Обработка собранного материала в лабораторных условиях

ГБОУ ВПО Волгоградский государственный медицинский университет

Министерства здравоохранения и социального развития

Российской Федерации

Кафедра биологии

«Утверждаю»

Зав. кафедрой биологии,

д.м.н.

М.В. Черников__________

''____'' _________ 2011 г

Методические рекомендации для студентов1 курса медико-биологического факультета к практическим занятиям по учебно-биологической практике.

Для специальности: 060601 «Медицинская биохимия»

Тема:Знакомство с методами сбора, хранения и фиксации таксономического материала. Принципы работы с определителем.

Цель:Знакомство с методами сбора, хранения и фиксации таксономического материала. Подготовка студенческой группы к выходу в полевые условия: 1) разбор рабочего плана экскурсии; 2) подготовка инвентаря - водных и энтомологических сачков, инструментария, разведение фиксирующих жидкостей.

Перечень знаний и практических навыков

1. Знать основные методы сбора, хранения и фиксации таксономического материала.

2. Уметь правильно осуществлять сбор беспозвоночных животных.

3. Уметь транспортировать, фиксировать и хранить собранный материал.

4. Уметь работать с определителем.

Краткое содержание темы:

Основные правила снаряжения при походе в лес, на поле, в болото и др. биотопы

На экскурсиях лучше всего использовать обувь, подходящую для длительных переходов и только на низком каблуке. В пойменный биотоп рекомендуется дополнительно брать с собой резиновые сапоги. Одежда должна быть рассчитана на возможность резкой смены погоды. Необходимо брать с собой головной убор. Во время экскурсий для освобождения рук целесообразно переносить вещи в рюкзаке. При проведении экскурсий студент обязан иметь полевой дневник, карандаш и набор герметичных емкостей для сбора беспозвоночных.

Необходимое оборудование

1) Энтомологический сачок представляет собой кольцо из проволоки, на которое нашита ткань (марля). При самостоятельном изготовлении сачка проволоку лучше брать стальную, 3-5 мм в диаметре; глубина сачка должна быть в 1,15 - 1,25 раза больше диаметра обруча у водного сачка и в 2 раза – у воздушного; для водных сачков необходимо использовать более прочную, чем марля, ткань.

2) Морилка представляет собой своеобразную камеру для умерщвления насекомых. В качестве морилок можно использовать любую герметичную стеклянную посуду. На дно морилки помещается ватный тампон, смоченный эфиром, этилацетатом или хлороформом. Рекомендуется также вкладывать смятые кусочки бумаги или крупные опилки, которые будут предотвращать слипание насекомых в морилке при транспортировке.

3) Эксгаустер или всасыватель – специальный прибор, предназначенный для сбора мелких насекомых путем засасывания в приемную камеру. Он состоит из небольшой широкогорлой баночки (на 50-100 мл), резиновой пробки и трубок.

4) Расправилка– это своеобразный деревянный станок для расправления бабочек, стрекоз, прямокрылых и некоторых перепончатокрылых.

Сбор беспозвоночных во время экскурсии

При сборе беспозвоночных во время экскурсии не следует увлекаться отловом чрезмерного количества одинаковых животных. Наиболее простым и распространенным методом отлова беспозвоночных является ручной сбор. Отлов производится при осмотре растений, под корой, из пней и трухи, из куч навоза, под различными предметами, лежащими на почве и т.п.. В древесном ярусе удобно стряхивать насекомых на полотно. Для целенаправленного отлова летающих насекомых используют энтомологический воздушный сачок.

Фиксирующие жидкости

В качестве фиксатора используют растворы формалина, уксусной эссенции, спирта. Требование ко всем жидкостям: слабая испаряемость из ловушек и быстрая фиксация материала.

Наиболее простым способом считается фиксация в формалине. Исходная концентрация параформалина – 40%. Для заливки в ловушки его разводят до 4%: на 1 часть параформалина берут 9 частей воды (в 9 объемных частей воды входит объем фиксируемого материала; для приготовления любых растворов лучше использовать кипяченую воду). Для длительного хранения материала фиксатор через сутки-двое полагается заменять.

Главный недостаток формалина как фиксатора — его неприятный запах и высокая токсичность. Оставлять банки с формалином открытыми, наклоняться над ними и вдыхать пары формалина нельзя. После работы помещение необходимо тщательно проветрить.

Спирт в качестве фиксатора используют обычно в виде 70°-ного раствора. Для его получения можно 70 мл 96°-ного спирта разбавить водой до объема 96 мл. Спирт лишен недостатков формалина, но стоит дороже. Кроме того, при хранении в спирте животные сильно обесцвечиваются.

При отсутствии спирта и формалина в качестве фиксатора может применяться формидрон — жидкость, часто имеющаяся в продаже в аптеках.

Обработка собранного материала в лабораторных условиях

При возвращении с экскурсии необходимо сразу же произвести разборку материала. Не следует помещать всех животных подряд в морилку. При оформлении коллекции необходимо определиться, в каком виде будут храниться материалы – на ватных матрасиках, в наколотом виде или в фиксирующей жидкости. В первом случае на все сборы требуется одна этикетка, содержащая следующую информацию: дату, место и авторов сборов. Если за время экскурсии посещалось несколько мест, для каждого сбора используется отдельный матрасик. Если насекомые будут храниться в наколотом виде, то этикеткой снабжается каждый экземпляр. Накалывать насекомых необходимо в день сбора. Клопов, жуков, перепончатокрылых, двукрылых и др. мелких насекомых можно сразу помещать в энтомологическую коробку. Бабочек, стрекоз и других насекомых с крупными крыльями на 3-4 дня помещают в расправилки. После сушки их также можно переносить в энтомологические коробки. Водных беспозвоночных, слизней и личинок бабочек помещают в 2-4%-ный раствор формальдегида или 70%-ный раствор этилового спирта.

При накалывании насекомых соблюдаются следующие правила:

1. Игла должна входить в тело животного перпендикулярно.

2. В центр груди накалываются стрекозы, прямокрылые, чешуекрылые, перепончатокрылые, двукрылые.

3. В правое надкрылье на уровне 2-3 пары ног накалываются жуки.

4. В щиток накалываются цикады, листоблошки, клопы.

5. Мелкие насекомые наклеиваются на узкий конец треугольника размерами 3х7 мм (животное помещается боком, брюшной стороной наружу). Затем всю конструкцию накалывают на иголку.

Систематическая или тематическая коллекция насекомых монтируется в энтомологической коробке. Последовательность указания таксонов (отряд, семейство, род) берется из определителя. Таксоны обозначаются различными шрифтами (чем выше таксон, тем крупнее шрифт). По контуру коробка промазывается любым средством от тараканов, в угол помещается мешочек с таблеткой нафталина.

Этапы самостоятельной работы:

1. Знакомство с методами сбора, хранения и фиксации таксономического материала.

2. Подготовка необходимого инвентаря и инструментария дл выхода в полевые условия.

3. Освоение навыков работы с определителем на материале энтомологических коллекций кафедры биологии ВолгГМУ.

Рекомендуемая литература:

1. 1. Кобышев Н.М. Экологический подход использования животных объектов при изучении биологии / Н.М. Кобышев, Л.Г. Матросова: Инновационные педагогические технологии. – Волгоград, 1996.

2. Б.Е. Райков, М.И. Римский-Корсаков: Экологические экскурсии. – М.: Цитадель-трейд, 2002. 640 с.

3. М.В. Мельников, М.Н. Цуриков: Проведение полевых исследований беспозвоночных животных. – Липецк, 2008.

4. Горностаев Г.Н. Насекомые. Энциклопедия природы России. – М.: АВF, 1998.

Методическое пособие составлено ассистентами кафедры биологии: к.б.н. Кузнецовой О,Ю., Букатиным М.В., Кривицкой А.Н., Чулковым О.Д.