Микробиологическая диагностика стафилококковых и стрептококковых инфекций.

Рис. Колонии стрептококков и стафилококков на питательной среде.

Стафилококки.

Семейство Staphilococcoceae, род Staphilicoccus.

Это мелкие грамположительные кокки. В мазках располагаются скоплениями, часто гроздевидными. Спор не образуют, неподвижны. Образуют микрокапсулы. Являются факультативными анаэробами.

Нетребовательны к питательным средам, хорошо растут на простых средах, дают пигментные колонии. Элективной средой для стафилококков является желточно-солевой агар, режемолочно-солевой агар.

Стафилококки устойчивы к действию высоких концентраций хлорида натрия.

В отличие от микрококков стафилококки способны разлагать глюкозу в анаэробных условиях, глицерин в аэробных условиях. Они чувствительны к лизостафину, так как в состав их клеточной стенки входят особые тейхоевые кислоты рибитолтейхоевые.

Стафилококки активны биохимически, обладают протеолитической и сахаролитической активностью. По биохимическим свойствам делятся на виды:

1) St. aureus (имеет много факторов патогенности, может
иметь разнообразную локализацию поражений);

2) St. epidermidis (поражает кожу);

3) St. saprophiticus (паразит мочеполового тракта).

Для дифференциации этих трех видов используют три теста:

1) ферментацию маннита в анаэробных условиях;

2) продукцию плазмокоагулазы;

3) чувствительность к антибиотику новобиоцину.

Для St. aureus все три теста положительны, для St. saprophiticus все три теста отрицательны, St. epidermidis чувствителен к новобиоцину.

Стафилококки могут вызывать оппортунистические, в том числе внутрибольничные инфекции. Наибольшее клиническое значение наряду с «традиционными» видами — Staphylococcus aureus (золо­тистым), Staphylococcus epidermidis (эпидермальным) и Staphylo­coccus saprophyticus (сапрофитическим) — имеют так называемые коагулазоотрицательные стафилококки (S. haemolyticus, S. lugdunensis, S. schleiferi, S. warneri). Внутрибольничные инфекции часто обусловлены метициллинрезистентными S. aureus (MRSA), имеющими повышенную вирулентность и устойчивость ко многим антимикробным препаратам.

При заболеваниях, вызванных стафилококками, исследуют гной, раневое отделяемое, пунктаты из полостей и абсцессов, материал со слизистых оболочек, кровь, мокроту, мочу, спинномозговую жидкость; в случае пищевых отравлений — рвотные массы, испражнения больных, остатки пищи; при профилактиче­ских исследованиях — смывы с инструментов и оборудования, стерилизованные материалы медицинского назначения, воздух.

При заболеваниях полости рта материал берут ватным тампоном после удаления верхнего слоя гноя, в котором могут находиться непатогенные стафилококки и другие микроорганиз­мы, попавшие с кожи или из воздуха. При наличии закрытых гной­ных очагов делают пункцию и выливают гной из шприца в сте­рильную пробирку. Отделяемое слизистой оболочки снимают су­хим тампоном. Мочу, мокроту собирают в стерильные пробирки и банки. Кровь (5 — 20 мл), взятую шприцем из локтевой вены, и спинномозговую жидкость с соблюдением правил асептики сеют у постели больного во флакон, содержащий 100 — 200 мл сахар­ного бульона (рН 7,2 — 7,4), или на среду для контроля стериль­ности. Стафилококки хорошо размножаются и на простых сре­дах, однако лучше использовать обогащенные среды, так как септицемия может быть вызвана не только стафилококками, но и прихотливыми микроорганизмами (стрептококками, анаэро­бами и др.).

Микроскопия.Гной, мокроту, отделяемое зева и другие мате­риалы, содержащие высокие концентрации возбудителя, подвер­гают световой микроскопии. Гной густой консистенции вносят в каплю стерильной воды, делают мазок тампоном или петлей и окрашивают по Граму. Шаровидные клетки стафилококков окра­шиваются в сине-фиолетовый цвет и располагаются небольшими скоплениями, попарно или короткими цепочками. Микроскопия не может служить единственным ме­тодом лабораторной диагностики, так как не позволяет с уверенностью дифференцировать, например, стафилококки и стрепто­кокки, поэтому наряду с микроскопическим проводят бактерио­логическое исследование материала.

Бактериологическое исследование.В 1-й день исследования пет­лей или шпателем материал засевают в чашки с 5%м кровяным, а также желточно или молочносолевым агаром, которые инку­бируют 18 — 24 ч при 37 °С и столько же — на свету при комнатной температуре (для более четкого пигментирования колоний). Соле­вые среды ввиду высокого содержания хлорида натрия являются селективными для стафилококков, рост большинства сопутству­ющих микроорганизмов на них подавляется.

На 2й день изучают выросшие колонии: стафилококки обра­зуют выпуклые, ровные непрозрачные колонии средней величи­ны белого, лимонно-желтого или золотистого цвета (гемолити­ческие или негемолитические). Пигментообразование лучше за­метно на молочно-солевом агаре. На желточно-солевом агаре боль­шая часть патогенных стафилококков вызывает лецитиназную (лецитовителлазную) реакцию, проявляющуюся в образовании вок­руг колонии зоны помутнения с радужным венчиком в отражен­ном свете. При микроскопии в мазках обнаруживают грамполо­жительные кокки, расположенные гроздьями.

Для выделения чистой культуры подозрительные колонии пе­ресевают на скошенный МПА.

На 3й день проверяют чистоту выделенной культуры, ставят тесты и делают посевы для ее идентификации. Обяза­тельно определяют чувствительность штамма к антибиотикам, а при необходимости — фаговар (с использованием набора типо­вых стафилококковых бактериофагов).

На 4й день проводят окончательную идентификацию культур по культурально-морфологическим, биохимическим тестам, чувствительности к антибиотикам и др.

Для выделения гемокультуры стафилококков посев крови в са­харном бульоне выдерживают при 37 °С в течение 18 — 24 ч. Стафи­лококк вызывает равномерное помутнение среды. На 2й день (или позже, в зависимости от темпов размножения) из бульонной куль­туры готовят и микроскопируют окрашенные по Граму мазки, затем пересевают ее на скошенный МПА и в чашку с кровяным агаром для выявления гемолитической активности. На 3й день получают культуру на скошенном агаре и изучают так же, как культуру, выделенную из гноя или других материалов.

Для посева экссудата, гноя из невскрывшихся абсцессов, флег­мон используют МПА или 5%й кровяной агар, инкубируют при 37 °С в течение 18 — 24 ч, выделяют чистую культуру и проводят ее идентификацию вышеописанными методами.

При пищевых отравлениях исследуемый материал микроскопи­руют, затем сеют в чашки с МПА и в бульон, содержащий 1 % глюкозы (для обогащения). Материал, загрязненный сопутствую­щей микрофлорой, засевают на кровяной агар, содержащий 6 — 7 % хлорида натрия. На такой среде подавляется рост энтеробактерий и бацилл, а стафилококки растут хорошо и проявляют гемо­литическую активность. Посевы инкубируют при 37 °С. На следу­ющий день изучают колонии, выделяют и, далее, идентифициру­ют чистые культуры. Стафилококки, вызывающие пищевые от­равления, образуют золотистый, реже белый пигмент, вызывают гемолиз и коагулируют плазму.

Стафилококки могут находиться в воздухе операционных пере­вязочных, родильных палат и других больничных помещений. Для их обнаружения делают посевы воздуха на желточно-солевой агар.

К 100 мл расплавленного МПА, содержащего 7,5 г хлорида натрия, добавляют 20 мл стерильной желточной взвеси, перемешивают и разли­вают в чашки. Для приготовления желточной взвеси желток куриного яйца асептически извлекают, отмывают от белка, помещают во флакон с бусами, добавляют 200 мл ИХН и встряхивают до полного смешива­ния; хранят в холодильнике.

Серологическое исследование.Для подтверждения стафилокок­ковой инфекции серодиагностика имеет вспомогательное значе­ние. Определение стафилококкового антитоксина в сыворотке крови при диагностике хронических стафилококковых инфекций (остеомиелит, септикопиемия и др.) имеет большее значение, так как бактериологические исследования, проводимые на фоне массивной антибиотикотерапии, как правило, остаются безрезуль­татными. Можно использовать РИГА с эритроцитарным стафило­кокковым диагностикумом (эритроциты нагружены атоксином стафилококка).

В основе другой реакции лежит метод подавления гемолити­ческой активности стафилококкового токсина антитоксином сы­воротки больного. Для этого к определенной дозе стафилококко­вого токсина прибавляют сыворотку больного, разведенную 1 : 5, 1:10, 1:15, 1 :20 и т.д., тщательно перемешивают и к смеси до­бавляют 0,05 мл эритроцитов кролика. Результаты реакции учиты­вают после инкубирования пробирок в течение 1 ч при темпера­туре 37 "С и такого же периода при комнатной температуре.

Количество сыворотки, в смеси с которым гемолиз слабый или не обнаруживается, считают ее титром.

У практически здоровых детей, так же как и у лиц, перенес­ших, например стафилококковую инфекцию кожи, титр стафи­лококкового антитоксина не превышает 0,5 — 4 АЕ/мл. У больных с хроническими стафилококковыми инфекциями титр, как пра­вило, выше.

Рис. Колонии стафилококка

Стафилококки полости рта.Отдел Firmicutes, семейство Micrococcaceae, род Staphylococcus. В род Staphylococcus по классификации Байрд— Паркер входят 3 вида: S. aureus, S. epidermidis и S. saprophyticus. Предложенные недавно другие классификации включают боль­шее количество видов стафилококков, но они используются пока только в научных исследованиях.

Все виды стафилококков представляют собой округлые клет­ки диаметром 0,5—1 мкм. В мазке располагаются обычно несим­метричными гроздьями («гроздья винограда»), но встречаются одиночные клетки, пары клеток. Грамположительны. Спор не об­разуют, жгутиков не имеют. У некоторых штаммов можно обна­ружить капсулу. Могут образовывать L-формы. Клеточная стенка содержит большое количество пептидогликана, связанных с ним тейхоевых кислот, протеин А.

Стафилококки хорошо растут на простых средах (рН 7,0—7,5); факультативные анаэробы. На плотных средах образуют гладкие круглые выпуклые колонии с различным пигментом. Пигмент не имеет таксономического значения. Могут расти на агаре с вы­соким содержанием (8—10 %) NaCl. Продуцируют сахаролитические и протеолитические ферменты. Стафилококки вырабаты­вают гемолизины, фибринолизин, фосфатазу, р-лактамазу, бактериоцинины, энтеротоксины, коагулазу, ДНК-азу, лейкоцидины, лецитовителлазу и др.

Стафилококки очень пластичны: быстро вырабатывают устой­чивость к антибактериальным препаратам. Существенную роль в этом играют плазмиды, передающиеся с помощью трансдуцирующих фагов от одной клетки к другой. R-плазмиды детерми­нируют устойчивость к одному или нескольким антибиотикам, в том числе и за счет экстрацеллюлярной продукции р-лактамазы — фермента, разрушающего пенициллин, разрывающего его р-лактамное кольцо.

Возбудителем стафилококковых инфекций чаще бывает S. aureus, несколько реже — S. epidermidis, очень редко — S. saprophyticus. Стафилококки являются представителями нор­мальной микрофлоры человеческого тела, поэтому микробиоло­гическая диагностика стафилококковых инфекций не может ог­раничиться выделением и идентификацией возбудителей; необ­ходимы количественные методы исследования, т. е. определение числа микроорганизмов в пробе.

Стафилококкив полости рта здорового человека встречаются в среднем в 30 % случаев. В зубном налете на деснах здоровых людей присутствуют в основном Stapf. epidermidis. Значительно чаще патогенные стафилококки локализуются на слизистой глотки и носа, обусловливая так называемое "здоровое бактерионосительство". Обладая ферментативной активностью, стафилококки принимают участие в расщеплении остатков пищи в полости рта. Такие постоянные носители патогенного стафилококка являются источником воздушно-капельной инфекции. Патогенные стафилококки, встречающиеся на слизистой носоглотки и в полости рта являются частой причиной аутоинфекции, вызывая различные гнойно-воспалительные процессы полости рта.

Лечение стафилококковых инфекций обычно проводят анти­биотиками и сульфаниламидными препаратами. В последние годы от больных часто выделяют стафилококки, резистентные к боль­шинству химиотерапевтических препаратов. В таких случаях для лечения используют антитоксическую противостафилококковую плазму или иммуноглобулин, полученные из крови доноров, им­мунизированных стафилококковым анатоксином. Для активной иммунизации (плановых хирургических больных, беременных женщин) может быть использован адсорбированный стафилокок­ковый анатоксин.

Рис. Колонии на гемин-агаре и морфология клеток Parph. Gingivalis.

Стрептококки

Относятся к семейству Streptococcaceae, роду Streptococcus.

Это грамположительные кокки, в мазках располагаются цепоч­ками или попарно. Являются факультативными анаэробами. Не растут на питательных средах. На кровяном агаре дают мелкоточечные беспигментные колонии, окруженные зоной гемолиза: а — зеленящий, прозрачный. Заболевание чаще вызывается гемолитическим стрептококком. В сахарном бульоне дают придонно-пристеночный рост, а сам бульон остается прозрачным. Растут при температуре 37 °С. Стрептококки способны расщеп­лять аминокислоты, белки, углеводы. По биохимическим свой­ствам выделяют 21 вид. Большинство из них условно-патогенные.

Наибольшее значение в развитии инфекционных заболеваний имеют:

1) S. pyogenus, возбудитель специфической стрептококковой
инфекции;

2) S. pneumonia, возбудитель пневмонии, может вызывать
ползучую язву роговицы, отиты, сепсис;

3) S. agalactia, может входить в состав нормальной микро­
флоры влагалища; инфицирование новорожденных приводит
к развитию у них сепсиса и менингита;

4) S. salivarius, S. mutans, S. mitis, входят в состав нормальной
микрофлоры полости рта; при дисбиозе ротовой полости явля­ются ведущими факторами в развитии кариеса.

Хотя многочисленные представители рода Streptococcus в нор­ме составляют значительную долю нормальной микрофлоры пищеварительного, дыхательного и генитального тракта, некоторые из них могут вызывать оппортунистические инфекции разной ло­кализации и тяжести: фарингиты, ангины, отиты, пневмонии, скарлатину и другие заболевания дыхательного тракта и ЛОР-органов; рожистое воспаление, флегмоны, нагноения ран и другие заболевания кожи и подкожной клетчатки; послеродовые гной­но-воспалительные осложнения, менингит, сепсис. Тяжелыми осложнениями стрептококковой инфекции являются ревматизм и гломерулонефрит.

При заболеваниях, вызванных стрептококками, материалом для исследования, в зависимости от локализации и формы инфек­ции, являются гной, кровь, отделяемое слизистой оболочки, моча, мокрота, спинномозговая жидкость, раневое отделяемое. Берут его так же, как при заболеваниях, вызванных стафилококками. При взятии материала из полости рта ополаскивание не проводят, а интервал после приема пищи должен быть не менее 2 ч. Если материал невозможно доставить в лабораторию в течение 2 ч, его помещают в транспортные среды или среду накопления (сахар­ный бульон, тиогликолевая среда).

Микроскопия.В мазках из гноя, отделяемого слизистой обо­лочки, окрашенных по Граму, стрептококки располагаются ко­роткими цепочками, иногда в виде диплококков или единичных кокков. В последнем случае стрепто­кокки нельзя отличить от стафилококков, поэтому для более де­тального изучения обнаруженных кокков обязательно проводят бактериологическое исследование. Это необходимо и для правильного выбора препаратов этиотропного лечения. В качестве эксп­ресс-диагностики иногда стрептококки определяют в нативном материале методом иммунофлюоресценции.

Бактериологическое исследование.Гной, отделяемое слизистой оболочки, мочу, мокроту, спинномозговую жидкость сеют в чашку Петри с 5%м кровяным агаром (лучше использовать дефибринированную баранью кровь) и в пробирку с сахарным бульоном. Для выделения стрептококков из контаминированного материала используют селективные среды (в кровяной агар и среду накопле­ния вводят антибиотики — колистин, налидиксовую кислоту, ко­торые подавляют рост сопутствующих микроорганизмов). Хотя стрептококки дают рост на воздухе, посевы лучше инкубировать в анаэробной атмосфере при 37 "С. Инкубация в атмосфере СО₂ стимулирует рост бетагемолитических стрептококков, не относящихся к группе А. С этими целями применяют анаэростат или эксикатор с горящей свечой.

Через 24 — 48 чизучают колонии и рост в сахарном бульоне. В сахарном бульоне большинство пиогенных стрептококков дает придонный или пристеночный рост в виде хлопьев или зерен, вся среда остается прозрачной, другие стрептококки могут давать ин­тенсивное помутнение среды с образованием компактного осадка. На плотных средах Streptococcus pyogenes растет с образованием нескольких типов колоний: мелких, плоских, суховатых колоний зернистой структуры (вирулентные штаммы, содержащие Мпротеин); относительно крупных, блестящих, вязких с ровным кра­ем (вирулентные, содержащие капсулу). По росту на кровяных средах выделяют три группы стрептококков: гемолитические (вы­зывают полный гемолиз эритроцитов с обесцвечиванием и про­светлением среды вокруг колоний), агемолитические (вызывают неполный гемолиз с формированием зеленоватой зоны вокруг ко­лоний, обусловленной образованием метгемоглобина) и негемо­литические (среда вокруг колоний не изменена). «Зеленящие» стреп­тококки образуют блестящие или матовые мелкие колонии серо­ватого цвета. Негемолитические стрептококки, как правило, не имеют клинического значения. В окрашенных мазках из колоний стрептококков не отмечается типичного расположения кокков в виде цепочек. Клетки распола­гаются одиночно, попарно или небольшими скоплениями. В маз­ке из культуры в жидкой среде обнаруживают типичные цепочки стрептококков.

Подозрительные колонии пересевают на кровяной агар или в бульонную среду для накопления чистой культуры и ее дальней­шей идентификации. В ходе идентификации учитывают культурально-морфологические особенности культуры, ставят каталазный тест, определяют группу, вид и серовар стрептококка.

Группы стрептококка классифицируют по наличию полисахаридного антигена, для выявления которого используют реакцию преципитации с групповыми сыворотками {А, В, Си т.д.). Подав­ляющее большинство стрептококков группы А относятся к виду S. pyogenes, поэтому нередко данные названия используют как си­нонимы. Для быстрого определения группы стрептококка приме­няют реакцию латексагглютинации или коагглютинации с диагностикумами, «нагруженными» антителами соответствующих групповых сывороток (реакцию ставят с антигенными экстракта­ми из исследуемого материала или культур на различных этапах бактериологического исследования). Большинство клинически зна­чимых стрептококков относится к группе А.

Чувствительность стрептококков к антибиотикам во многом прогнозируема, однако появляются сообщения об устойчивости некоторых штаммов, в частности, к пенициллинам, поэтому у выделенной культуры проверяют чувствительность к антимикроб­ным препаратам.

Исследование крови. Посев крови в сахарный бульон или специ­альную среду для выделения гемокультур стафилококков произ­водят так же, как при стафилококковых заболеваниях. При нали­чии стрептококка на дне флакона появляется хлопьевидный при­донный осадок. В мазках обнаруживаются длинные цепочки стреп­тококков. Микроскопия позволяет дать предварительный ответ о наличии или отсутствии стрептококка. Для выделения чистой куль­туры и определения характера гемолиза делают пересев в чашку с кровяным агаром. Через сутки (3й день исследования) появляют­ся типичные мелкие колонии, окруженные зоной гемолиза. Даль­нейшие этапы исследования описаны выше.

Для диагностики скарлатины, как правило, лабораторные ис­следования не применяют. В отдельных случаях высевают отделяе­мое слизистой оболочки зева и выделяют стрептококки различ­ных серогрупп.

Серологическое исследование.Серодиагностику стрептококко­вых инфекций проводят у больных хронически текущими заболе­ваниями, леченных большими дозами антибиотиков и сульфани­ламидных препаратов, т. е. когда выделение возбудителя бактери­ологическими методами представляет большие трудности, а так­же при оценке активности ревматического процесса, выявлении микробоносительства. Она предусматривает определение в крови специфических стрептококковых антител к токсинам, в частно­сти к стрептолизину О и гиалуронидазе.

Стрептококкиявляются основными обитателями полости рта. В 1 мл слюны содержится до 10⁸ - 10⁹ стрептококков. Тем не менее, в пробах слюны их примерно в 2 раза больше, чем в материале из бляшки или десневого желобка. Наиболее значительной группой стрептококков полости рта следует считать микроаэрофильные а-гемолитические ("зеленящие") стрептококки и негемолитические формы. Следует отметить, что от 40 - 90 % штаммов вида milled могут быть В-гемолитическими, которые принимают активное участие в процессах, приводящих к поражениям твердых тканей зуба и пародонта. В эту группу входят Streptococcus mutants, S. sanguis, S. mitis, S. salivarium. Они отличаются друг от друга по способности ферментировать углеводы и образовывать перекись водорода.

Сдвиг рН в кислую сторону приводит к декальцинации зубной эмали. Особо следует подчеркнуть высокие способности микроаэрофильных стрептококков к аггрегации с другими бактериями, которые показаны, в частности, в отношении актиномицетов, фузобактерий, лактобактерий. Все это способствует обнаружению данных видов в составе ассоциаций возбудителей при различных гнойно-воспалительных процессах в челюстно-лицевой области. Но особенно значительна их роль в развитии кариеса. Ведущее место в этом плане занимают два вида, активно продуцирующие из углеводов пищи молочную и другие кислоты на эмали -S. mutans и S. sanguis.

Все виды стрептококков плохо растут и погибают на простых питательных средах, т.к. в процессе роста и размножения стрептококки выделяют много перекиси водорода, которая действует на них губительно, т.к. они не продуцируют каталазу. Для создания оптимальных условий роста к питательной среде обычно добавляют кровь, в которой содержится каталаза, разрушающая перекись водорода. На кровяных средах стрептококки хорошо растут в аэробных условиях, при этом одни из них образуют на кровяном агаре колонии, окруженные зоной полного гемолиза (это гемолитические (В) стрептококки), другие окружены зоной зеленоватого цвета (зеленые стрептококки), у третьих (у) гемолиз отсутствует (негемолитические стрептококки).

Стрептококки выделяют экзотоксин и ферменты агрессии. Во внешней среде менее устойчивы, чем стафилококки. Большинство чувствительны к пенициллину и другим антибиотикам. По антигенной структуре все стрептококки делят на 17 серологических групп (A,B,C,D, .... и до S), чаше других в полости рта обнаруживаются стрептококки групп А, С, D, F, G, Н и О.

Рис. Колонии стрептококка.

Стрептококки полости рта.Отдел Firmicutes, семейство Streptococcaceae, род Streptococcus. В род Streptococcus входят более 20 видов, среди которых есть представители нормальной микрофлоры человечес­кого тела и полости рта, а также возбудители тяжелых инфекционных эпидемических заболеваний человека.

Стрептококки — мелкие (меньше 1 мкм) шаровидные клет­ки, располагающиеся цепочками или попарно, грамположитель­ны, спор не образуют, неподвижны. Большинство штаммов стрептококков образуют капсулу, состоящую из гиалуроновой кислоты. Клеточная стенка содержит белки (М-, Т- и R-антигены), углеводы (группоспецифические) и пептидогликаны. Легко переходят в L-формы.

Генетический обмен возможен за счет трансформации и трансдукции, но не конъюгации. Устойчивость к антибиотикам выра­батывается медленно.

Стрептококки группы А вырабатывают более 20 внеклеточ­ных веществ, обладающих антигенной активностью. Наибольшее значение в патогенезе стрептококковых инфекций имеют:

· стрептокиназа (фибринолизин) — протеолитический фермент, расщепляющий фибрин и другие белки;

· ДНК-аза — фермент, деполимеризующий ДНК. Смесь ДНК-азы и фибринолизина способна разжижать экссудаты, лизировать венозные тромбы, поэтому может быть использована для уда­ления гноя и некротизированных тканей из раны;

· гиалуронидаза — фермент агрессии, разрушающий гиалуроновую кислоту, входящую в состав соединительной ткани («фактор проницаемости»);

· эритрогенин — токсин, продуцируемый р-гемолитическими стрептококками группы А, способными вызывать скарлатину. Выделяется только лизогенными культурами.

Стандартизованный разведенный эритрогенин используют при постановке внутрикожной пробы (проба Дика) для выявления чувствительности к этому токсину (восприимчивость к скарла­тине).

Стрептококкиявляются основными обитателями полости рта. В 1 мл слюны содержится до 10⁸ - 10⁹ стрептококков. Тем не менее, в пробах слюны их примерно в 2 раза больше, чем в материале из бляшки или десневого желобка. Наиболее значительной группой стрептококков полости рта следует считать микроаэрофильные а-гемолитические ("зеленящие") стрептококки и негемолитические формы. Следует отметить, что от 40 - 90 % штаммов вида milled могут быть В-гемолитическими, которые принимают активное участие в процессах, приводящих к поражениям твердых тканей зуба и пародонта. В эту группу входят Streptococcus mutants, S. sanguis, S. mitis, S. salivarium. Они отличаются друг от друга по способности ферментировать углеводы и образовывать перекись водорода.

Сдвиг рН в кислую сторону приводит к декальцинации зубной эмали. Особо следует подчеркнуть высокие способности микроаэрофильных стрептококков к аггрегации с другими бактериями, которые показаны, в частности, в отношении актиномицетов, фузобактерий, лактобактерий. Все это способствует обнаружению данных видов в составе ассоциаций возбудителей при различных гнойно-воспалительных процессах в челюстно-лицевой области. Но особенно значительна их роль в развитии кариеса. Ведущее место в этом плане занимают два вида, активно продуцирующие из углеводов пищи молочную и другие кислоты на эмали -S. mutans и S. sanguis.

Все виды стрептококков плохо растут и погибают на простых питательных средах, т.к. в процессе роста и размножения стрептококки выделяют много перекиси водорода, которая действует на них губительно, т.к. они не продуцируют каталазу. Для создания оптимальных условий роста к питательной среде обычно добавляют кровь, в которой содержится каталаза, разрушающая перекись водорода. На кровяных средах стрептококки хорошо растут в аэробных условиях, при этом одни из них образуют на кровяном агаре колонии, окруженные зоной полного гемолиза (это гемолитические (В) стрептококки), другие окружены зоной зеленоватого цвета (зеленые стрептококки), у третьих (у) гемолиз отсутствует (негемолитические стрептококки).

Стрептококки выделяют экзотоксин и ферменты агрессии. Во внешней среде менее устойчивы, чем стафилококки. Большинство чувствительны к пенициллину и другим антибиотикам. По антигенной структуре все стрептококки делят на 17 серологических групп (A,B,C,D, .... и до S), чаше других в полости рта обнаруживаются стрептококки групп А, С, D, F, G, Н и О.

Рис. Колонии на гемин-агаре и морфология клеток Prev. Intermedia.

Ситуационные задачи:

1. При микроскопическом исследовании отделяемого фурункула выделен S. аureus. К какой группе представителей нормальной микрофлоры кожи относится этот микроорганизм?

2. ПРИ ПРОВЕДЕНИИ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ СТАФИЛОКОККИ ВЫРАЩИВАЮТ:

1) МПБ или МПА;

2) молочно-солевой агар

3) желчный бульон

4) кровяной агар

5) сахарный агар или бульон

6) желчно-солевой агар

3. Какая среда является селективной для стрептококков? Что обеспечивает селективность этой среды?

4. Каковы особенности строения клеточной стенки стафилококков и стрптококков по сравнению со строением клеточной стенки грамотрицательных бактерий?

5. Какие ферменты патогенности продуцируют стафилококки? Какова их роль в патогенезе инфекции?

6. Какие клетки, кроме эритроцитов, может повреждать ₤ - токсин?

7. Чем объясняют кардиотоксический, дерматотоксический и нейротоксический эффекты α - токсина?