Показатели качества дезинфицирующего средства – бесспиртового кожного антисептика «АСЕПТИК-АКВА»

№ п/п	Наименование показателей	Норма	Метод испытаний
1.	Внешний вид	Бесцветная, прозрачная жидкость без запаха или с запахом отдушки	По п. 6.1.1.
2.	Показатель активности водородных ионов средства, рН;	5,8±1,0	По п. 6.1.2.
3.	Массовая доля сополимера солей полигексаметиленгуанидина в пересчете на ангидрооснование полигексаметиленгуанидина, %	1,0±0,15	По п. 6.1.3.
4.	Массовая доля алкилдиметилбензиламмоний хлорида, %	0,15±0,003	По п. 6.1.4.
5.	Массовая доля Тетранил У (ундециленамидопропилтримониум метосульфат), %	2,0±0,3	По п.6.1.5.

Для определения этих показателей фирмой-изготовителем предлагаются следующие методы:

6.1.1. Определение внешнего вида.

Внешний вид средства оценивают визуально. Для этого около 25 см³ средства наливают через воронку В-36-80ХС по ГОСТ 25336-82 в сухую пробирку П2Т-31-115ХС по ГОСТ 25336-82 и рассматривают в проходящем свете.

Запах при необходимости оценивают органолептическим методом.

6.1.2.Определение показателя активности водородных ионов средства (рН)

Показатель активности водородных ионов определяют в соответствии с ГОСТ Р 50550-93 на иономере любого типа, обеспечивающим измерение от 2 до 12 рН в соответствии с инструкцией к прибору.

6.1.3.Определение сополимера солей полигексаметиленгуанидина в пересчете на ангидрооснование полигексаметиленгуанидина, %

6.1.3.1.Оборудование и реактивы:

- Весы аналитические любой марки, обеспечивающие измерение массы с погрешностью не более 0,0002 г;

- Фотоэлектроколориметр КФК-2 или другой марки с аналогичными метрологическими характеристиками;

- Колбы мерные 2-25-2, 2-100-2 по ГОСТ 1770-74;

- Пипетки 4-1-1, 6-1-5, 6-1-10 по ГОСТ 20292-74;

- Эозин-Н (индикатор) по ТУ 6-09-183-75; 0,05% водный раствор;

- Полисепт по ТУ 9392-007-21060124. Изменение №2 "Полисепт ОП (очищенный, пищевой)" с содержанием полигексаметиленгуанидин гидрохлорида не менее 95%;

- Кислота соляная по ГОСТ 3118-77; 0,1 н. водный раствор.

- Глицин по ТУ 6-09-3525;

- Натрий хлористый по ГОСТ 4233-77;

- Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

6.1.3.2. Подготовка к анализу

6.1.3.2.1. Приготовление буферного раствора

Готовят 2 исходных раствора:

а) Раствор 1. 0,1 н. раствор соляной кислоты, который готовят либо из фиксанала, либо разведением до метки 8 см³ концентрированной соляной кислоты в мерной колбе вместимостью 1 дм³.

б) Раствор 2. 0,75 г глицина и 0,59 г хлористого натрия растворяют в мерной колбе вместимостью 100 см³ с доведением объема дистиллированной водой до метки.

Буферный раствор готовят в мерной колбе вместимостью 100 см³, в которую наливают 92,5 см³ раствора 2 и объем жидкости доводят до метки раствором 1. Значение рН буферного раствора должно быть около 3,5, что необходимо проконтролировать с помощью иономера.

Использовать следует лишь буферный раствор, полученный из свежеприготовленного раствора 2. Срок хранения буферного раствора не более 24 часов.

6.1.3.2.2. Приготовление 0,05% раствора эозина. 50 мг эозина растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 100 см³ с доведением объема воды до метки.

6.1.3.2.3. Приготовление стандартного раствора - в качестве стандарта используют Полисепт марки ОП с содержанием полигексаметиленгуанидин гидрохлорида не менее 95%.

Навеску Полисепта, содержащую 100 мг полигексаметиленгуанидин гидрохлорида, ко­личественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³ и растворяют в объеме дистил­лированной воды, доведенном до метки.

Затем 1 см³ полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят дистиллированной водой объем раствора до метки.

1 см³ такого раствора содержит 10 мкг полигексаметиленгуанидин гидрохлорида

6.1.3.3. Построение калибровочного графика и проведение анализа.

Для повышения точности обе эти процедуры проводят параллельно.

Сначала из стандартного раствора готовят эталонные растворы полигексаметиленгуанидин гидрохлорида для построения калибровочного графика, затем - растворы анализируемо­го препарата. С использованием всех этих растворов готовят образцы для фотометрирования и последовательно (в порядке приготовления образцов) определяют их оптическую плотность.

Эталонные растворы с концентрацией 1, 2, 3 и 4 мкг/см³ полигексаметиленгуанидин гидрохлорида готовят внесением в мерные колбы вместимостью 25 см³ 2,5, 5, 7,5 и 10 см³ стандартного раствора, объемы их доводят до 25 см³ прибавлением 22,5, 20, 17,5 и 15 см³ дис­тиллированной воды соответственно.

С учетом того, что молекулярная масса элементарного звена полигексаметиленгуани­дин гидрохлорида составляет - 177.68, а молекулярная масса элементарного звена ангидрооснования полигексаметиленгуанидина составляет - 142.22, полученные эталонные растворы содержат соответственно 0.8, 0.16, 2.4 и 3.2 мкг/см³ ангидрооснования полигексаметиленгуа­нидина.

Растворы жидкой формы анализируемого средства готовят разведением навески анали­зируемой пробы от 1,1 г до 4,0 г, взятой с точностью до 0,0002 г в мерной колбе вместимо­стью 100 см³, с последующим разведением 1 см³ полученного раствора до 100 см³ в мерной колбе соответствующей вместимости.

В мерных колбах вместимостью 25 см³ к 10 см³ приготовленных растворов (эталонных и анализируемого препарата), прибавляют 1 см³ раствора эозина, 10 см³ буферного раствора и объем содержимого доводят до метки дистиллированной водой. После перемешивания все эти растворы фотометрируют относительно образца сравнения, приготовляемого прибавлением к 10 см³ дистиллированной воды 1 см³ раствора эозина, 10 см³ буферного раствора и последую­щим доведением объема дистиллированной водой до 25 см³ .

Определение оптической плотности выполняют не позднее, чем через 10 минут после внесения в пробу индикатора при длине волны 540 нм с использованием кювет с толщиной поглощающего слоя 50 мм.

С использованием полученных результатов строят калибровочный график, на оси абсцисс которого откладывают значения концентраций ангидрооснования полигексаметиленгуанидина, на оси ординат - величины оптических плотностей. График прямолинеен в интервале концентраций от 1 мкг/см³ до 4 мкг/см³ .

По калибровочному графику находят содержание основания полигексаметиленгуанидина гидрохлорида.

6.1.3.4. Обработка результатов

Массовую долю ангидрооснования полигексаметиленгуанидина (Х) в процентах вычисляют по формуле:

,где

С - содержание ангидрооснования полигексаметиленгуанидина, обнаруженное по калибровочному графику в анализируемой пробе, г;

Р - коэффициент разбавления;

m - масса анализируемой пробы, г.

За результат анализа принимают среднее арифметическое трех параллельных определе­ний, абсолютное расхождение между которыми не превышает допускаемое расхождение, рав­ное 1,0%.

Допускаемая относительная суммарная погрешность результата анализа ±4,5% при до­верительной вероятности 0,95.

6.1.4.Определение массовой доли алкилдиметилбензиламмония хлорида, %

6.1.4.1. Оборудование, приборы, посуда и реактивы

Весы лабораторные общего назначения 2-ого класса точности по ГОСТ 24104-2001 с наибольшим пределом взвешивания 200 г;

Бюретка 7-2-10 по ГОСТ 20292-74;

Колбы мерные 2-100-2 по ГОСТ 1770-90;

Колба К_н-1-250-29/32 по ГОСТ 25336-82 со шлифованной пробкой;

Пипетки 4(5)-1-1, 2-1-5 по ГОСТ 20292-74;

Цилиндры 1-25, 1-50, 1-100 по ГОСТ 1770-90;

Хлороформ по ГОСТ 20015-88;

Бромфеноловый синий водорастворимый, индикатор, ТУ 6-09-311-70 - раствор с массовой долей 0,1%, готовят по ГОСТ 4919.1;

Натрия додецилсульфат (лаурилсульфат натрия), ТУ 6-09-64-75 или Merck 12533 – 0,003М – 0,004М раствор;

Натрий сернокислый по ГОСТ 4166-76;

Натрий углекислый по ГОСТ 84-76;

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

6.1.4.2. Подготовка к анализу

6.1.4.2.1. Приготовление 0,004 М водного раствора додецилсульфата натрия

0.250 г додецилсульфата натрия (с содержанием основного вещества 92,8%) растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 200 см³ с доведением воды до метки. Проверку концентрации приготовленного раствора проводят титрованием анализируемого образца средства (п. 7.4.3) с использованием раствора, приготовленного из стандартного образца додецилсульфата натрия – ГСО 8049 – 94 (масса додецилсульфата натрия – 1 г в ампуле).

6.1.4.2.2. Приготовление буферного раствора (рН – 11)

50 г натрия сернокислого и 3,5 г натрия углекислого растворяют в 500 см³ воды.

4.3. Выполнение анализа

Навеску анализируемого средства 3,20 – 3,50 г, взятую с точностью до 0,0002 г, количественно переносят в цилиндр или мерную колбу вместимостью 100 см³, затем прибавляют 20 см³ хлороформа, 30 см³ буферного раствора и 4-8 капель индикатора бромфенолового синего, закрывают пробкой и тщательно встряхивают. Титруют 0,004 М раствором натрия додецилсульфата до появления фиолетового окрашивания в верхнем слое (при титровании пробу интенсивно перемешивают).

6.1.4.4. Обработка результатов

Массовую долю алкилдиметилбензиламмоний хлорида (Х) в процентах вычисляют по формуле:

, где

0,001428 – масса алкилдиметилбензиламмоний хлорида, соответствующая 1 см³ раствора додецилсульфата натрия концентрации точно С (С₁₂Н₂₅SO₄Na) = 0,004 М (моль/дм³), г;

V – объем раствора додецилсульфата натрия, израсходованный на титрование;

m - масса анализируемой пробы, г.

Результат вычисляют по формуле со степенью округления до второго десятичного знака.

За результат анализа принимают среднее арифметическое двух определений, абсолютное расхождение между которыми не превышает допускаемое расхождение, равное 0,2%. Допускаемая относительная суммарная погрешность результата измерений не должна превышать + 8,0% при доверительной вероятности Р = 0,95.

6.1.5.Определение массовой доли Тетранил У (ундециленамидопропилтримониум метосульфата) методом капиллярного электрофореза, %

Метод капиллярного электрофореза основан на разделении заряженных компонентов сложной смеси в кварцевом капилляре под действием приложенного электрического поля.

6.1.5.1. Средства измерения

- Система для капиллярного электрофореза Quanta 4000E (Waters, USA)

- Весы лабораторные общего назначения 2 класса ГОСТ 24104-2001 с наибольшим пределом взвешивания 200 г;

- Колбы мерные вместимостью 50 и 25 см³ ГОСТ 1770-90;

- Пипетки вместимостью 5.0 см³ ГОСТ 29227-91;

6.1.5.2. Растворы, реактивы

- Тетранил У 50% раствор – аналитический стандарт;

- Бензойная кислота, ГОСТ 10521-78;

- Трис(гидроксиметил)метиламин, комп.Merck, Германия;

- Тетрадецилтриметиламмоний бромид, комп.Merck, Германия;

- Вода очистки миллипор-q или бидистиллированная;

6.1.5.3. Условия анализа

6.1.5.3.1. Разделительный буфер:

Бензойная кислота 25мМ;

Трис(гидроксиметил)метиламин 50мМ;

Тетрадецилтриметиломмоний бромид 0,25 мМ.

6.1.5.3.2 Технические характеристики:

Длина капилляра: 45 см;

Напряжение: 20 кВ (обратная полярность);

Температура: 20 ⁰С;

Время ввода пробы: 5 сек (гидростатически).

6.1.5.3.3. Подготовка капилляра к работе:

Для восстановления кондиционного состояния внутренней поверхности, капилляр промывают в следующем порядке:

- раствором 0,5 М соляной кислоты не менее 10 минут;

- дистиллированной водой 10 минут;

- раствором 0,5 М гидроксида натрия не менее 1о минут;

- дистиллированной водой 10 минут;

- рабочим буферным раствором 30 минут.

6.1.5.4. Приготовление градуировочной смеси: мерную колбу вместимостью 25 см³ вносят около 0.5 г 50% раствора Тетранил У, взвешенного с точностью до четвертого десятичного знака, добавляют воду для разведения до калибровочной метки и перемешивают.

Гадуировочную смесь анализируют несколько раз для получения стабильной площади и времени удерживания хроматографического пика Тетранил У. Из полученных хроматограмм определяют время удерживания и площадь хроматографического пика хлоргексидин биглюконата.

6.1.5.5. Выполнение измерений

В мерную колбу вместимостью 50 см³ вносят около 5.0 г средства, взвешенного с точностью до четвертого десятичного знака, и разбавляют до метки водой. Анализ проводят в соответствии с инструкцией к прибору. Анализ повторяют не менее 3 раз. Из полученных хроматограмм вычисляют площадь хроматографического пика Тетранил У в анализируемой пробе.

6.1.5.6. Обработка результатов измерений

Массовую долю Тетранил У (Х, %) в средстве вычисляют по формуле:

, где

S и S_г.с. – площадь пика Тетранил У в испытуемом растворе и градуировочной смеси;

С_г.с. – концентрация Тетранил У в градуировочной смеси, мг/см³;

V – объем раствора пробы, см³;

m - масса средства, мг.

За результат измерений принимают среднее арифметическое значение двух параллельных измерений, расхождение между которыми не должно превышать допустимого значения, равного 0,5%.