Лабораторная работа № 16
Тема: Обследование водоема и выявление источника загрязнения (1)
Цель: изучение методов выявления токсиканта в водоеме (общие сведения).
Материалы и оборудование: теоретические сведения.
Задание
1 Изучить последовательность возникновения, определенное сочетание и выраженность симптомов, а также характер течения отравления рыб.
2 Изучить степени тяжести отравления.
Содержание
Отравления рыб диагностировать очень сложно, так как они часто возникают внезапно, протекают в быстро изменяющихся условиях среды, проявляются недостаточно специфичными признаками.
При подозрении на отравление необходимо решить ряд вопросов: произошла ли гибель рыб от токсикоза или от заразного заболевания, действия неблагоприятных факторов среды, недоброкачественного кормления и т.п.; от чего и когда наступила смерть животных; каким отравляющим веществом вызвана гибель рыб; каким путем оно попало в водоем и организм; какие факторы способствовали отравлению рыб; известны ли подобные случаи из практики или специальной литературы? Ввиду разнообразия обстоятельств отравления круг вопросов может быть расширен. Чтобы получить максимально полные сведения, диагностику отравлений осуществляют комплексно по следующей схеме:
1 Общее обследование водоема и выявление источника загрязнения;
2 Изучение и оценка клинической картины отравления;
3 Патологоанатомическое вскрытие рыб;
4 Биологические и органолептические исследования;
5 Лабораторные исследования;
6 Оценка результатов комплексных исследований и заключение.
В случае массовой гибели рыб проводят комиссионное обследование водоема или рыбоводного хозяйства с участием специалистов ветеринарной и ведомственной ихтиопатологической службы, органов рыбоохраны, водного хозяйства, санитарно-эпидемиологической станции и представителей местного Совета народных депутатов.
Его начинают с опроса очевидцев, осмотра акватории и берегов водоема, анализа имеющейся документации о масштабах материального ущерба, данных по гидрологии, гидробиологии водоемов и т.п.
При этом определяют участки и места концентрации пораженных и погибших рыб, уточняют время появления признаков поражения и характер его течения, видовой и возрастной состав пораженных рыб и других гидробионтов. Визуально оценивают состояние водоема, его дна, береговой зоны, степень зарастания.
На месте определяют температуру, рН, прозрачность, запах, окраску воды, содержание в воде кислорода и двуокиси углерода, а также проводят клинические наблюдения и патологоанатомическое вскрытие пораженных и погибших рыб.
Берут пробы воды, рыбы, грунта и других объектов для химико-токсикологических исследований. Уточняют наличие промышленных предприятий, коммунально-бытовых, сельскохозяйственных объектов, сбрасывающих сточные воды в водоем. Собирают сведения о масштабах, ассортименте и сроках применения пестицидов и удобрений в сельском и лесном хозяйствах.
При необходимости обследуют подозреваемые источники загрязнения. От технологов на промышленных предприятиях получают данные о количестве и химическом составе сточных вод, проверяют надежность работы очистных сооружений и чистоту сбросных вод, используя материалы ведомственных химических лабораторий и бассейновых инспекций.
Для расчета степени разбавления и установления зоны распространения вредных веществ, возможности сноса и смыва ядохимикатов и удобрений пользуются сводками гидрометеослужбы об уровне, направлении и скорости течения воды, ветровых волнениях водоема, температуре воздуха и воды, осадках и т.д. Учитывают время и места кормовых и нерестовых миграций рыб. Эти сведения позволяют определить условия, способствовавшие отравлению, и объяснить причины массового поражения того или иного вида рыб, их возрастной группы.
Клинический осмотр отравленных рыб проводят по схеме, принятой в ихтиопатологии. Осматривают 50-100 экз. рыб, а затем выборочно вскрывают 15-20 шт. каждого вида и возраста.
В первую очередь изучают поведение рыб в естественном водоеме или в аквариуме, учитывают реакцию рыб на внешние раздражители, положение тела в воде, подвижность и координацию движений, наличие спазмов мускулатуры и судорог, частоту и ритм дыхания и т.д.
Многие отравления клинически могут протекать сходно с рядом других заболеваний. Поэтому для их дифференциации важное значение имеют: последовательность возникновения, определенное сочетание и выраженность симптомов, а также характер течения болезни.
Острые отравления возникают внезапно, характеризуются кратковременным течением, массовой гибелью разных видов и возрастных групп рыб, ракообразных, лягушек, моллюсков и других гидробионтов. Кривая смертности рыб имеет характерную (языкообразную) форму с крутым подъемом в начале (первые 2-3 сут) и пологим спуском в последующие 10-30 сут интоксикации.
В клинической симптоматике отравлений рыб выделяют ряд стадий: начальное беспокойство, уменьшение или повышение возбудимости, нарушение равновесия, атаксия и стадия разрешения, заканчивающаяся восстановлением нарушенных функций, гибелью животных или переходом в хроническое отравление.
По тяжести проявления симптомов условно различают легкую, среднюю и тяжелую степень острого отравления.
При легкомтечении (начальной стадии) интоксикации симптомы слабо выражены, отмечают нарушение возбудимости, ориентации рыб в воде, замедление или ускорение плавания, изменение частоты дыхания, «кашель».
Средняястепень (стадия иммобилизации) отличается бурным проявлением типичных признаков отравления: потерей равновесия, нарушением координации движения (плавание в боковом положении, по кругу, спирали, штопорообразно и т.п.), тремором мускулатуры и судорогами.
Тяжелаястепень (агония) характеризуется угнетением, полной депрессией, потерей рефлексов, замедлением движения, опусканием на дно и гибелью рыб.
Хронические отравления протекают длительно в стертой, иногда бессимптомной форме, сопровождаются постепенной гибелью отдельных рыб. Отмеченные выше симптомы появляются в отдаленные сроки и незначительны. Рыбы перестают питаться, теряют массу, отстают в росте и развитии, ослабляется их устойчивость к инфекционным и инвазионным болезням, а также неблагоприятным факторам среды.
Важное место в диагностике токсикозов занимают гематологические и биохимические показатели, отражающие избирательное действие ядовитых веществ. Так, для отравления фосфорорганичсскими и частично карбанатными пестицидами характерно сильное угнетение активности ацетилхолинэстеразы (АХЭ) крови и головного мозга рыб. Неспецифические изменения в морфологическом составе крови, содержании сахара и гликогена, общего белка используют для диагностики в том случае, если они закономерно повторяются и носят стабильный характер.
Патологоанатомическое исследование включает в первую очередь количественный учет трупов рыб и других гидробионтов. При внешнем осмотре устанавливают вид, возраст рыб, регистрируют основные изменения внешних покровов и естественных отверстий. По трупному окоченению и степени разложения судят о времени гибели рыб.
Большинство трупов рыб находятся на дне и там разлагаются. Всплывшие трупы прибиваются ветром к берегам, а больные рыбы являются легкой добычей для рыбоядных птиц. Замечено, что у окуневых рыб трупное окоченение наступает быстро, они всегда лежат брюшком вверх с широко раскрытым ртом и жаберными крышками. Карповые рыбы, наоборот, находятся на боку, рот и жаберная полость прикрыты.
При отравлении ядами нервно-паралитического действия (пестициды и др.) трупное окоченение наступает гораздо быстрее и сильнее выражено, чем веществами местного раздражающего и наркотического действия. С повышением температуры воды разложение трупов ускоряется, что затрудняет правильную оценку морфологических изменений. Многие отравления рыб сопровождаются повышением секреции слизи на коже и жабрах. Механизм этого процесса и состояние слизи бывает неодинаковым. Кислоты и тяжелые металлы способны коагулировать слизь, она становится густой, творожистой, плохо отделяется. Щелочи, соли щелочноземельных металлов и аммиак разжижают ее, в результате чего она быстро смывается, происходит истощение ее запасов и поверхность тела становится суховатой, а чешуя шероховатой.
Дифференцированно следует подходить и к оценке точечных, пятнистых и полосчатых кровоизлияний на туловище, плавниках, жаберных крышках, глазах. Их обнаруживают не только при отравлениях, но и ряде других болезней. Так, серповидные кровоизлияния на склере глаз служат одним из признаков асфиксии и наблюдают при псевдомонозе. Выраженное пучеглазие, ерошение чешуи, брюшная водянка встречаются только при некоторых токсикозах смешанного характера, например при токсической водянке. В этих случаях отмечено помутнение, изъязвление и прободение роговицы глаза. В то же время многие резорбтивные яды (пестициды и др.) не вызывают существенной местной реакции.
Жабры являются важнейшим органом всасывания и выведения ядовитых веществ из организма рыб. Различные токсиканты оказывают на жабры рефлекторное, раздражающее и реже некротизирующее действие. Поэтому к постоянным компонентам большинства токсикозов рыб относят различные формы нарушения кровообращения в жаберном аппарате: застой крови, кровоизлияния, анемия, токсический отек.
Микрокартина проявляется отслоением и набуханием респираторного эпителия, гипертрофией и пролиферацией слизистых и хлоридных клеток, дистрофией эпителия, что приводит к утолщению лепестков, сглаживанию рисунка, увеличению объема и дряблости жабр, выпячиванию их из-под жаберных крышек. Вещества локального действия в высоких концентрациях вызывают диффузную десквамацию эпителия инекроз ткани. При хроническом отравлении некоторыми веществами (например, аммиаком) наблюдается очаговый некроз жабр.
При вскрытии брюшной полости обращают внимание на ее содержимое, топографию и внешний вид органов, их консистенцию, размеры, степень кровенаполнения, окраску крови, серозных и слизистых оболочек, а также наличие запаха того или иного химического вещества.
В брюшной полости при острых отравлениях нередко обнаруживают прозрачный транссудат (жидкость), иногда с примесью крови. Брюшина и серозные покровы органов отечны, изредка встречаются мелкоточечные кровоизлияния.
Внутренние органы, особенно печень и почки кровенаполнены, темно-красного цвета, дряблой консистенции, селезенка не увеличена, темно-вишневого цвета. Околосердечная полость, венозный синус и предсердие нередко (например, при действии пестицидов) сильно переполнены свернувшейся кровью. Заметные изменения в слизистой кишечника наблюдают только при поступлении ядов перорально. В головном мозге обнаруживают отек и дистрофию нейронов, застойную гиперемию.
Картина хронических отравлений отличается снижением упитанности рыб, общей анемией и мышечной гидратацией, побледнением и атрофией печени и других органов.
Поскольку патологоанатомические изменения недостаточно специфичны, а лишь ориентируют на наличие отравления, то для их уточнения и более достоверной оценки проводят гистологические исследования. Это дает возможность дифференцировать отравления от патологических процессов, вызванных другими причинами, а также различать формы токсикозов.
Вопросы для контроля:
1 Как проводится обследование водоема на наличие токсических веществ?
2 Какие степени отравления рыб токсикантами известны?
3 На что надо обращать особое внимание при вскрытии отравленной рыбы?