Определение микробиологических показателей безопасности. (Санитарно-бактериологический анализ проб воды, воздуха, почвы, оборудования, смывов с рук)
Цель работы:ознакомиться с микробиологическими показателями безопасности.
Объекты исследования: табличные данные почвы, воды, воздуха, оборудования, смывов с рук.
Оборудование: калькулятор,раздаточный материал, фотографии, проектор, чашка Петри.
Техника безопасности: во время работы уделять особое внимание работе с электронной аппаратурой.
Методика выполнения работы
Во всех исследованиях используется дистиллированная вода.
1. Исследование почвы
1.1. Схема
1г 99 мл H20 (5 мин. взбалтываем)
1 мл 99 мл H20
2 мл ч. Петри + РПА (45ºС) (Питательная среда на агаре)
Более горячий агар использовать не следует, так как он вызовет гибель, части микроорганизмов, что исказит конечные результаты анализа. Агар с меньшей температурой также непригоден, так как быстро застывает.
РПА - рибопентозный агар
1.2. Разведение
1:10000
1.3. Формула
а·10000
а - число колоний на ч. Петри,
а·10000- число клеток в 1 грамме почвы.
1.4. Подпись чашки Петри
· ПОСЕВ ИЗ ПОЧВЫ
· 1:10000
· ЧИСЛО / МЕСЯЦ ФАМИЛИЯ
Вода (водопроводная)
При анализе воды, отбираемой из крана, надо учитывать возможность накопления микрофлоры в трубах вблизи крана. Чтобы получить правильные результаты, следует слить воду в течение 5-10 мин.
2.1. Схема
1 мл ч. Петри + РПА
2.2. Разведение
1:1
2.3. Формула
а·1=а
а - число колоний на ч. Петри,
а·1- число клеток в 1мл водопроводной воды.
2.4. Подпись чашки Петри
· ПОСЕВ ИЗ ВОДОПРОВОДНОЙ ВОДЫ
· 1:1
· ЧИСЛО / МЕСЯЦ ФАМИЛИЯ
3. Вода (стоячая) (Из водоема).
3.1. Схема
1мл 9 мл H20
1 мл 9 мл H20
1 мл ч. Петри + РПА
3.2. Разведение
1:100
2.3. Формула
а·100
а- число колоний на ч. Петри,
а·100- число клеток в 1 мл стоячей воды.
3.4. Подпись чашки Петри
· ПОСЕВ ИЗ СТОЯЧЕЙ ВОДЫ
· 1:100
· ЧИСЛО / МЕСЯЦ ФАМИЛИЯ
4. Посев из воздуха (седиментационный метод)
· а - ПR²
x - 100 см² (1 дм², 10л)
а- число колоний на ч. Петри
x- число клеток в 10 л воздуха
· x - 10 л
y - 1000 л (1м³)
x- число клеток в 10 л воздуха
y- число клеток в 1 м ³ воздуха
4.1. Подпись чашки Петри
· ПОСЕВ ИЗ ВОЗДУХА
· ЧИСЛО / МЕСЯЦ ФАМИЛИЯ
Для объективной оценки количества микроорганизмов в воздухе используют прибор, способный исследовать определенный объем воздуха. Если исследуемое помещение больших размеров, то данный прибор с большей скоростью пропустит через себя воздух.
Внешний вид устройства
Таймер, внутренний вид
Расположение чашки Петри на аппарате
5. Смыв с рук и оборудования
Данный метод осуществляется посредством смывов с оборудования или рук стеклянной палочкой с ватными тампонами, смоченными в физиологическом растворе. Затем происходит высеивание на питательную среду. Разведение подбирается индивидуально, в зависимости от предполагаемой обсемененности.
Исследование рук
6. Таблица 1. Количество микроорганизмов на чашке Петри
См. Приложение
7. Таблица 2. Определите количество колоний при посеве из воздуха
См. Приложение
8. Оформление результатов
· Запишите основные этапы исследования почвы, воды, воздуха, смывов с рук и оборудования.
· Рассчитайте общее число микроорганизмов, используя таблицы 1,2. сделайте выводы о состоянии безопасности на различных предприятиях.
9. Домашнее задание
Подготовиться к защите лабораторной работы №6
Вопросы для контроля
1. Исследование почвы;
2. Исследование воды;
3. Исследование воздуха;
4. Исследование смывов с рук и оборудования.