Лабораторная работа № 8

Тема: Токсичность солей тяжелых металлов

Цель: изучите отличительные особенности токсического влияния тяжелых метал­лов на рыб.

Материалы и оборудование: живая рыба, аквариумы с отстоянной водопроводной водой, сернокислая медь (CuSO₄), сачок, набор инстру­ментов (кювета, скальпель, пинцет, ножницы, препаровальные иглы, марля, вата), стеклянная палочка, электрическая лампа, ЭПГ, микроскоп, предметные и покров­ные стекла.

Задание

1 Приготовьте два аквариума: один контрольный (с чистой водой) и один опыт­ный (с токсикантом).

2 Проведите сравнительный анализ поведения рыб в различных вариантах опы­та.

3 Проведите электропневмографическое изучение дыхательного цикла под­опытных рыб.

4 Проведите паталогоанотомическое исследование опытных рыб.

5 Сделайте вывод.

Содержание

Тяжелые металлы (медь, ртуть, кадмий, никель и т.д.) и их соли – наиболее распространенная группа высокотоксичных веществ. Большинство тяжелых метал­лов и их солей – простые неорганические соединения, токсичность которых обу­словлена анионами, катионами или физико-химическими свойствами соли.

Ход работы

Приготовьте два аквариума с чистой, отстоянной водой. Один из них будет служить контролем, другой – опытным. В опытный аквариум добавьте сернокислую медь (CuSO₄) из расчета кон­центрации соответственно 100 мл/л.

Подберите две подопытные рыбы, одинаковые по виду и линейно-весовым показателям и поместите их аквариумы с вышеуказанными концентрациями и кон­трольной. После посадки рыб в аквариумы проводите постоянные наблюдения за их поведением. Обратите внимание на положение рыб в аквариумах (у дна, в толще во­ды, на поверхности), на характер движения плавников, жаберных крышек, челю­стей, мышц и общую двигательную активность. Отметьте наличие или отсутствие слизеотдедения, судорог, мышц и плавников.

После начала опытов регулярно с интервалом в 15-20 мин возбуждайте под­опытных рыб различными раздражителями: шумом (стук по стеклу), прикосновени­ем палочки, электрическим током, светом лампочки, отмечая постепенные измене­ния ответных реакций рыб в воде с токсикантом. Необходимо помнить, что после действия каждого раздражителя обязательно надо давать рыбам отдохнуть. Через час с начала опыта проведите электропневмографическое изучение дыхатель­ного ритма подопытных рыб (определите частоту и глубину дыхания) в различных вариантах эксперимента. После наступления стадии отравления рыб – «полная поте­ря равновесия» в опытных аквариумах зафиксируйте время и проведите визуальный осмотр внешних органов и тканей. Обратите особое внимание на количество слизи на коже и жабрах, ее цвет и консистенцию, состояние кожного покрова, глаз, плавников, жаберных лепестков (окраска, кровоизлияния, консистен­ция) положение жаберных крышек и рта (закрыты или открыты).

Затем у всех подопытных рыб отсеките скальпелем или ножницами хвосто­вой стебель. Поместите по капле крови на предметное стекло, с помощью микро­скопа рассмотрите препараты и отметьте, в каких вариантах опыта произошли гемо­лиз и агглютинация форменных элементов. Обратите внимание на различие в цвете крови у подопытных рыб.

Вскройте подопытных рыб и исследуйте состояние внутренних органов и тканей (мышцы, кровь, печень, почки, кишечник, плавательный пузырь, сердце, се­лезенка). Отметьте патологические изменения (окраска, консистенция, кровоизлия­ния) выше указанных органов опытных рыб.

Результаты наблюдения запишите в таблицу проведите сравнительный анализ полученных данных и сделайте вывод о токсичности тяжелых метал­лов для рыб.

Таблица – Результаты токсического влияния сернокислой меди на рыб

№п/п	Показатели	Контроль	CuSO4
	Поведение
	Реакция на раз­дражители
	Частота дыхания
	Глубина дыхания
	Время «потери равновесия»
	Характеристика крови
	Изменение внешних органов
	Изменение внут­ренних органов

Вопросы для контроля:

1 Как проявляется токсичное действие сернокислой меди на рыб?

2 Каковы симптомы отравления сернокислой медью?

3 В чем заключается влияние сернокислой меди на поведение и физиолого-биохимические показатели рыб?

Лабораторная работа № 9

Тема: Токсичность фенолов

Цель:изучить особенности токсического влияния фенолов на рыб.

Материалын оборудование:живая рыба, аквариум с отстоянной водопроводной водой, фенол, набор инструментов (кювета, скальпель, пинцет, ножницы, препаровальные иглы, марля, вата), стеклянная палочка, электрическая лампа, ЭПГ, электростимулятор.

Задание

1 Приготовьте два аквариума: один контрольный (с чистой водой) и один опыт­ный (с токсикантом).

2 Проведете сравнительный анализ поведения рыб в различных вариантах опыта.

3 Проведите сравнительное электропневмографическое изучение дыхательного цикла подопытных рыб.

4 Проведите поталогоанотомическое исследование опытных рыб.

5 Сделайте вывод.

Содержание

Фенолы (карболовая кислота, пирокатехин, резорцин, гидрохинон, пирогал­лол, флороглюцин, крезол, аглинофенол, нафтол, катихол, и др.) являются наиболее распространенной и высокотоксичной группой загрязнителей, сухой частью про­дукта перегонки древесины и каменноугольного дегтя. Фенолы обладают антисеп­тическими свойствами, поэтому их широко применяют для дезинфекции.

Фенол содержащие воды влияют на запах и вкусовые качества рыбы уже в концентрации 0,01 мл./л. Яды фенольного ряда влияют токсически на организм рыб путем нарушения нормальной деятельности ЦНС.

Ход работы

Приготовьте два аквариума с чистой отстоянной в течение суток водопровод­ной водой. Один ив них будет служить контролем, другой – опытным. В опытном растворите фенол, из расчета кон­центраций по 100 мл/л. Подберите две подопытные рыбы одинаковые по виду и линейно-весовым показателям и поместите их в контрольный и опытные аквариумы. После пересадки рыб в аквариумы проводите постоянные наблюдения за их поведе­нием. Обратите внимание на положение рыб в аквариумах (у дна, в толще воды, на поверхности), на характер движения плавников, жаберных крышек, челюстей, мышц и обшей двигательной активности. Отметьте наличие или отсутствие слизеотделения, судорог мышц и плавников.

После начала опытов регулярно с интерва­лом в 15-20 мин возбуждайте подопытных рыб различными раздражителями: шу­мом (стуком по стеклу), прикосновением палочки, светом лампочки, электрическим током, отмечая постепенные изменения ответных реакций рыб в воде с токсикантом. Необходимо помнить, что после действия каждого раздражителя обязательно необходимо давать рыбе успокоиться. Через час с начала опытов проведите электропневмографическое изучение дыхательного ритма подопытных рыб (определите глубину и частоту дыхания в различных вариантах эксперимента).

После наступления стадии отравления рыб «полная потеря равновесия» в опытных аквариумах зафиксируйте время и проведите осмотр внешних органов и тканей. Особое внимание уделите на количество слизи на кожных покровах и жаб­рах, ее цвет, консистенцию, состояние кожного покрова, глаз, плавников, жаберных лепестков (окраска кровоизлияния, консистенция), положение жаберных крышек и рта (закрыты или открыты).

Вскройте подопытных рыб и исследуйте состояние внутренних органов и тка­ней (мышцы, печень, почки, кровь, кишечник, плавательный пузырь, сердце, селе­зенка). Отметьте наличие или отсутствие патологических изменений (окраска кон­систенция, кровоизлияния) в вышеуказанных органах опытных рыб.

Результаты наблюдений запишите в таблицу, проведите сравнительный ана­лиз полученных данных и сделайте выводы о токсичности фенола на рыб.

Таблица – Результаты токсического влияния фенола

№ п/ п	Показатели	Кон­троль	Фенол
	Поведение
	Реакция на раздражители
	Частота дыхания
	Глубина дыхания
	Время «потери равнове­сия»
	Характеристика крови
	Изменение внешних ор­ганов
	Изменение внутренних органов

Вопросы для контроля:

1 Каковы симптомы отравления рыб фенолом?

2 Как проявляется токсическое действие фенола?

3 В чём состоят отличительные особенности токсического влияния на рыб фе­нолов?