Структурная организация нуклеиновых кислот
Первичная структура – определенная последовательность нуклео-тидов в цепи. Образована фосфодиэфирными связями. Начало цепи – 5'-конец (на его конце фосфатный остаток), конец, завершение цепи, обозначается как 3'(ОН)-конец.
Как правило, в образовании самой цепи азотистые основания не участвуют, но водородные связи между комплементарными азотистыми основаниями играют важную роль в формировании вторичной структуры НК:
· между аденином и урацилом в РНК или аденином и тимином в ДНК образуются 2 водородные связи,
· между гуанином и цитозином – 3.
Для НК характерна линейная, а не разветвленная структура. Кроме первичной и вторичной структуры для большинства НК характерна третичная структура – например, ДНК, тРНК и рРНК.
РНК (рибонуклеиновые кислоты). РНК содержится в цитоплазме (90%) и ядре. По структуре и функции РНК делятся на 4 вида:
1) тРНК (транспортные),
2) рРНК (рибосомные),
3) мРНК (матричные),
4) яРНК (ядерные).
Матричные РНК. На их долю приходится не более 5% всей РНК клетки. Синтезируется в ядре. Этот процесс называется транскрипцией. Представляет собой копию гена одной из цепей ДНК. Во время биосинтеза белка (этот процесс называется трансляцией) проникает в цитоплазму и связывается с рибосомой, где и происходит биосинтез белка. В мРНК содержится информация о первичной структуре белка (последовательности аминокислот в цепочке), т.е. последовательность нуклеотидов в мРНК полностью соответствует последовательности аминокислотных остатков в белке. 3 нуклеотида, кодирующие 1 аминокислоту, называются кодоном.
Свойства генетического кода. Совокупность кодонов составляет генетический код. Всего в коде 64 кодона, 61 – смысловые (им соответствует определенная амино-кислота), 3 – нонсенс-кодоны. Им не соответствует какая-либо аминокислота. Эти кодоны называются терминирующими, так как подают сигнал о завершении синтеза белка.
6 свойств генетического кода:
1) триплетность (каждая аминокислота в белке кодируется последовательностью из 3 нуклеотидов),
2) универсальность (един для всех типов клеток – бактериаль-ных, животных и растительных),
3) однозначность (1 кодону соответствует только 1 аминокис-лота),
4) вырожденность (1 аминокислота может кодироваться несколькими кодонами; только 2 аминокислоты – метионин и триптофан имеют по 1 кодону, остальные – по 2 и более),
5) непрерывность (генетическая информация считывается по 3 кодона в направлении 5'®3' без перерывов),
6) колинеарность (соответствие последовательности нуклео-тидов в мРНК последовательности аминокислотных остатков в белке).
Первичная структура мРНК
Полинуклеотидная цепь, в которой выделяют 3 главные области:
1) претранслируемая,
2) транслируемая,
3) посттранслируемая.
Претранслируемая область содержит 2 участка:
а) КЭП-участок – выполняет защитную функцию (обеспе-чивает сохранение генетической информации);
б) АГ-область – место прикрепления к рибосоме во время биосинтеза белка.
Транслируемая область содержит генетическую информацию о структуре одного или нескольких белков.
Посттранслируемая область представлена последовательностью нуклеотидов, содержащих аденин (от 50 до 250 нуклеотидов), поэтому называется поли-А-областью. Эта часть мРНК выполняет 2 функции:
а) защитную,
б) служит «проездным билетом» во время биосинтеза белка, так как после однократного использования от мРНК отщепляется несколько нуклеотидов из поли-А-области. Ее длина определяет кратность использования мРНК в биосинтезе белка. Если мРНК используется только 1 раз, то она не имеет поли-А-области., а ее 3'-конец завершается 1 или несколькими шпильками. Эти шпильки называются фрагментами нестабильности.
Матричная РНК, как правило, не имеет вторичной и третичной структуры (по крайней мере, об этом ничего не известно).
Транспортные РНК. Составляют 12-15% от всей РНК в клетке. Количество нуклеотидов в цепи – 75-90.
Первичная структура – полинуклеотидная цепь.
Вторичная структура – для ее обозначения используют модель Р. Холли, которая называется «листом клевера», имеет 4 петли и 4 плеча:
Акцепторный участок – место прикрепления аминокислоты, имеет у всех тРНК одну последовательность ЦЦА
Обозначения:
I – акцепторное плечо, 7 пар нуклеотидов,
II – дигидроуридиловое плечо (3-4 пары нуклеотидов) и дигидроуридиловая петля (D-петля),
III – псевдоуридиловое плечо (5 пар нуклеотидов) и псевдоуридиловая петля (Tψ-петля),
IV– антикодоновое плечо (5 пар нуклеотидов),
V – антикодоновая петля,
VI – дополнительная петля.
Функции петель:
· антикодоновая петля – распознает кодон мРНК,
· D-петля – для взаимодействия с ферментом во время биосинтеза белка,
· TY-петля – для временного прикрепления к рибосоме во время биосинтеза белка,
· дополнительная петля – для уравновешивания вторичной структуры тРНК.
Третичная структура – у прокариотов в виде веретена (D-плечо и TY-плечо сворачиваются вокруг и образуют веретено), у эукариотов в виде перевернутой буквы L.
Биологическая роль тРНК:
1) транспортная (доставляет аминокислоту к месту синтеза белка, к рибосоме),
2) адапторная (распознает кодон мРНК), переводит шифр нуклеотидной последовательности в мРНК в последователь-ность аминокислот в белке.
Рибосомные РНК, рибосомы. На их долю приходится до 80% от всей РНК клетки. Образуют «скелет», или остов рибосом. Рибосомы – нуклеопротеиновые комплексы, состоящие из большого количества рРНК и белков. Это «фабрики» по биосинтезу белка в клетке.
Первичная структура рРНК– полинуклеотидная цепь.
По молекулярной массе и количеству нуклеотидов в цепи различают 3 вида рРНК:
· высокомолекулярную (около 3000 нуклеотидов);
· среднемолекулярную (до 500 нуклеотидов);
· низкомолекулярную (менее 100 нуклеотидов).
Для характеристики различных рРНК и рибосом принято использовать не молекулярную массу и количество нуклеотидов, а коэффициент седиментации (это скорость оседания в ультрацентрифуге). Коэффициент седиментации выражается в сведбергах (S),
1 S = 10-13секунд.
Например, одна из высокомолекулярных будет иметь коэффициент седиментации 23 S, средне- и низкомолекулярные соответственно 16 и 5 S.
Вторичная структура рРНК – частичная спирализация за счет водо-родных связей между комплементарными азотистыми основаниями, образование шпилек и петель.
Третичная структура рРНК – более компактная упаковка и наложе-ние шпилек в виде V- или U-образной формы.
Рибосомы состоят из 2 субъединиц – малой и большой.
У прокариотов малая субъединица будет иметь коэффициент седиментации 30 S, большая – 50 S, а вся рибосома – 70 S; у эукарио-тов соответственно 40, 60 и 80 S.
Состав, строение и биологическая роль ДНК. У вирусов, а также в митохондриях 1-цепочечная ДНК, в остальных клетках – 2-цепочечная, у прокариотов – 2-цепочечная кольцевая.
Состав ДНК – соблюдается строгое соотношение азотистых оснований в 2 цепях ДНК, которые определяются Правилами Чаргафа.
Правила Чаргафа:
1. Количество комплементарных азотистых оснований равно (А=Т, Г=Ц).
2. Молярная доля пуринов равна молярной доле пиримидинов (А+Г=Т+Ц).
3. Число 6-кетооснований равно числу 6-аминооснований.
4. Соотношение Г+Ц/ А+Т – коэффициент видовой специфичности. Для животных и растительных клеток < 1, у микроорганизмов колеблется от 0,45 до 2,57.
У микроорганизмов преобладает ГЦ-тип, АТ-тип характерен для позвоночных, беспозвоночных и растительных клеток.
Первичная структура – 2 полинуклеотидные, антипараллельные цепочки (см. первичную структуру НК).
Вторичная структура – представлена 2-цепочечной спиралью, внутри которой комплементарные азотистые основания уложены в виде «стопок монет». Вторичная структура удерживается за счет связей 2 типов:
· водородных – они действуют по горизонтали, между комплементарными азотистыми основаниями (между А и Т 2 связи, между Г и Ц – 3),
· силы гидрофобного взаимодействия – эти связи возникают между заместителями азотистых оснований и действуют по вертикали.
Вторичная структура характеризуется:
· количеством нуклеотидов в спирали,
· диаметром спирали, шагом спирали,
· расстоянием между плоскостями, образуемыми парой комплементарных оснований.
Известно 6 конформаций вторичной структуры, которые обозначаются заглавными буквами латинского алфавита: A, B, C, D, E и Z. А, В и Z конформации типичны для клеток, остальные – для бесклеточных систем (например, в пробирке). Эти конформации отличаются основными параметрами, возможен взаимный переход. Состояние конформации во многом зависит от:
· физиологического состояния клетки,
· рН среды,
· ионной силы раствора,
· действия различных регуляторных белков и др.
Например, В- конфомацию ДНК принимает во время деления клетки и удвоения ДНК, А-конформацию – во время транскрипции. Z-структура является левозакрученной, остальные – правозакрученные. Z-струк-тура может встречаться и в клетке на участках ДНК, где повторяются динуклеотидные последовательности Г-Ц.
Впервые вторичная структура математически была рассчитана и смоделирована Уотсоном и Криком (1953 г.), за что они получили Нобелевскую премию. Как оказалось впоследствии, представленная ими модель соответствует В-конформации.
Основные ее параметры:
· 10 нуклеотидов в витке,
· диаметр спирали 2 нм,
· шаг спирали 3,4 нм,
· расстояние между плоскостями оснований 0,34 нм,
· правозакрученная.
При формировании вторичной структуры формируется 2 вида бороздок – большая и малая (соответственно шириной 2,2 и 1,2 нм). Большие бороздки играют важную роль в функционировании ДНК, так как к ним присоединяются регуляторные белки, имеющие в качестве домена «цинковые пальцы».
Третичная структура – у прокариотов суперспираль, у эукариотов, и человека в том числе, имеет несколько уровней укладки:
· нуклеосомный,
· фибриллярный (или соленоидный),
· хроматиновое волокно,
· петельный (или доменный),
· супердоменный (именно этот уровень можно видеть в электронном микроскопе в виде поперечной исчерченности).
Нуклеосомный. Нуклеосома (открыта в 1974 г.) представляет собой частицу дисководной формы, диаметр 11 нм, которая состоит из гистонового октамера, вокруг которого двухцепочечная ДНК делает 2 неполных витка (1,75 витка).
Гистоны – низкомолекулярные белки, содержат по 105-135 амино-кислотных остатков, в гистоне Н1 – 220 аминокислотных остатков, до 30% приходится на долю лиз и арг.
Гистоновый октамер называют кором. Он состоит из центрального тетрамера Н32-Н42 и двух димеров Н2А-Н2В. Эти 2 димера стабилизируют структуру и прочно связывают 2 полувитка ДНК. Расстояние между нуклеосомами называется линкером, в котором может содержаться до 80 нукклеотидов. Гистон Н1 препятствует раскручиванию ДНК вокруг кора и обеспечивает уменьшение расстояния между нуклеосомами, т. е. участвует в формировании фибриллллы (2-го уровня укладки третичной структуры).
При скручивании фибриллы формируется хроматиновое волокно (3-й уровень), при этом в одном витке обычно содержится 6-г нуклеосом, диаметр такой структуры увеличивается до 30 нм.
В интерфазных хромосомах хроматиновые волокна организованы в домены, или петли, состоящие из 35-150 тыс пар оснований и заякоренные на внутриядерном матриксе. В формировании петель принимают участие ДНК-связывающие белки.
Супердоменный уровень образуют до 100 петель, в этих участках хромосомы в электронном микроскопе хорошо заметны конденсированные плотно упакованные участки ДНК.
Благодаря такой укладке ДНК компактно уложена. Ее длина сокращается в 10 000 раз. В результате упаковки ДНК связывается с гистонами и другими белками, образуя нуклеопротеиновый комплекс в виде хроматина.
Биологическая роль ДНК:
· хранение и передача генетической информации,
· контроль деления и функционирования клетки,
· генетический контроль запрограммированной гибели клетки.
В состав хроматина входят ДНК (30% от всей массы хроматина), РНК (10%) и белки (гистоновые и негистоновые).
3. Примерные варианты контрольной работы по теме
«Строение и биологическая роль нуклеотидов
И нуклеиновых кислот»
Вариант 1
1. Напишите формулу мажорного пиримидинового основания, которое входит в состав ДНК и не входит в РНК.
2. Напишите формулу гуанозина.
3. Напишите формулу цАМФ, участвующей в активировании ферментов и проведении гормонального сигнала.
4. Свойства генетического кода.
5. Аминокислота изолейцин кодируется кодоном ЦУА. Напишите последовательность нуклеотидов в антикодоновой петле её тРНК.
Вариант 2
1. Напишите формулу мажорного пиримидинового основания, которое входит в состав РНК и не входит в ДНК.
2. Напишите формулу тимидина.
3. Напишите формулу нуклеотида, используемого в клетке для активирования аминокислот.
4. Правила Чаргафа.
5. Аминокислота изолейцин кодируется кодоном АУЦ. Напишите последовательность нуклеотидов в антикодоновой петле её тРНК.
Вариант 3
1. Напишите формулу минорного пиримидинового азотистого основа-ния, которое входит в состав псевдоуридиловой петли тРНК.
2. Напишите формулу аденозина.
3. Напишите формулу нуклеотида, используемого в клетке для активирования глюкозы и других углеводов.
4. Биологическая роль нуклеотидов.
5. Аминокислота метионин кодируется кодоном АУГ. Напишите последовательность нуклеотидов в антикодоновой петле её тРНК.
Вариант 4
1. Напишите формулу минорного пуринового основания, которое входит в состав КЭП-участка мРНК.
2. Напишите формулу уридина.
3. Напишите формулу нуклеотида, используемого в клетке для активирования глицеролсодержащих соединений и других липидов.
4. Строение и биологическая роль ДНК.
5. Аминокислота валин кодируется кодоном ГУЦ. Напишите последовательность нуклеотидов в антикодоновой петле её тРНК.
Вариант 5
1. Какое пиримидиновое азотистое основание входит в состав любой нуклеиновой кислоты (ДНК и РНК)?
2. Напишите формулу дезоксирибозилтимидина.
3. Напишите формулу нуклеотида, используемого в клетке для активирования холина и других азотсодержащих соединений.
4. Строение и биологическая роль мРНК.
5. Аминокислота аланин кодируется кодоном ГЦА. Напишите после-довательность нуклеотидов в антикодоновой петле её тРНК.
Вариант 6
1. Приведите примеры мажорных пуриновых оснований. Напишите их формулы.
2. Напишите формулу цитидина.
3. Напишите формулу нуклеотида, являющегося самой распростра-нённой формой запасания энергии в клетке.
4. Строение и биологическая роль рРНК и рибосом.
5. Аминокислота аспартат кодируется кодоном ГАУ. Напишите последовательность нуклеотидов в антикодоновой петле её тРНК.
Вариант 7
1. Приведите примеры мажорных пиримидиновых оснований. Напи-шите их формулы.
2. Напишите формулу дезоксирибозиладенозина.
3. Напишите формулу нуклеотида, участвующего в гормональной регуляции транспорта ионов через мембрану (цГМФ).
4. Строение и биологическая роль тРНК.
5. Аминокислота серин кодируется кодоном АГЦ. Напишите после-довательность нуклеотидов в антикодоновой петле её тРНК.
ТЕМА 5. ГОРМОНЫ
(Перечень тем рефератов)
Вариант 1
1. Что называется гормонами, гормоноподобными соединениями? Приведите примеры. Свойства гормонов.
2. Гормоны гипофиза. Метаболизм, механизм действия.
Вариант 2
1. Классификация гормонов.
2. Гипоталамус, его роль в регуляции обмена веществ и физиологических функций.
Вариант 3
1. Механизм действия гормонов.
2. Строение, синтез и биологическая роль вазопрессина и окситоцина.
Вариант 4
1. Что называется гормонами, гормоноподобными соединениями? Приведите примеры. Свойства гормонов.
2. Паратгормоны: строение, биологическая роль, нарушения.
Вариант 5
1. Классификация гормонов.
2. Гормоны щитовидной железы: строение, биосинтез, механизм действия, нарушение функции.
Вариант 6
1. Механизм действия гормонов.
2. Инсулин: биосинтез, строение, механизм действия, нарушения.
Вариант 7
1. Что называется гормонами, гормоноподобными соединениями? Приведите примеры. Свойства гормонов.
2. Контринсулярные гормоны: строение, биосинтез, механизм действия и биологическая роль.
Вариант 8
1. Классификация гормонов.
2. Гормоны мозгового слоя надпочечников: химическое строение, биосинтез, механизм действия и биологическая роль.
Вариант 9
1. Механизм действия гормонов.
2. Химическое строение, биосинтез и биологическая роль кортикостероидов. Нарушения.
Вариант 10
1. Классификация гормонов.
2. Половые гормоны: строение, метаболизм, механизм действия.
Вариант 11
1. Что называется гормонами, гормоноподобными соединениями? Приведите примеры. Свойства гормонов.
2. Эйкозаноиды (простагландины, лейкотриены и тромбоксаны).
Вариант 12
1. Механизм действия гормонов.
2. Регуляция водно-солевого обмена.
Вариант 13
1. Классификация гормонов.
2. Регуляция фосфорно-кальциевого обмена.
Вариант 14
1. Что называется гормонами, гормоноподобными соединениями? Приведите примеры. Свойства гормонов.
2. Регуляция основных энергоносителей в абсортивный и постабсортивный период.
Вариант 15
1. Механизм действия гормонов.
2. Регуляция углеводного обмена. Нарушения и причины их возникновения.
ОСНОВНЫЕ ВОПРОСЫ К ЭКЗАМЕНАЦИОННЫМ БИЛЕТАМ