Минерализованная соединительная ткань

Костная ткань является высокоспециализированным видом соединительной ткани, отличается большой твердостью, механической прочностью, наличием большого количества межклеточ­ного вещества при сравнительно небольшом количестве костных клеток, В межклеточном веществе костной ткани преобладают неорганические соединения. Отличительной особенностью кост­ной ткани является способность ее органического матрикса ми­нерализоваться.

Работа. Изучение химического состава костной ткани

Костная ткань состоит из минеральных веществ (50-60% ее веса), органического вещества (30%) и воды (10-20%). Скелет — главное депо кальция и фосфора. У взрослого человека в нем сосредоточено около 1 200 г кальция, 530 г фосфора, 11 г маг­ния. Органическое вещество на 95% состоит из коллагена.

1. Обнаружение неорганических составных частей костной ткани.

Неорганические вещества извлекают из костной ткани рас­твором серной кислоты. С этой целью в колбу помещают 5 г кост­ной ткани, 25 мл 0,5% раствора серной кислоты и оставляют сто­ять 24 часа.

а) Открытие солей кальция.

К 1 мл сернокислотной вытяжки прибавить 1-2 капли насы­щенного раствора щавелевокислого аммония. Выпадает нерас­творимый осадок щавелевокислого кальция.

б) Открытие солей магния.

Жидкость, полученную при проведении предыдущей работы, профильтровать и к фильтрату добавить 2-3 капли концентриро­ванного раствора аммиака. Выпадает нерастворимый осадок фос­форнокислой аммиакмагнезии.

2. Изучение аминокислотного состава оссеина.

Оставшуюся после обработки серной кислотой органическую

часть костной ткани кипятить 15 минут с 20 мл дистиллированной воды. С полученным раствором после фильтрования выполнить реакции для обнаружения белка (биуретовая реакция) и для изу­чения его аминокислотного состава (реакции Фоля, Миллона).

Работа. Определение сиаловых кислот

Принцип метода. Метод основан на цветной реакции, по­лучаемой при нагревании сиаловой кислоты (ацетилнейрамино- вой) с раствором Гесса. Интенсивность буровато-розового окра­шивания зависит от концентрации сиаловых кислот.

Порядок выполнения работы. К 1 мл сыворотки крови в центрифужной пробирке добавляют 1 мл 10% раствора три- хлоруксусной кислоты и встряхивают. Затем помещают пробир­ку в кипящую водяную баню на 5 мин. и охлаждают. Это приво­дит к освобождению связей N-ацетилнейраминовой кислоты с белковой частью молекулы гликопротеидов. После центрифу-гирования к 0,4 мл надосадочной жидкости добавляют 5 мл реактива Гесса (94 ч. ледяной уксусной кислоты и 6 ч. концен­трированной серной кислоты) и повторно кипятят в водяной бане 30 минут. При этом появляется буровато-розовое окрашива­ние. Охлаждают и колориметрируют на ФЭКе в кюветах на 10 мл против воды при зеленом светофильтре. Полученную вели­чину экстинкции умножают на 1000. Результат определения выражают в условных единицах экстинкции. В норме величина ее колеблется от 100 до 195 условных единиц, что соответст­вует содержанию сиаловых кислот от 550 мл до 790 мг/л (55- 79 мг%).

Клинико-диагностическое значение. Определение сиа­ловых кислот имеет важное диагностическое значение при рев­матизме, туберкулезе, раке легких, злокачественных опухолях костной ткани, когда их содержание увеличивается.

К методическим рекомендациям

ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ

НА ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЯХ

Раздел VIII. Биохимия тканей и жидкостей полости рта

Биохимия смешанной слюны

Слюна — смесь секретов слюнных желез, выделяющихся в полость рта и участвующих в пищеварении.

В полость рта выделяется секрет околоушной, поднижнече- люстной, подъязычной желез, малых слюнных желез полости рта, образуя смешанную или так называемую ротовую жидкость. К ротовой жидкости примешиваются эпителиальные клетки, части­цы пищи,¹ нейтрофильные лейкоциты (слюнные тельца), слизь, микроорганизмы.

У человека в сутки выделяется до 1,5-2 литров слюны. Слю­на, секретируемая околоушной железой, невязкая, сравнительно богаче водой, белком, ферментами, хлоридами калия и натрия. Секрет, выделяемый поднижнечелюстной и подъязычной желе­зами, содержит больше органических веществ (муцин, амилаза), вязкий.

Состав, рН, объем смешанной слюны непостоянны, колеб­лются в зависимости от скорости секреции, характера пищи, вре­мени суток, состояния организма, воздействия внешних факто­ров, заболеваний полости рта и т. д.

Удельный вес колеблется от 1,001 до 1,017; рН — 6,4-7,2; содержание воды — 99,5%. Из неорганических веществ пре­обладают: натрий — 20-40 мэкв/л, калий — 16-20 мэкв/л, каль­ций — 6-20 мг/дл, хлор — 20-40 мэкв/л, бикарбонаты — 20- 40 мэкв/л. Содержатся фосфаты, йодиды, фториды (их содер­жание часто выше, чем в плазме крови), а также сульфаты и родййидь!. Основными органическими компонентами смешан­ной слюны являются белки — до 0,26-0,3%:- альбумины, бета- и гамма-глобулины, иммуноглобулины, лизоцим, гликопроте- ин Муцин, ферменты — альфа-амилаза, липаза, мальтаза, фер­менты гликолиза, цикла трикарбоновых кислот, факторы свер­тывающей системы крови, коллагеназа, нуклеазы.

Уровень остаточного азота колеблется от 108 мг/л до 206 мг/л, лактата — 2-4 мг/л, пирувата — 20-40 мг/л.

В слюне постоянно обнаруживаются (следовые количества) аскорбиновая кислота, витамины В^ В₂, РР и др.

Состав слюны изменяется при ряде заболеваний. Например, при нефрите, осложненном уремией, в слюне возрастает количе­ство остаточного азота, содержание его увеличивается и при яз­венной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. При са­харном диабете повышено содержание глюкозы. Названные по­казатели могут быть использованы как диагностические тесты в клинической практике.