III.Изготовление микропрепаратов
Оптические свойстваклеток и тканей, которые препятствуют их прямому микроскопическому исследованию. Амплитудные и фазовые объекты.
Способы отбора проб в цитологии и гистологии. Физические и химические методы фиксации материала. Типы химических фиксаторов и механизмы их действия.
Методы изготовления цитологических и гистологических препаратов из фиксированного материала. Мазки, давленые препараты и срезы. Обезвоживание и заключение материала в консервирующие среды. Изготовление срезов.
Визуализация микроструктур с помощью красителей. Классификация красителей и механизмы их действия. Базофильные и оксифильные компоненты клеток и тканей. Импрегнация солями серебра.
Витальные красители. Цейтраферная съемка.
IV. Специальные методы световой микроскопии.
Методы повышения разрешающей способности. Ультрафиолетовая микроскопия. Рентгеновская микроскопия. Электронная микроскопия.
Методы повышения контраста. Метод темного поля и его применение в биологии. Поляризационная микроскопия. Фазово-контрастная микроскопия. Дифференциальный интерференционный контраст.
V. Флуоресцентная микроскопия.
Физическая природа люминесценции, диаграмма Яблонского. Эпифлуоресцентная схема Брумберга и Крыловой. Фотофизические свойства и классификация флуорохромов.
Естественная флуоресценция микроструктур. Флуорохромы на ДНК, РНК, митохондрии и мембраны. Иммуноцитохимический метод. Флуоресцирующие белки. Квантовые точки.
Особенности приготовления препаратов для флуоресцентной микроскопии и их микрофотографии. Проблема выгорания флуорохромов.
Конфокальная микроскопия. Принцип конфокальности при получении оптических срезов. Схема сканирующего конфокального микроскопа. Примеры использования конфокальной микроскопии при решении задач цитологии и гистологии.
VI. Световая микроскопия высокого разрешения
Микроскопия дальнего поля. Понятие о функции рассеяния точки (PSF) и функции передачи контраста (OTF). Измерение разрешения цифровой микрофотографии. Предел Аббе и способы его преодоления. Сравнительный анализ методов управления PSF.
Микроскопия ближнего поля. Примеры использования микроскопии высокого разрешения в биологических исследованиях.
VII. Микрофотография и цитометрия
Устройство компьютерного микроскопа. Способы механического и оптического согласования фотоаппарата или телекамеры с микроскопом.
Принцип соответствия разрешающей способности объектива и параметров матрицы фотоаппарата. Основные характеристики и кодирование изображений в компьютере. Управление гистограммой яркости и другими характеристиками цифрового снимка.
Калибровка микроскопа. Измерение размеров, формы, ориентации, оптической плотности и других параметров микрообъектов на микрофотографиях. Макрофотогафия. Статистическая обработка данных.
УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКАЯ КАРТА УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ ДЛЯ ОЧНОЙ ФОРМЫ ПОЛУЧЕНИЯ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ
| Номер раздела, темы | Название раздела, темы | Количество аудиторных часов | Количество часов УСР | Форма контроля знаний | ||||
| Лекции | Практические занятия | Семинарские занятия | Лабораторные занятия | Иное | ||||
| I | Введение | |||||||
| 1.1 | Классификация и общая характеристика методов микроскопии | Проверка конспектов | ||||||
| II | Основы микроскопии | |||||||
| 2.1 | Принцип действия и устройство светового микроскопа | Проверка конспектов | ||||||
| 2.2 | Дифракционная теория микроскопа | Проверка конспектов | ||||||
| 2.3 | Разрешение и увеличение микроскопа. Настройка освещения микроскопа по Кёлеру | Оценка результата | ||||||
| III | Изготовление препаратов | |||||||
| 3.1 | Изготовление временных препаратов | Оценка результата | ||||||
| 3.2 | Исследование временных препаратов | Зарисовка в альбоме | ||||||
| 3.3 | Изготовление постоянных препаратов | Оценка результата | ||||||
| 3.4 | Исследование постоянных препаратов | Зарисовка в альбоме | ||||||
| IV | Специальные методы микроскопии | |||||||
| 4.1 | Методы повышения разрешающей способности | Тесты | ||||||
| 4.2 | Методы повышения контраста | Тесты | ||||||
| V | Флуоресцентная микроскопия | |||||||
| 5.1 | Квантовый механизм люминесценции. Эпифлуоресцентный микроскоп. Флуорохромы | Проверка конспекта. Выборочный опрос | ||||||
| 5.2 | Иммуноцитохимический метод исследования | Тесты | ||||||
| 5.3. | Конфокальная микроскопия | Проверка конспектов | ||||||
| VI | Световая микроскопия высокого разрешения | |||||||
| 6.1 | Предел Аббе и методы управления PSF | Выборочный опрос | ||||||
| 6.2 | Микроскопия дальнего и ближнего поля | Проверка конспектов | ||||||
| VII | Микрофотография и цитометрия | |||||||
| 7.1 | Устройство компьютерного микроскопа | Выборочный опрос | ||||||
| 7.2 | Типовые задачи цитометрии | Оценка результата |