Токсины и ферменты «агресии» стафилококков.
Ферменты агрессии:
1. Плазмокоагулаза: образует тромбиноподобное вещество, взаимодействующее с тромбином и вызывающее свертывание крови. Сгусток фибрина, покрывая бактериальную клетку, защищает ее от фагоцитоза и АТ.
2. Каталаза: защищает от губительного действия производных кислорода.
3. Липаза: облегчают адгезию и проникновение в ткани.
4. Гиалуронидаза: разрушает гиалуроновую кислоту- цемент соединительной ткани, способствует распространению возбудителя.
5. Фибринолизин: разрушает фибриновые сгустки с образованием инфицированных микротромбов, способствуя генерализации инфекции.
6. Мурамидаза (лизоцим): антагонизм стафилококков в микробиоценозе.
7. Нейраминидаза: растворяет сиальвые кислоты клеточной стенки, способствуя проникновению в клетки.
Токсины агрессии- экзотоксины:
1. Гемолизины: повреждают мембраны клеток- образуют каналы в мембране эритроцитов, лейкоцитов и др.- нарушается их осмотическое давление- лизис.
2. Лейкоцидин: разрушает лейкоциты.
3. Энтеротоксины: вызывают пищевую интоксикацию
4. Токсин синдрома токсического шока- СТШ: развитие специфического симптомокомплекса.
5. Эксфолиативный токсин (А и В): разрушает межклеточные контакты в эпидермисе- отслоение поверхностных структур- синдром ошпаренной кожи.
Методы микробиологической диагностики стафилококковой инфекции.
Материал для исследования: гной, раневое отделяемое, мокрота, мазки со слизистой носа и зева, рвотные массы, кровь, моча, ликвор, испражнения.
1. Бактериоскопический метод: из патологического материала (кроме крови) готовят мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Шаровидные клетки стафилококков окрашиваются в сине-фиолетовый цвет и располагаются небольшими скоплениями, попарно или короткими цепочками.
2. Бактериологический метод:
- посев исследуемого материала (гной) на кровяной агар, ЖСА. Инкубация 24 ч. 37 гр.
-исследование выросших подозрительных колоний: Макроскопия: выпуклые ровные непрозрачные колонии средней величины, белого, желтого или золотистого цвета. Микроскопия: грам+ кокки, расположенные гроздьями. Пересев на скошенный агар для выделения ЧК. Термостат- 24 ч. 37 гр.
-учет роста: макроскопия, микроскопия.
Идентификация: тесты, посевы, определяют чувствительность штамма к антибиотикам (с помощью стандартных дисков), фаготипирование.
Реакция на плазмокоагулазу: выделенная агаровая культура+цитратная плазма кролика, эмульгируют, 37 гр., появление коагуляции-свертывания плазмы (обычно через 2-6 ч.)
Реакция хлопьеобразования: в пробирку наливают плазму и на 0.5 см выше ее уровня растирают петлей ЧК стафилококка, затем петлей вносят плазму в культуру. «+» результат- на стенке пробирки хлопья агглютината.
Определение ДНКазной и лизоцимной активности.
Определение фаговара культур: для выявления источника инфекции и путей заражения. (Каждую из исследуемых культур засевают на питательный агар в чашки Петри газоном, затем петлей наносят по капле каждого фага на 22 квадрата, намеченных на дне чашки, инкубация при 37 гр. Результаты оценивают по наличию лизиса в квадратах).
3. Серологический метод: применяется в случаях хронической инфекции.
-РНГА с эритроцитарнымстафилококковымдиагностикумом (эритроциты нагружены а-токсином сиафилококка).
-Реакция торможения гемолиза по Выгодчикову
Специфическая иммунопрофилактика стафилококковой инфекции.
Стафилококковый анатоксин (очищенный, адсорбированный): получается из нативного анатоксина путем его осаждения трихлоруксусной кислотой с дополнительной очисткой этиловым спиртом и адсорбцией на гидроокиси алюминия. Применяется для активной иммунизации, с целью профилактики стафилококковых инфекций и для лечения.
Стафилококковая вакцина: взвесь стафилококков, инактивированных нагреванием. Применяется для активной иммунизации с целью профилактики и лечения длительно вяло текущих стафилококковых заболеваний.
Иммуноглобулин человеческий противостафилококковый: гамма-глобулиновая фракция сыворотки крови, содержащая стафилококковый антитоксин. Применяется для лечения и профилактики стафилококковой инфекции.