Частокол Ленгмюра – монослой фосфолипидов. Модель создана в 1917 году
На поверхность воды наносят каплю растворенных в каком-либо растворителе фосфолипидов или жирных кислот. После распределения их молекул на поверхности воды и испарения расворителя на поверхности воды остается пленка. Адсорбированные молекулы липидов располагаются перпендикулярно поверхности воды.
Липосомы – широко распространенная модель. Это мель-чайшие пузырьки, состоящие из билипидной мембраны. Получаются при обработке смеси воды и фосфолипидов ультразвуком. На ней хорошо изучать влияние состава фосфолипидов на свойства мембран или влияние мембран на свойства втсраеваемых белков.
Билипидная мембрана. Берется два водных раствора, разде-
ленных тефлоновой перегородкой
С отверствием. Отверствие заполняют фосфолипидом, растворенным в гексане. Когда растворитель и изли-шек липида растекаются по тефлону, в отверстии образуется бислой, толщиной в несколько нанометров.
На такой мембране удобно изучать проницаемость мембраны для разных агентов, измерять сопротивление мембраны или генерируемый на ней потенциал.
Методы исследования мембран
Микрокалориметрия. Изучаются фазовые переходы на каком-либо участке мембраны и оценивают размеры “кооперативных единиц”, т.е. число молекул, участвующем в фазовом переходе. Для этого измеряют теплоемкость суспензии фосфолипидов при разных температурах в области фазового перехода. Например, для синтетического липида дистеароил-фосфатидил-холина графики зависимости от , где - абсолютная температура выглядят так
В области фазового перехода при происходит резкое возрастание теплоемкости. Площадь под кривыми соответствует количеству теплоты , поглощаемого при переходе из твердого состояния в жидкое. Зная массу фосфолипида в пробе, можно рассчитать энтальпию плавления
И энтропию при плавлении
.
Энтрапия возрастает с ростом длины углеводородной цепи жирных кислот, причем на каждую метиленовую группу приходится примерно постоянное увеличение энтропии при фазовом переходе. Т.о. мы можем судить о длине куглеводородной цепи липидов.
Площадь под кривой от до
Пропорциональна количеству молекул уже претерпевших фазовый переход.
ИК - спектроскопия.
Этот метод основан на замечательном свойстве природы: молекулы каждого вещества имеют индивидуальные, специфические спектры поглощения. Молекулярные спектры позволяют
Исследовать состав мембран, строение молекул в мембране и характер межмолекулярных взаимодействий.
3.Люминесцентный анализ.