Качественные реакции на гормоны
Реакция на адреналин с хлорным железом
Принцип метода:Адреналин обладает слабощелочной реакцией, легко окисляется на воздухе с образованием адренохрома, вследствие чего раствор с хлорным железом окрашивается в зеленый цвет.
Реакция с хлорным железом характерна для пирокатехинового кольца, входящего в молекулу адреналина.
Реактивы, исследуемый материал:
1) раствор адреналина — 1 г/л;
2) раствор хлорного железа -10 г/л;
3) раствор едкого натра — 100 г/л.
Ход работыВ пробирку наливают 10 капель раствора адреналина и добавляют 1 каплю хлорного железа. Наблюдается зеленое окрашивание вследствие присутствия пирокатехина в молекуле адреналина. При добавлении 1 капли раствора едкого натра наблюдается вишнево-красное окрашивание.
Результат: ___________________________________________________________________
_____________
Вывод_______
_____________
Биуретовая реакция и реакция Фоля на инсулин
Принцип метода: С помощью цветных реакций на белки можно доказать, что инсулин- это белок, имеющий в своем составе SH-группы цистеина.
Ход работы:
1. В пробирку внести 10 капель раствора инсулина, 5 капель NaOH и 1 каплю CuSO4. Отмечают изменение окраски.
2. В пробирку внести 5 капель раствора инсулина, 5 капель реактива Фоля. Кипятят 2 минуты. Отмечают результат.
Результат: ___________________________________________________________________
_____________
Вывод_______
_____________
Лабораторная работа № 18
Флюоресценция продуктов окисления адреналина
Принцип методаАдреналин, окисляясь кислородом воздуха, при добавлении щелочи дает флюоресцирующие продукты.
Реактивы, исследуемый материал:
1) раствор адреналина — 1 г/л; 2) раствор едкого натра — 100 г/л.
Ход работыК 10 каплям воды приливают 6 капель раствора едкого натра и 24 капли раствора адреналина. Поместив пробирку перед включенным флюороскопом, наблюдают зеленую флюоресценцию продуктов окисления адреналина.
Результат: ___________________________________________________________________
_____________
Вывод_______
_____________
Диазореакция на адреналин
Принцип методаПри взаимодействии диазореактива с адреналином жидкость окрашивается в красный цвет вследствие образования сложного соединения типа азокрасителя.
Реактивы, исследуемый материал:
1) сульфаниловая кислота, 0,5% раствор;
2) нитрит натрия, 10% раствор;
3) едкий натр, 10% раствор;
4) адреналин — 1 г/л.
Ход работыК 6 каплям раствора сульфаниловой кислоты прибавляют 6 капель раствора нитрита натрия (диазореактив), 10 капель раствора адреналина и 3 капли раствора едкого натра. Жидкость окрашивается в красный цвет.
Результат: ___________________________________________________________________
_____________
Вывод_______
_____________
VIII.ВИТАМИНЫ
Лабораторная работа № 20
Качественные реакции на витамины.
Реакция восстановления витамина В2.
Водород, образующийся при добавлении металлического цинка к концентрированной соляной кислоте, восстанавливает рибофлавин через промежуточное соединение красного цвета (родофлавин) в бесцветный лейкофлавин. При этом желтая окраска раствора переходит в розовую, затем раствор обесцвечивается:
Материал исследования и реактивы:
1. Рибофлавин, 0,025 % взвесь в воде.
2. Соляная кислота, концентрированная.
3.Цинк металлический.
Ход работы:
10 капель взвеси рибофлавина в воде (0,025 %) наливают в пробирку, туда же добавляют 5 капель концентрированной соляной кислоты и небольшой кусочек металлического цинка.
Выделяющийся водород реагирует с рибофлавином и раствор изменяет окраску из желтой в красную и розовую, а затем обесцвечивается.
Результат: __________________________________________________________________
__________________________
Вывод_______
__________________________
Феррихлоридная проба на витамин В6.
Принцип метода. Бесцветный раствор витамина В6 приобретает красную окраску в присутствии хлорного железа; реакция обусловлена образованием комплексной соли типа фенолята железа красного цвета.
Реактивы:
1. Пиридоксин, 5 % раствор.
2. Железо хлорное, 5 % раствор.
Ход работы:В пробирке смешивают 5 капель 5% водного раствора витамина В 6 и 1 каплю 5 % раствора хлорного железа и встряхивают ее. Смесь окрашивается в красный цвет.
Результат: __________________________________________________________________
__________________________
Вывод_______
__________________________
На витамин С.
Принцип метода. Обнаружение аскорбиновой кислоты основано на ее способности вступать в окислительно-восстановительные реакции.
Реактивы:
1. Метиленовый синий, 0,01 % раствор
2. Натр углекислый, 10 % раствор
3. Витамин С, 1 % раствор
4. Вода
5. Раствор Люголя (0,1 % раствор йода в 0,2 % растворе йодида калия)
Ход работы: