Дослід 5. Молібденова проба на фосфатну кислоту.
Принцип методу.Фосфати у кислому середовищі утворюють з молібдатами забарвлені фосфатно-молібденові комплекси.
Матеріальне забезпечення: гідролізат дріжджів, молібденовий реактив, пробірки, піпетки.
Хід роботи: До 10 крапель молібденового реактиву (розчин молібденового амонію в нітратній кислоті) додають 5 крапель гідролізату і кип’ятять декілька хвилин на відкритому вогні. В присутності фосфатної кислоти рідина забарвлюється в лимонно-жовтий колір. При охолодженні випадає жовтий кристалічний осад комплексної сполуки амонію фосфатномолібденового. Молібденова проба на фосфатну кислоту:
H3PO4 + 12 (NH4)2MoO4 + 21 HNO3 (NH4)3PO4MoO2 + 21 NH4NO3 + 12 H2O
У висновку акцентується увага на утворенні комплексної сполуки амонію фосфатномолібденового.
Результати досліджень оформляють у вигляді таблиці:
| Назва реакції | Продукти гідролізу нуклеопротеїнів | Компоненти нуклеопротеїнів |
Клініко-діагностичне значення. Аналіз ДНК є стандартним дослідженням для діагностики спадкових захворювань. Він може бути використаний для генотипування фетальної тканини в пренатальній діагностиці, яку застосовують для виявлення потенційних батьків.
Похідні азотистих основ широко застосовуються у практичній медицині. Так, меркаптопурин має антилейкемічну активність, що зумовлена його біологічною активністю як антиметаболіта пуринів. Фторурацил і фторофур як структурні аналоги піримідинів мають протипухлинну активність, що пов’язана з перетворенням їх у 5-фтор-2-дезоксиуридин-5’монофосфат, який є конкурентним інгібітором тимідилатсинтази.
Контроль виконання лабораторної роботи
1. Що таке повний і неповний гідроліз нуклеопротеїнів?
2. Назвіть продукти гідролізу нуклеопротеїнів?
3. Які продукти гідролізу виявляються пробою Тромера?
4. Які продукти гідролізу дають біуретову реакцію?
5. Новонароджені в період вигодовування не отримують нуклеїнові кислоти з молоком, але вони інтенсивно ростуть, збільшується кількість клітин, безперервно відбувається гемопоез, синтез білків, тобто відбуваються процеси, що потребують iРНК, тРНК, рРНК, ДНК. За рахунок яких сполук підвищується вміст нуклеїнових кислот?
6. У двох препаратах ДНК вміст аденіну становить відповідно 25 і 12 % від загального вмісту азотистих основ. Обчисліть відносний вміст тиміну, цитозину і гуаніну в цих препаратах ДНК.
Приклади тестів „Крок-1”
РНК вірусу СНІДу проникла всередину лейкоцита і за допомогою ензима ревертази спричинила синтез у клітині вірусної ДНК. В основі цього процесу лежить...
А. Зворотня транскрипція
B. Дерепресія оперону
C. Репресія оперону
D. Конваріантна реплікація
E. Зворотня трансляція
2. Із нітратів, нітритів і нітрозамінів в організмі утворюється азотиста кислота, яка зумовлює окисне дезамінування азотистих основ нуклеотидів. Це може призвести до точкової мутації – заміни цитозину на..
А. Тимін
В. Урацил
С. Аденін
D. Гуанін
E. Інозин
3. Нітрозаміни належать до дезамінуючих мутагенів. З якої азотистої основи в результаті їх дії утворюється урацил?
А. Цитозину
B. Аденіну
C. Гуаніну
D. Тиміну
E. Метилурацилу