Белоксинтезирующая система бактерий.
Это рибонуклеопротеидные частицы – рибосомы. В свободном состоянии рибосома наход-ся в виде 2-х субъединиц – 30S и 50S. Обе субъединицы содержат ~по 40% РНК и 60% белка. Субъединица 30S содержит 1 молекулу РНК 16S и 21 молекулу белка. Субъединица 50S содержит 2 молекулы РНК 5S и 23S и 33-34 молекулы белка. Перед началом синтеза белка в бактер/клетке происходит объединение обеих субъединиц с образованием 70S рибосом. Рибосомы с помощью информационной РНК образуют полисомы, обычно связанные с цитоплазматич мембраной.
4. Фазово-контрастная микроскопия.
Позволяет изучать живые и неокрашенные объекты. Метод связан с изменением условий освещения при наблюдении слабоконтрастных биологич объектов в неокрашенном состоянии с целью их визуализации. В отличие от метода тёмного поля, выявляющего только контуры объекта, метод фазового контраста позволяет увидеть элементы внутр структуры прозрачного объекта. Фазово-контрастное устройство даёт возможность преобразовывать фазовые изменения световых волн, проходящих через объект, в амплитудные. В рез-те прозрачные микроорг-мы становятся видимыми.
Различают: (+) фазовый контраст (изображение темнее фона) и (-) фазовый контраст (изображение светлее фона). Отличит особ-ть в изображении – эффект «гало» по контуру объекта (небольшое просветлённое поле вокруг объекта).
Темнопольная микроскопия.
Позволяет наблюдать живые бактерии. Метод тёмного поля основан на эффекте, кот-й достигается освещением объекта полым конусом света. Выявляются контуры объекта. При отсутствии объекта поле зрения микроскопа – тёмное, при наличии объекта – яркое блестящее свечение контура вокруг объекта на тёмном фоне. Метод предложен в 1903 г.
6. Основные отличия прокариотов от эукариотов.
Прокариоты:
· Нет мембран, кот-ми органеллы отделяются от цитоплазмы. Мембрана есть только цитоплазматическая, отделяющая цитоплазму от клет/оболочки или от внешней среды.
· Размер 1-10 мкм (у эукариотов 10-100 мкм).
· Анаэробное дыхание возможно. Фиксация азота возможна.
· Генетич материал наход-ся в кольцевой молекуле ДНК, у эукариотов – в хромосоме.
· Гистонов нет, у эукариотов – есть.
· Рибосомы не объединены в ЭПС.
· Ядро (нуклеоид) имеет фибриальную структуру и не имеет ядерной мембраны.
· Нет митохондрий, хлоропластов, комплекса Гольджи.
· Окислительно-восстановительные ферменты локализованы в мезосомах.
· Не делятся митозом, тип деления – бинарный.
· Нет клеточного центра.
· Нет внутриклеточного перемещения цитоплазмы и амёбовидного движения.
7. Основные типы культур бактерий.
Для изучения св-в микроорг-мов, их систематизации необходимо изолировать бактерии и вырастить их в виде «чистых культур» - массы клеток, состоящей из микроорг-мов 1 вида и полученных как потомство 1 клетки. Штамм – культура бактерий 1 вида, выделенная из разных источников в разное время. Вид – совокупность микроорг-мов, имеющих единое происхождение и генотип, сходных по морфологич и биологич св-вам. Колония – это «чистая культура», популяция микробных клеток 1вида, сформировавшаяся в рез-те деления 1 микробной клетки в условиях культивирования на плотной питат среде при оптимальной t. Различают 3 типа колоний: гладкие – S-тип (круглые, выпуклые, с гладкой поверхностью, влажной консистенцией), шероховатые – R-тип (шероховатые, края неправильные, консистенция сухая), слизистые – М-тип (тягучая консистенция).
8. Признаки идентификации микроорганизмов.
Фенотипич признаки – величина, форма, агрегация (образование нитей, тетрад, пакетов), наличие капсулы, эндоспор, жгутиков, пигментов и способность окрашиваться красителями. Все бактерии по отношению к окраске по Граму делятся на грам(+) – фиолетового цвета и грам(-) – красного. Способность окрашиваться зависит от хим/состава. У грам(+) в клет/стенке нет ароматических и серосодержащих аминок-т, мало липидов, у грам(-) – наоборот. У грам(+) есть магниевая соль РНК, у грам(-) – нет. Эта соль образует прочный хим комплекс с белком, йодом и генцианвиолетом, кот-й не разруш-ся спиртом. У грам(-) такого комплекса нет, они легко обесцвеч-ся под д-ем спирта.
Споры по Граму не окраш-ся, окраска появл-ся только после использования концентрированной подогретой краски. Причём при последующей обработке к-той спора не обесцвеч-ся. Кислотоустойчивые бактерии – для окраски применяют метод Циля-Нильсена. Морфология бактерий (культуры) изучается в окрашенных мазках либо в нативных препаратах.
Подвижность – скользящие (за счет волнообразных движений тела) и плавающие (за счет жгутиков или ресничек) бактерии.
Спорообразование.
Физиологич активность– по способу питания (по отношению к О2 – анаэробные, аэробные и факультативные – получают энергию либо в процессе дыхания, либо при брожении).
Биохимич признаки культуры - по её способности ферментировать углеводы, образовывать индол, аммиак, сероводород, гидролизовать белки.
Антигенные св-ва – родоспецифичные, видоспецифичные, штаммоспецифичные.
Чувствительность к бактериофагам.
Химический состав.
Генетич родство – способность обмениваться генетич информацией, состав ДНК, сходство нуклеиновых к-т и их последовательности.
9. Определение методов микробиологической диагностики.