ТЕМА: «Дифтерийная палочка. Бордетеллы»
ЦЕЛЬ: изучение биологических свойств возбудителя дифтерии, коклюша, паракоклюша, патогенеза вызываемых ими заболеваний, принципов их микробиологической диагностики, профилактики и терапии.
ПЛАН ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ:
| № | Содержание занятия | Литература по теме |
| Таксономия и история открытия возбудителей дифтерии, коклюша и паракоклюша. | 1.Лекция «Возбудители дифтерии и коклюша» | |
| Биологические свойства свойства возбудителей | 2.В.Д.Тимаков, учебник, 1994, с.314-317, 340-344 | |
| Эпидемиология, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение | 3.Л.Б.Борисов, учебник, 1994, с.297-299, 307-311 | |
| Практическая работа | 4.Л.Б.Борисов, практикум, 1993, с.160-163, 171-175 5.Л.Б.Борисов, практикум, 1984, с.160-163, 171-175 6.М.П.Зыков,практикум, 1977, с.165-170, 224-231 |
ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ:
Дифтерия – острое инфекционное заболевание, характеризующееся токсическим поражением сердечно-сосудистой и нервной систем а также фибринозным воспалением в месте входных ворот.
Коклюш – инфекционное заболевание, характеризующееся острым катарральным воспалением верхних дыхательных путей и приступами спазматического кашля.
1.Таксономия и история открытия возбудителей дифтерии, коклюша и паракоклюша.
1.1.Таксономия
| Таксономическая единица | Возбудители | |
| дифтерии | коклюша | |
| Род | Corinebacterium | Bordetella |
| Вид | Corinebacterium diphteriae | B.pertussis B.parapertussis B.bronchiseptica |
1.2.История открытия возбудителей дифтерии, коклюша.
Возбудитель дифтерии открыт и выделен Клебсом Е. и Леффлером Ф. В 1883-84 гг. Коклюшная палочка выделена от больного ребенка в 1906 году Ж.Борде и О.Жангу
2.Биологические свойства возбудителей
| Признаки | Возбудители | ||
| дифтерии | коклюша | паракоклюша | |
| А.Морфология | |||
| Форма | Палочки | Овоидные палочки | Овоидные палочки |
| Капсула | Микрокапсула | Нежная капсула | Не образует |
| Жгутики | Не имеет | Не имеет | Не имеет |
| Споры | Не образует | Не образует | Не образует |
| Б.Тинкториальные свойства | |||
| Окраска по Граму | Грам(+) | Грам(-) | Грам(-) |
| Специальные методы окраски | По Нейссеру (выявляются зерна волютина) | ||
| В.Культуральные свойства | |||
| Тип дыхания | аэробы | аэробы | аэробы |
| Специальные питательные среды | Клауберга, Тинсдаля, Ру, Леффлера | Борде-Жангу, КУЛ | МПА |
| рН среды, температура | 7,3-7,8 37оС | 6,8-7,4 37оС | 6,8-7,4 37оС |
| Г.Антигены | О, К | 1-видовой,2,3,4,5,6 - типоспецифические | Всего 14; 8, 9, 10 - типоспецифические |
| Д.Факторы патогенности | |||
| Токсины | Экзотоксин (гистотоксин) | Термолабильный гистотоксин | |
| Ферменты | Лейкоцидин Нейраминидаза Гиалуронидаза Фибринолизин | Лецитиназа Плазмокоагулаза Гиалуронидаза | |
| Структурные и химические компоненты | Микрокапсула Корд-фактор | Капсула Ворсинки |
2.2.В зависимости от совокупности культурально-биохимических свойств вид Corinebacterium diphteriae разделяется на 2 биовара – gravis и mitis.
3.Эпидемиология, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика
| Признаки | Возбудители | |
| дифтерии | коклюша | |
| А.Эпидемиология | ||
| Источник | Больной, бактерионоситель | Больной, реже- бактерионоситель |
| Механизм заражения | аэрогенный | аэрогенный |
| Пути передачи | Воздушно-капельный,капельный, алиментарный | Воздушно-капельный |
| Б.Вызываемые заболевания | дифтерия | коклюш |
| В.Постинфекционный иммунитет | Стойкий, напряженный, антитоксический, антимикробный | Стойкий, напряженный, типоспецифический |
| Г.Основной метод диагностики | бактериологический | бактериологический |
| Д.Специфическая профилактика | Вакцины АДС, АКДС, АДС-М, АД-анатоксин | Вакцина АКДС |
| Е.Специфическое лечение | Сыворотка противодифтерийная антитоксическая | Противококлюшный Иммуноглобулин Плазма иммунизированных доноров |
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА
Задание №1. Бактериологическое исследование остатков пищи, явившихся причиной отравления(2 этап, см.протокол №2)
Задание №2. Микроскопия демонстрационного мазка дифтерийной палочки, окраска по Нейссеру, зарисовать
Задание №3 Микроскопия демонстрационного мазкакоклюшной палочки, окраска по Граму, зарисовать.
ЗАНЯТИЕ № 9
ТЕМА:«Возбудители туберкулеза, микобактериозов, лепры. Сибирязвенная палочка»
ЦЕЛЬ: изучить основные биологические свойтсва микобактерий и сибирязвенной палочки, особенности вызываемых ими заболеваний с микробиологической диагностикой, профилактикой и лечением
ПЛАН ЗАНЯТИЯ
| № | Содержание занятия | Литература по теме |
| Общая характеристика микобактерий | 1.Лекция «Микобактерии –возбудители туберкулеза и лепры», «Возбудители зоонозов» | |
| Таксономия и история открытия возбудителей туберкулеза, лепры и сибирской язвы | 2.В.Д.Тимаков, учебнтк, 1983, с.318-322,348-354 | |
| Биологические свойства возбудителей | 3.Л.Б.Борисов, учебник, 1994, с.305-307, 311-318 | |
| Эпидемиология, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение | 4.Л.Б.Борисов, практикум,1993, с.191-196, 205-207 | |
| Практическая работа | 5.Л.Б.Борисов,практикум, 1984, с.163-169, 208-215 6.М.П.Зыков, практикум, 1977,с.174-181, 231-237 |
ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ
Туберкулез – инфекционное заболевание, вызываемое микобактериями и характеризуется чаще всего хроническим течением, многообразтем клинических проявлений и поражений различных органов, главным образом, дыхательной системы.
Лепра (проказа) – хроническое инфекционное заболевание, характеризующеесяпоражением кожи, слизистых оболочек, периферической нервнойсистемы и внутренних органов.
Сибирская язва – острое инфекционное заболевание, характеризующееся тяжелой интоксикацией, лихорадкой и протекающее в виде кожной, легочной икишечной формах.
1.Общая характеристика микобактерий:
а) высокое содержание липидов и миколовой кислоты;
б) склонность к ветвлению (актиномицеты, подобие грибов);
в) устойчивость к действию кислот, щелочей, спирта;
г) плохо окрашиваютсмя анилиновыми красителями;
д) медленно растут на питательных средах.
Микобактериозы – заболевания вызываемые микобактериями,кроме туберкулеза и лепры.
2.История открытия возбудителей туберкулеза и сибирской язвы.
В 1882 году Роберт Кох открыл туберклезную палочку. Возбудитель сибирской язвы открыт в 1849 году Полендером,чистая культура получена в 1876 году Кохом.
3.Биологические свойства возбудителей туберкулеза и сибирской язвы
| Признаки | Возбудители | |
| туберкулеза | сибирской язвы | |
| А.Таксономия | ||
| Порядок | Actinomecitales | |
| Семейство | Mycobacteriaceae | Bacillaceae |
| Род | Mycobacterium | Bacillus |
| Вид | M.tuberculosis M.bovis M.africanus | Bacillum antracis |
| Б.Морфология | ||
| Форма | Полиморфные палочки | Палочки с обрубленными концами |
| Капсула | микрокапсула | имеется |
| Жгутики | нет | нет |
| Споры | Не образуют | Центрально расположены |
| В.Тинкториальные свойства | ||
| Окраска по Граму | Грам(+) | Грам (+) |
| Специальные методы окраски | По Цилю-Нильссену | По Ожешке |
| Г.Культуральные свойства | ||
| Тип дыхания | аэробы | Факультативные анаэробы |
| Питательные среды | Левенштейна-Иерсена, Петраньяни | МПА, МПБ |
| рН среды, температура | 6,8-7,2 | 7,2-7,6 |
| Д.Антигены | Белковые, полисахаридные | О-соматический (ПСХ), Термостабильный, К-белковый (протективный) |
| Е.Факторы патогенности | ||
| Токсины | Экзотоксин | |
| Ферменты | Лецитиназа, миколовая кислота | Протеаза |
| Структурные и химические компоненты | Корд-фактор, ПСХ, фосфолипиды, воск, туберкулопротеиды | капсула |
3.2.На искусственных питательных средах микобактерии лепры не культивируются.
3.3.Антигенная структура микобактерий лепры:
а) термостабильный антиген – полисахаридной природы;
б) антиген термолабильный белковый (высоко специфичен для лепрозных палочек)
4.Эпидемиология, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение.
| Признаки | Возбудители | |
| туберкулеза | сибирской язвы | |
| А.Эпидемиология: | ||
| Источник | Больной человек, животные, птицы | Крупный имелкий рогатый скот, свиньи, олени, ослы |
| Пути передачи | Контактынй, бытовой, воздушно-капельный | Контактный, аэрогенный |
| Б.Вызываемые заболевания | туберкулез | сибирская язва |
| В.Постинфекционный иммунитет | Нестерильный, клеточный | Наряженный, длительный, антимикробный и антитоксический |
| Г.Основной метод диагностики | Бактериологический | Бактериологический |
| Д.Специфическая профилактика | Вакцина БЦЖ | Живая сухая вакцина, |
| Е.Специфическое лечение | Противосибирязвенная сыворотка, иммуноглобулин (доноские и гетерогенные) |
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА
Задание№1.Бактериологическое исследование остатков пищи, послужившей причиной отравления (3 этап,см.протокол №2)
Задание №2.Микроскопия демонстрационного мазка измокроты больного туберкулезом,окраска по Цилю-Нильссену, зарисовать.
Задание №3.Микроскопия демонстрационного мазка из культуры сибирязвенной палочки, окраска по Граму, зарисовать.
Задание №4.Постановка реакции кольпреципитации по Асколи.
Компоненты:
1.Исследуемый антиген.
2. Преципитирующая противосибирязвенная сыворотка.
Этапы выполнения теста.
1.В узкую преципитационную пробирку вносят 0,3 мл преципитирующей сыворотки.
2.Осторожно наслаивают равное количество преципитиногена.
Результат на границе 2 сред образуются кольцо преципитации
Вывод реакция Асколи положительная, следовательно исследуемый материал (экстракт из шкуры животного) содержит специфический антиген, свойственный возбудителю сибирской язвы.
ЗАНЯТИЕ № 10
ТЕМА: «Возбудители зоонозных инфекций: чумы, псевдотуберкулеза, туляремии и бруцеллеза»
ЦЕЛЬ: изучить основные биологические свойства возбудителей зоонозных инфекций, их роль в патологии, диагностику, специфическую профилактику и лечение этих инфекционных заболеваний.
ПЛАН:
| № | Содержание занятия | Литература по теме |
| Понятие о зоонозах | 1.Лекция «Возбудители зоонозов: чумы, туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы» | |
| Основные биологические свойства возбудителей | 2.Л.Б.Борисов, учебник, 1994, с.288-290 | |
| Эпидемиология, патогенез, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение | 3.В.Д.Тимаков,учебник, 1983, с.293-297 | |
| Практическая работа | 4.Л.Б.Борисов, практикум, 1984, с.198-208 5.М.П.Зыков, практикум, 1977, с.174-186 |
ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ:
Чума – острое инфекционное заболевание,характеризующеесятяжелой общей интоксикацией, поражением лимфатической системы с тенденцией к эпидемическому и пандемическому распространению.
Псевдотуберкулез – острое инфекционное заболевание, характеризующееся циклическим течением, интоксикацией, поражением органов желудочно-кишечного тракта, суставов конечностей и общей аллергической реакцией
Бруцеллез – инфекционно-аллергическое заболевание, характеризующееся длительной лихорадкой, поражением опроно-двигательного аппарата, нервной, сердечно-сосудистой, моче-половой и други систем организма. Имеет склонность к затяжному хроническому течению.
Туляремия – острое инфекционное заболевание с природной очаговостью. Характеризуется лихорадкой, образованием лимфаденитов и поражением различных органов (глаз, легких, желудочно-кишечного тракта и других).
1.Понятие о зоонозах.
1.1.Зоонозы – это инфекциооные заболевания,при которых источниками инфекции служат дикие и домашние животные и птицы.
1.2.К зоонозным инфекциям относят чуму, туляремию, бруцеллез, псевдотуберкулез,сибирскую язву, лептоспироз и другие.
1.3.Особенности зоонозных инфекций:
а)человек не является биологическим хозяином возбудителя;
б)как правило, отстутствует передача возбудилея от больного человека здоровому или от больного животным;
в)появлению зоонозов у людей, как правило, предшествуют эпизоотии среди животных.
2.Основные биологические свойства возбудителей
| Признаки | Возбудители | |
| чумы | псевдотуберкулеза | |
| А.Таксономические свойства | ||
| Семейство | Enterobacteriaceae | Enterobacteriaceae |
| Триба | Jersiniae | Jersiniae |
| Род | Jersinia | Jersinia |
| Вид | J.pestis | J.pseudotuberculosis |
| Б.Морфология и тинкториальные свойства | ||
| Форма | палочковидная | палочковидная |
| Капсула | образуют | Не образуют |
| Жгутики | Не имеют | Имеют |
| Споры | Не образуют | Не образуют |
| Окраска по Граму | Грам(-) | Грам(-) |
| В.Культуральные свойства | ||
| Тип дыхания | Факультативный анаэроб | Факультативный анаэроб |
| Питательные среды | МПА, МПБ, агар Хоттингера | |
| рН среды, темпаратура | 6,4-7,2 28оС | 6,0 – 8,0 25-28оС |
| Г.Антигены | F1, VW, OCA, T, J | О, Н |
| Д.Факторы патогенности | ||
| Токсины | Мышиный токсин | Энтеротоксин |
| Ферменты | гемолизин, фибринолизин, коагулаза и другие | гиалуронидаза, нейраминидаза |
| Структурные и химические компоненты | Капсула, пестицины, антигены F1,VW |
2.2.Биологические свойства возбудителей бруцеллеза и туляремии
| Признаки | Возбудители | |
| бруцеллеза | туляремии | |
| А.Таксономия | ||
| Семейство | ||
| Род | Brucella | Brucella |
| Вид | B.melitenses B.abortus B.suis | Francisella tularensis |
| Б.Морфология и тинкториальные свойства | ||
| Форма | палочковидная | палочковидная |
| Капсула | образует | образует |
| Жгутики | не имеет | не имеет |
| Споры | не образует | не образует |
| Окраска по Граму | Грам(-) | Грам(-) |
| Специальные методы окраски | По Романовскому-Гимзе | |
| В.Культуральные свойства | ||
| Тип дыхания | аэробы | аэробы |
| Питательные среды | печеночные, сывороточные, кровяной агар | Мак-Коя, кровяной агар |
| рН, температура | 6,8-7,0 37оС | 6,8-7,3 37оС |
| Г.Антигены | A, M, V, G, R | O, Vi |
| Д.Факторы патогенности | ||
| Токсины | эндоктоксин | эндоктоксин |
| ферменты | Гиалуронидаза Нейраминидаза | |
| Структурные и химические компоненты бактериальной клетки | капсула | капсула |
3.Эпидемиология, патогенез, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение
3.1.Эпидемиология, патогенез, постинфекционный иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение чумы и псевдотуберкулеза.
| Признаки | Возбудители | |
| чумы | псевдотуберкулеза | |
| А.Эпидемиология | ||
| Переносчики | Грызуны, домашние животные | Грызуны, животные |
| Пути передачи | Трансмиссивный, алиментарный, контактный | Алиментарный, водный |
| Б.Постинфекционный иммунитет | Стойкий, напряженный, продолжительный | Не изучен |
| В.Основной метод диагностики | Бактериологический | Бактериологический |
| Г.Специфическая профилактика | Корпускулярные, химические вакцины EV | Не разработана |
3.2.Эпидемиология, патогенез, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение бруцеллеза и туляремии.
| Признаки | Возбудители | |
| бруцеллеза | туляремии | |
| А.Эпидемиология | ||
| Источник | Домашние и дикие животные | Грызуны, хищные животные |
| Пути передачи | Алиментарный, контактный | Алиментарный, контактный трансмиссивный |
| Б.Постинфекционный иммунитет | Нестерильный | Стойкий, напряженный |
| В.Основной метод диагностики | Бактериологический | Серологический |
| Г.Специфическая профилактика | Вакцина Вершакова | Вакцина Эберта-Гайского |
| Д.Специфическая терапия | Иммуноглобулин, убитая бруцеллезная вакцина |
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА
Задание №1.4-й этап бактериологического исследования остатков пищи, послуживших причиной отравления. Учет результатов, заключение (см.протокол №2).
Задание №2. Постановка и учет реакции Хеддельсона и Райта при подозрении на бруцеллез.
А)реакция Хеддельсона
| Компоненты (в мл) | Номер квадрата | |||||
| 1.Испытуемая сыворотка (неразведенная) | 0,04 | 0,02 | 0,01 | 0,02 | - | № больного |
| 2.Неразведенный бруцеллезный диагностикум | 0,03 | 0,03 | 0,03 | - | 0,03 | |
| 3.Физиологический раствор | - | - | - | 0,03 | 0,03 |
Заключение: реакция положительная в объеме сыворотки 0,01 мл
Б)реакция Райта
| Компоненты в мл | Номера пробирок | ||||||
| 6(КД) | 7(КС) | ||||||
| 1.Физ.раствор | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| 2.Исследуемая сыворотка, разведена 1:25 | 0,5 | 0,5 из 1 пробирки | 0,5 из 2 пробирки | 0,5 из 3 пробирки | 0,5 из 4 пробирки | 0,5 | |
| Разведения сыворотки | 1:50 | 1:100 | 1:200 | 1:400 | 1:800 | ||
| Бруцеллезный диагностикум | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | |
| Результаты | 4+ | 4+ | 3+ | 2+ |
Учет результатов на следующем занятии: последнее разведение, вызывающее реакцию, положительную на 3+ составляет 1:200. Реакция Райта положительна в титре 200.
Задание №3 Микроскопия и зарисовка демонстрационных препаратов возбудителя чумы.
ЗАНЯТИЕ № 11