II. Промикроскопируйте препарат из культуры, выделенной при подозрении на столбняк, окрашенный по Граму. Сделайте вывод.

С. tetani – крупные (0,3-0,8х4-8 мкм) грамположительные палочки, подвижны, капсул не образуют. Характерно образование терминальной споры шаровидной формы, что придает возбудителю столбняка вид «барабанной палочки».

III. Учтите и оцените результаты развернутой РН на белых мышах центрифугата рвотных масс и промывных вод желудка обследуемого с клиническим диагнозом «пищевая токсикоинфекция. Ботулизм?» (таблица 4).

Таблица 4

№№	Введено животным	Результат
исследуемый материал	противоботулинистическая сыворотка
1.	+	Тип А	Мыши живы
2.	+	Тип В	Мыши пали
3.	+	Тип С	Мыши пали
4.	+	Тип Е	Мыши пали
5.	+	--	Мыши пали

Clostridium botulinum является возбудителем пищевой токсикоинфекции – ботулизма, протекающей с преимущественным поражением центральной и вегетативной нервной систем.

Для идентификации токсинов с целью микробиологической диагностики заболевания используют РН на белых мышах с моновалентными антитоксическими сыворотками типов А, В, С, Е. Все типы токсинов обуславливают одинаковую клиническую картину заболевания, но токсин каждого типа специфичен и нейтрализуется только соответствующим антитоксином.

Смесь исследуемого материала и противоботулинистических сывороток типов А, В, С, Е инкубируют при 37° в течение 30 мин и вводят п/к белым мышам. Контрольной паре мышей вводят только исследуемый материал.

Учет результатов производится через 4-6 ч, 24 ч и далее на протяжении 4-х дней. Мыши, получившие смесь токсина с гомологичной сывороткой, выживают при гибели всех остальных мышей. Картина болезни и гибели мышей очень характерна: учащенное дыхание, состояние полного расслабления мышц, западание мышц брюшной полости («осиная талия»), параличи и судороги перед смертью.

В заключении бак. лаборатории о наличии в исследуемом материале ботулотоксина обязательно указывают его тип. До установления типа токсина для лечения используется поливалентная (типов А, В, С, Е) противоботулинистическая лошадиная сыворотка. После определения типа токсина вводят сыворотку только данного типа.

IV. Промикроскопируйте препарат из биоптата флегмоны стопы больного «А», окрашенный по Граму (фотографии 1, 2). Сделайте вывод.

Больной «А», 42 л, госпитализирован в тяжелом состоянии с диагнозом: «флегмона стопы».

Объективно: кожа на стопе умеренно гиперемирована, имеется болезненный отек. Сопутствующая патология: инсулинзависимый сахарный диабет в течение 10 лет, варикозное расширение вен.

Больной прооперирован – произведено вскрытие флегмоны двумя разрезами; выпущено 100 мл зловонного гноя. При перевязке на следующий день обнаружены 2 раны с обильным зловонным гноетечением бурого цвета с капельками жира; обширный некроз подкожной клетчатки, фасций и мышц. Больному проведена экстренная операция: некротические ткани иссечены, произведен обильный лаваш раневой поверхности перекисью водорода, хлоргексидином, для лучшей аэрации и хорошего оттока раневого отделяемого края раны подшиты к коже. Динамика течения раневого процесса представлена на фотографиях 1, 2.

Одними из основных возбудителей гнойно-воспалительных заболеваний являются грамотрицательные неспорообразующие анаэробные бактерии родов Bacteroides, Prevotella, Porphyromonas, Fusobacterium. Это грамотрицательные мелкие палочки и коккобактерии; фузобактерии чаще имеют удлиненную веретенообразную форму с заостренными концами.

V. Ознакомьтесь со средами, методами и приборами для создания анаэробиоза (см. протокол практического занятия № 4).

Питательные среды: среда для контроля стерильности (СКС), Китта-Тароцци, полужидкий сахарный агар (высокий столбик).

Методы: Фортнера, Биттнера.

Приборы: микроанаэростат, эксикатор, газ-пак.