци.

4 день: Учет результатов. Проверяют подвижность, устойчивость к кислороду, на отсутствие каталазной и оксидазной активности, способность ферментировать углеводы и разжижать желатин. Проводят реакцию нейтрализации.