Тема: т-лимфоциты: основные этапы

РАЗВИТИЯ, СУБПОПУЛЯЦИИ, РЕЦЕПТОРЫ И МАРКЕРЫ, СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ

ИДЕНТИФИКАЦИИ

I. МОТИВАЦИЯ ЦЕЛИ: Т-лимфоциты занимают среди клеток иммунной системы лидерство по количественным и функциональным характеристикам. Они определяют полный спектр клеточных реакций иммунитета, включая реакции ГЗТ, противоопухолевого и трансплантационного иммунитета, опосредуемые через их эффекторную функцию. Кроме того, оказывая регуляторное влияние на В-лимфоциты, клетки макрофагально-фагоцитарной системы, Т-лимфоциты обеспечивают развитие полноценного иммунного ответа.

Изучение основных этапов развития Т-лимфоцитов, их субпопуляций и функций необходимо для понимания механизмов иммунитета в норме и при патологии.

II. ЦЕЛЬ САМОПОДГОТОВКИ: после самостоятельного изучения темы, студент должен знать: этапы дифференцировки Т-клеток, основные маркеры и рецепторы Т-ЛФ, характеристику субпопуляций Т-ЛФ, методы их идентификации.

III. УМЕТЬ ПРАКТИЧЕСКИ: провести подсчет розеткообразующих Т-лимфоцитов (Е-РОК) в препарате периферической крови.

IV. БАЗИСНЫЕ РАЗДЕЛЫ ДЛЯ ПОВТОРЕНИЯ:к практическому занятию студент должен повторить:

"Гистология", под редакцией Ю.И. Афанасьева, Н.А. Юриной. Гл. VII - "Кровь и лимфа. Кроветворение" с. 164 - 168, 185-186. Гл. IX - "Иммунная система и клеточные взаимодействия в иммунных реакциях" с. 239 – 247.

V. ПЛАН ИЗУЧЕНИЯ ТЕМЫ:

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ ИЗУЧЕНИЯ ТЕМЫ:

1) Дифференцировка Т-лимфоцитов:

- характеристика маркеров на стадиях дифференцировки в костном мозге, тимусе и периферических органов иммунной системы,

- влияние тимических гормональных факторов на процесс дифференцировки тимоцитов,

- понятие "короткоживущих" и "долгоживущих" Т-клеток,

- понятие о маркерах и рецепторах.

2) Субпопуляции Т-ЛФ, их характеристика:

- CD4+: Т-х (1, 2), CD8+: Т-с, ЦТЛ

- Т-клетки памяти

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ ИЗУЧЕНИЯ ТЕМЫ:

1) Освоение методов идентификации Т-лимфоцитов:

- метод розеткообразования,

- метод иммунофлюоресценции, иммунопероксидазный

- функциональные тесты: РБТЛ с ConA и ФГА, цитокиновый профиль.

2) Произвести подсчет розеткообразующих Т-лимфоцитов в препарате периферической крови.

ПРИМЕЧАНИЕ: оценка за занятие выставляется с учетом результатов контроля исходного уровня знаний студента, устного ответа и практической части работы.

Рекомендуемая литература по теме занятия:

Основная:

1) Р.В. Петров «Иммунология», учебник для студентов медвузов 1987 г.;

2) Д.К. Новиков «Медицинская иммунология», 1998 г., разд. 2, 8 (стр. 150 – 154);

3) «Оценка иммунного статуса», 1998 г., разд. IY;

4) Лекция.

Дополнительная:

1) В.Г. Галактионов «Иммунология», 1998 г., гл. 7;

2) А.Ройт «Основы иммунологии», 1991 г., гл. 8, 9;

3) Л.Йегер «Клиническая иммунология и аллергология», 1991 г., т. 1.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ:

1) Расскажите этапы дифференцировки Т-лимфоцитов.

2) Какие маркеры экспрессируются на стадии предшественников тимоцитов?

3) Назовите маркеры, характерные для ранних тимоцитов, кортикальных и медуллярных тимоцитов.

4) Что означает маркер CD-38+?

5) Что вкладывают в понятие "дубль + клетка"?

6) На какой стадии дифференцировки тимоцитов начинает формироваться соотношение Тх / Тс как 2:1?

7) Перечислите популяции Т-клеток, образующиеся в результате дифференцировки медуллярных CD-4+ и CD-8+ тимоцитов, охарактеризуйте их маркеры.

8) Какие рецепторы экспрессируются на активированных Т-ЛФ?

9) Какова роль эпителия тимуса в онтогенезе Т-ЛФ?

10) Что означает понятие «позитивной и негативной селекции» Т-ЛФ?

11) Охарактеризуйте маркер CD-3.

12) Что понимают под маркерами и рецепторами Т-ЛФ?

13) Приведите примеры маркеров и рецепторов Т-ЛФ.

14) Назовите основные субпопуляции Т-ЛФ, охарактеризуйте их.

15) В чем состоит морфологическое отличие Т- и В-лимфоцитов?

16) Перечислите основные составляющие антигенраспознающего комплекса.

17) Перечислите методы идентификации Т-лимфоцитов.

18) В чем состоит сущность феномена розеткообравования?

19) Назовите методы выделения лимфоцитов из периферической крови.

20) Приведите примеры практического применения метода розеткообразования.

21) Назовите цитокины, продуцируемые Т-х1 и Тх2.

22) Перечислите виды патологии в системе Т-клеточного иммунитета.

ОБЯЗАТЕЛЬНЫЕ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ЗАДАНИЯ:

1) Нарисуйте схему онтогенеза Т-лимфоцитов.

2) Нарисуйте схему определения фенотипа Т-лимфоцита непрямым иммунопероксидазным (иммунофлюоресцентным) методом.

ПРИЛОЖЕНИЕ:

Подмаркерамипонимают поверхностные или внутриклеточные структуры, характеризующие как отдельные типы лимфоцитов в целом, так и определенные стадии их развития.

Варианты маркеров:

1) поверхностные антигены, в т.ч. дифференцировочные, появляющиеся и исчезающие в зависимости от стадии развития клетки или сохраняющиеся на всех стадиях клеточного цикла;

2) поверхностные рецепторы (распознающие структуры), с помощью которых клетки узнают антиген и воспринимают другие стимулы, необходимые для их жизнедеятельности.

Рецепторы, отличаются по строению, функциональному назначению и могут быть разделены на 3 группы:

1) антиген распознающие рецепторы на Тлф - (Т-клеточный рецепторный комплекс для антигена), на Влф – (рецептор Ig природы); позволяют специфически распознавать антиген;

2) рецепторы для иммунологически значимых продуктов иммунной системы (рецепторы для Fc фрагмента молекулы иммуноглобулина, компонентов комплемента, лимфокинов, цитокинов и др.) - необходимы для реализации различных функций иммунной системы;

3) рецепторы для продуктов не иммунного происхождения (гормонов, нейропептидов и др.),

4) рецепторы адгезии, с помощью которых лимфоциты и другие клетки в процессе миграции и иммунного ответа контактируют между собой..

Патология в системе Т-клеточного иммунитета:

· врожденная недостаточность Т-лимфоцитов (первичный ИД – ТКИН, синдром Ди-Джорджа, синдром атаксии-телеангиоэктазии и др);

· инфицирование Т-клеток вирусом иммунодефицита человека, острого лимфолейкоза;

· Т-клеточные иммунопролиферативные заболевания (варианты острого лимфолейкоза, Т-клеточные лимфомы и др.).

· врожденные и приобретенные дефекты Т-клеточного антигенраспознающего рецепторного комплекса или его отдельных субъединиц, адгезивных молекул, дефектность механизмов “обучения” Т-лф в тимусе (блок позитивной и/или негативной селекции тимических лимфоцитов);

· нарушение соотношения регуляторных Т-лимфоцитов (CD4 и CD8), субпопуляций с превышением функции хелперно-индуцирующих клеток - аутоиммунная и аллергическая иммунопатологии;

·

приобретенные тимусзависимые ИДС (удаление тимуса, поражение Т-клеток физическими, фармакологическими и другими методами, опухоли, нарушение питания, инфекции, возрастные изменения и др.);

Рис. 5. Внутритимусная дифференцировка Т-клеток. CD4 - маркер Т-хелперов; CD8 - маркер Т-киллеров, TKP - Т-клеточный (антигенраспознающий) рецептор