Бактериоскопический метод диагностики.
Бактериоскопический метод диагностики.
Бактериоскопический метод - метод диагностики инфекционных заболеваний, основанный на выявлении в исследуемом материале возбудителя и его идентификации по морфологическим и тинкториальным св-вам.
Условия применения метода:
◦ Наличие у возбудителя характерных морфологических и тинкториальных свойств;
◦ Характерная локализация в организме;
◦ Выделение возбудителя во внешнюю среду в больших кол-вах.
Достоинства метода:
◦ Быстрое получение результата;
◦ Низкая стоимость исследования;
◦ Возможно проведение исследования вне лаборатории (диагностика в кабинете врача).
Недостатки метода:
◦ Малая информативность;
· Морфологических и тинкториальных св-в недостаточно для идентификации подавляющего большинства возбудителей.
· Нет возможности определить чувствительность возбудителя к антимикробным препаратам.
· Нет возможности выявить источник инфекции, пути и факторы передачи возбудителя.
◦ Низкая чувствительность, низкая достоверность отрицательного результата;
· Возбудителя в исследуемом материале должно быть много. Если возбудитель не обнаружен - это не значит, что его нет.
◦ Субъективность.
· Результат зависит от уровня подготовки врача-микроскописта.
Заболевания: туберкулез, менингит, гонорея, сифилис, возвратный тиф.
Жгутики. Строение, функции, методы их выявления.
Жгутик состоит из трех основных частей:
◦ Ось с дисками в клеточной стенке и цитоплазматической мембране;
◦ Крюк;
◦ Длинный гибкий жгутик, состоящий из белка-флагеллина.
Вращение жгутика напоминает работу электромотора, в котором вместо электронов перемещаются протоны. Диски, расположенные в мембране играют роль подшипников, статора и ротора.
Протоны, поступающие к ротору за счет градиента протонов, заряжают ротор, вызывая его поворот на некоторый угол, и "проваливаются" внутрь клетки. Постоянная работа протонного двигателя приводит к быстрому вращению жгутика. Описывая конус, жгутик работает наподобие толкающего или тянущего винта.
Функция жгутиков - движение бактериальной клетки. В редких случаях жгутик может служить органом адгезии
Методы выявления: окраска по Морозову, электронная микроскопия.
Иммерсионный микроскоп. Принцип работы. Сфера применения.
Иммерсионный объектив (от лат. immersio — погружение) - между фронтальной линзой объектива и объектом находится иммерсионная среда:
◦ вода (n=1,33) - водная иммерсия;
◦ глицерин (n=1,43) - глицериновая иммерсия;
◦ иммерсионное масло (n=1,51) - масляная иммерсия.
Для исключения преломления света => уменьшается величина преломляющей способности
Сфера применения: изучение окрашенных микропрепаратов - (бактериологический метод диагностики)
Достоинства:
◦ Высокое разрешение;
◦ Простота настройки и использования.
Недостатки:
Необходимость фиксации и окраски препаратов.
Принцип действия:
Полезное увеличение x90. Имм. масло ↑апертуру объектива и разрешающую способность. Имеет коэффициент преломления как у предметного стекла 1.5, при этом Z = 0.2 мкм = 200 нм
Капсула, Строение, функции, методы выявления.
Капсула - слизистый слой, состоящий из кислых мукополисахаридов. Содержит большое количество связанной (гидратной) воды. Хорошо пропускает, но не задерживает водорастворимые вещества, в том числе красители.
Функции – адгезия, защита от фагоцитоза, вирулентность.
Иммунологические реакции и Окраска по Бурри-Гинсу:
Схема метода:
◦ Негативное контрастирование капсулы (по Бурри) - чёрная тушь (смешивается с исследуемой культурой и высушивается).
◦ Фиксация в пламени спиртовки.
◦ Окраска тел микробных клеток (по Гинсу) - водный фуксин 1 мин.
◦ Промывка – вода.
Принцип метода:
Капсула не воспринимает красители, поэтому её выявляют, создавая в препарате черный тушевый фон (метод Бурри). Дополнительная окраска тел а микробной клетки позволяет визуализировать капсулу (метод Бури-Гинса).
Основные группы микроорганизмов. Значение в патологии человека. Примеры.
1.Прокариота - организмы, не обладающие оформленным ядром и внутриклеточными мембранными структурами.
1.1. Собственно бактерии – наиболее обширная группа паразитических и свободно живущих прокариота, обладающих жесткой клеточной стенкой (брюшной тиф; сибирская язва; газовая гангрена).
1.2. Актиномицеты – бактерии способные к образованию длинных септированных или несептированных нитей (нитчатые бактерии) (актиномикоз).
Значение в патологии человека - многие актиномицеты используются в качестве штаммов-продуцентов при производстве антибиотиков и ферментных препаратов).
1.3. Микоплазмы – бактерии, не имеющие клеточной стенки (атипичная пневмония; урогенитальный микоплазмоз).
1.4. Риккетсии – бактерии, облигатные внутриклеточные паразиты (эпидемический сыпной тиф; клещевой риккетсиоз; пятнистая лихорадка скалистых гор; лихорадка цуцугамуши).
1.5. Хламидии – бактерии, облигатные внутриклеточные паразиты. Отличаются от риккетсий сложным циклом внутриклеточного размножения (трахома; хламидийная пневмония).
1.6. Спирохеты – спирально извитые микроорганизмы. Отличаются наличием внутриклеточных фибриллярных структур (сифилис ;лептоспироз; боррелиоз Лайма).
2. Эукариота – организмы, обладающие оформленным ядром и внутриклеточными мембранными структурами.
2.1. Простейшие – одноклеточные эукариотические животные.
2.2. Низшие грибы – гетеротрофные одноклеточные и многоклеточные микроорганизмы.
3. Вирусы – неклеточная форма жизни.
Бактериоскопический метод диагностики.
Бактериоскопический метод - метод диагностики инфекционных заболеваний, основанный на выявлении в исследуемом материале возбудителя и его идентификации по морфологическим и тинкториальным св-вам.
Условия применения метода:
◦ Наличие у возбудителя характерных морфологических и тинкториальных свойств;
◦ Характерная локализация в организме;
◦ Выделение возбудителя во внешнюю среду в больших кол-вах.
Достоинства метода:
◦ Быстрое получение результата;
◦ Низкая стоимость исследования;
◦ Возможно проведение исследования вне лаборатории (диагностика в кабинете врача).
Недостатки метода:
◦ Малая информативность;
· Морфологических и тинкториальных св-в недостаточно для идентификации подавляющего большинства возбудителей.
· Нет возможности определить чувствительность возбудителя к антимикробным препаратам.
· Нет возможности выявить источник инфекции, пути и факторы передачи возбудителя.
◦ Низкая чувствительность, низкая достоверность отрицательного результата;
· Возбудителя в исследуемом материале должно быть много. Если возбудитель не обнаружен - это не значит, что его нет.
◦ Субъективность.
· Результат зависит от уровня подготовки врача-микроскописта.
Заболевания: туберкулез, менингит, гонорея, сифилис, возвратный тиф.