Противомикробное действие прополиса
Назначение прополиса в улье не ограничивается одними строительными целями. Всем пчеловодам хорошо известно, что внутри улья никогда не наблюдается неприятного гнилостного запаха даже в том случае, если в улей попадают непрошенные гости, так называемые «чужеземцы» в виде других насекомых, слизняков, мышей или даже ужей, которые иногда заползают в старые ульи-колоды. С этими непрошенными гостями пчелы жестоко расправляются. Они убивают их своим ядом, а трупы тщательно обволакивают прополисом, превращая их как бы в своеобразные мумии. Такие замурованные трупы не подвергаются гнилостному распаду. Чем можно объяснить отсутствие процессов гниения замурованных в прополис трупов животных? По-видимому, только антимикробным действием прополиса, т.е. способностью подавлять развитие гнилостных бактерий или убивать их и этим предотвращать процессы гниения.
Были поставлены специальные опыты. Кусочки мяса различной величины (от 2 до 20 г) заключались в прополис и выдерживались в течение разного срока при комнатной температуре (16°-18°) и при температуре термостата (36°-37°). Запрополисованные кусочки мяса вскрывались, подвергались осмотру и микроскопическому и бактериологическому исследованию. Было наглядно показано, что прополис предотвращал развитие гнилостной микрофлоры.
Микробы постоянно попадают в улей через щели и отверстия соломенных матов или холстины. В момент сбора прополис загрязняется через инструмент и руки. Дальнейшее загрязнение или обсеменение его микробами происходит во время хранения прополиса через предметы окружающей среды и воздух. Находящиеся в воздухе микробы постоянно оседают. Несмотря на это, прополис, как правило, остается свободным от микробов. В прополисе как бы происходит своеобразный процесс самостерилизации, т.е. освобождение его от попавших микробов. Если широко употребляемые для выращивания микробов питательные среды, как мясопептонный бульон или мясопептонный агар, оставить на некоторое время открытыми, то на другой день в этих средах появится рост попавших туда из воздуха микробов. При этом жидкая питательная среда помутнеет, а на плотной среде (мясопептонном агаре) вырастут колонии микробов, видимые простым глазом.
При добавлении в пробирки с мясопептонным бульоном небольших кусочков прополиса величиной 0,05, 0,1, 0,2 и 0,3 г развитие микробов в них не наблюдается. После внесения прополиса в пробирки с мясопептонным бульоном не растут не только случайно попавшие микробы, но и специально внесенные.
Следовательно, прополис губительно действует не только на те микробы, которые попадают в него при сборе и хранении, а способен задержать развитие вновь внесенных в эту среду микробов, т.е. в данном случае доказывается дезинфицирующее действие прополиса. Если после внесения кусочков прополиса в питательную среду последнюю прокипятить и после этого сделать в ней посев микробов, то сила противомикробного действия значительно возрастет. В этом случае задержку развития бактерий вызывают очень незначительные количества прополиса, причем резко разграничивается чувствительность одних видов и относительная устойчивость других. При помощи этого метода было определено бактериостатическое (задерживающее рост микробов) действие прополиса против следующих бактерий: гемолитического стрептококка, белого, золотистого и лимонно-желтого стафилококков, возбудителя рожи свиней, возбудителей пастереллёза сельскохозяйственных животных, некоторых паратифозных бактерий, возбудителей листереллёза человека и животных, кишечной палочки, возбудителя сибирской язвы (культура 2-й вакцины Ценковского), различных видов почвенных спорообразующих микробов, пигментных бактерий, чудесной и синегнойной палочек, вульгарного протея, возбудителя американского гнильца пчел и др. микробов.
В микробиологической практике для определения вида микробов широко используют дифференциальный метод окраски — окраска по Граму: всех микробов делят на две большие группы — грамположительные (окрашивающиеся в фиолетовый цвет) и грамотрицательные (окрашивающиеся в красный цвет). Микробы этих групп часто по-разному относятся к противомикробным веществам: как правило, грамположительные более чувствительные, чем грамотрицательные. В этом отношении прополис не представляет исключения.
Из приведенной таблицы видно, что к прополису более чувствительны грамположительные бактерии. Исключение составляют пастереллы. Здесь обращает на себя внимание чувствительность таких бактерий, как возбудитель сибирской язвы и группы почвенных бактерий, как антракоидная, ложносибиреязвенная, грибная и сенная палочки. Это спорообразующие бактерии, как их принято называть, бациллы. Они, попадая в условия, при которых не могут дальше существовать, образуют так называемые споры — особая форма существования для перенесения неблагоприятных условий. Споры по сравнению с самой бактериальной клеткой более устойчивы к воздействию неблагоприятных внешних факторов. Оказывается достаточно самого небольшого количества прополиса, чтобы задержать развитие этих спороносных бактерий, т.е. проявить бактериостатическое действие.
Способность прополиса вызывать гибель микробов (убивать их), именуемая бактерицидным действием, изучалась следующим образом. Каплю свежей бульонной культуры бактерий наносили на лепешечку, приготовленную из прополиса. Через определенные сроки проводили контрольный высев в питательные среды. Посевы помещали в термостат с оптимальной для развития бактерий температурой. По наличию или отсутствию роста делали заключение о бактерицидном действии прополиса. Таким путем было установлено, что прополис обладает не только бактериостатическим действием, но и бактерицидным и что различные виды бактерий погибают в разные сроки. Так, пастереллы погибают через 15-20 минут, возбудитель рожи свиней через 30 минут — 1 час, гемолитический стрептококк через 1-2 часа, золотистый стафилококк через 2-4 часа, белый — через 2-3, лимонно-желтый — через 3-4, кишечная палочка, паратифозные бактерии и листереллы — через 2-4 часа, протейная — через 3-4, чудесная и синегнойная — через 3-6 часов; все спорообразующие палочки, как возбудитель сибирской язвы, антракоидная, ложносибиреязвенная, грибная, сенная и возбудитель американского гнильца пчел погибают позднее 48 часов.