Treponemapallidum (окраска по Романовскому-Гимзе)
Результат___________________________________________________
___________________________________________________________
___________________________________________________________
___________________________________________________________
Treponemapallidum (нативный препарат)
Результат___________________________________________________
___________________________________________________________
___________________________________________________________
___________________________________________________________
2. В какой период заболевания применяются эти методы и для чего?
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Б)___________________________________________________________________________
Экспресс-диагностика сифилиса (реакция микропреципитации)
Учестьрезультат экспресс-метода серологического обследования на сифилис.В какой период заболевания применяется?
При массовом обследовании населения используют экспресс-метод обследования на сифилис. Этот метод дает значимый процент ошибки, поэтому все положительные результаты подтверждаются другими серологическими реакциями (р. Вассермана, осадочные реакции).
Сыворотки обследуемых | |||||
Ингредиенты | |||||
1. Инактивированная сыворотка больного | З к | З к | З к | З к | З к |
2. Эмульсия кардиолипинового антигена | 1 к | 1 к | 1 к | 1 к | 1 к |
Ингредиенты перемешать (или встряхнуть, если реакция в планшете) | |||||
3. Физиологический раствор | 1 к | 1 к | 1 к | 1 к | 1 к |
После выпадения хлопьев, учесть результат | |||||
Примечание: для демонстрации дается эталон учета результатов.
Положительная реакция (крупные хлопья) | Слабоположительная(хлопья средней величины и мелкие) | Отрицательная (нет хлопьев) |
++++ +++ | ++ + | - |
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Реакция Вассермана
Учестьрезультат готовой реакции Вассермана, поставленной с целью выявления антител в сыворотке крови больного с подозрением на сифилис. Сделать вывод.В какой период заболевания применяется?
Методические указания
Реакцию ставят по принципу реакции связывания комплемента. Отличием является то, что при постановке реакции Вассерманаможет быть использован неспецифический антиген - липидная вытяжка бычьего сердца. Возможность использования такого антигена объясняется тем, что в сыворотке крови больного повышается содержание глобулинов и изменяется степень их дисперсности. Глобулины, вступая в соединение с липидньми экстрактами, образуют комплекс, который связывает комплемент, и, поэтому гемолиз не происходит (в гемолитической системе). Отсутствие гемолиза - положительная реакция - серологически подтверждает диагноз "сифилис". При постановке серологических реакций можно использовать специфические антигены из тканевых трепонем и культуральные.
Направление:___________________________________________________________________
Ингредиенты:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка:
Аг1 Аг2 Аг3 КС КА КГС
Результат:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Реакция иммобилизации спирохет
Учестьрезультат реакции иммобилизации трепонем (РИТ) с целью выявления специфических антител в сыворотке крови больного сифилисом. Сделать вывод.В какой период заболевания применяется?
Методические указания
К тканевым живым трепонемам прибавляют исследуемую сыворотку больного с подозрением на сифилис. Через несколько минут трепонемы теряют способность двигаться. Методика постановки реакции: все пробирки выдерживают в анаэростате при 350С 20 часов, готовят препарат "раздавленная капля" и микроскопируют в темном поле зрения. Процент иммобилизованных трепонем определяют по формуле:
х= Тк - То х 100, где
Тк
Тк - число подвижных трепонем в контроле (с инактивированным комплементом)
То - число подвижных трепонем в опыте
Учесть результат опыта при: Тк=30, То=12
Результат: положительный - процент иммобилизации выше 50; отрицательный - ниже 20; слабо положительный, сомнительный - 30-50, 20-30.
Ингредиенты | Пробирки | ||
"К-1"на подвижность | "К-2" на комплемент | "О" на выявление ат | |
Сыворотка здорового | + | - | - |
Сыворотка больного | - | + | + |
Физ. р-р | + | + | + |
Комплемент инактивированный | - | + | - |
Комплемент активный | + | - | + |
Живые тканевые трепонемы | + | + | + |
Результат: | подвижность | подвижность | Подвижность/ иммобилизация |
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 2. Биологические свойства возбудителялептоспироза и принципы лабораторной диагностики.
Самостоятельная работа:решить ситуационную задачу, используя демонстрационный материал и теоретическую справку.
Группа туристов расположилась на ночлег около небольшого водоема. Так как было прохладно, только двое туристов решили искупаться. Через 10 дней у них появилось недомогание, резкие боли в мышцах, особенно в икроножных, пожелтение склер, температура тела повысилась до 400,чтонапоминало клинику лептоспироза.
1. Какие основные направления и методы лабораторной диагностики могут быть использованы для подтверждения диагноза? Какой материал необходимо взять для исследования?
А)___________________________________________________________________________
Leptospirainterrogans(окраска по Романовскому-Гимзе)
Результат___________________________________________________
___________________________________________________________
___________________________________________________________
___________________________________________________________