Определение групповой принадлежности с помощью цоликлонов анти-А и анти-В.

Цоликлоны (антитела) - это искусственно созданные реагенты для определения группы крови в системе АВО. Их готовят из асцитической жидкости лабораторных мышей, больных опухолью - гибридомой. Цоликлоны обладают высоким титром, надежно выявляют слабые формы антигенов А и В (А1, А2, А3, В1, В2, В3 и т.д.). Цоликлоны выпускаются в жидкой форме во флаконах или ампулах со специальными добавками, гарантирующими стерильность и сохранение активности в течение 2 лет, а также красителями. Анти-А окрашен в розовый цвет, анти-В - в синий. Для определения групп крови применяют по одной серии реагента, условия для определения те же, что и при использовании стандартных сывороток. На тарелку под соответствующими надписями (анти-А и анти-В) наносят по одной большой капле(0,1 мл) реагента, рядом помещают по одной малой капле(0,01 мл) исследуемой крови. Разными стеклянными палочками тщательно смешивают кровь с цоликлоном. Агглютинация наступает обычно в первые 3-5 секунд, но наблюдение следует проводить в течение 2-3 минут.

Результаты:

1. Если агглютинации нет ни с одним цоликлоном, ни с анти-А, ни с анти-В, значит в эритроцитах нет агглютиногенов - это О(1) группа.

2. Если реакция агглютинации произошла только с цоликлоном анит-А, значит это А (11) группа.

3. Если реакция агглютинации произошла только с цоликлоном анта-В, это В(111) группа.

4. Если агглютинация произошла и с цоликлоном анти-А и с цоликлоном анти-В, значит это АВ (1У) группа крови.

При выявлении АВ(1У) группы дополнительно проводят исследование с цоликлоном анти-АВ.

Система Резус

Первый открытый в этой системе антиген назвали резус-фактор, т.к. он впервые был выявлен у обезьян макак Резус. Rh - фактор - активный антиген, вызывающий образование антител в крови людей, не имеющих его. Открыты и другие факторы этой системы: rh’, rh”, hr’, hr”, первому фактору присвоен символ Rho. Резус - фактор передается по наследству. В данной системе нет врожденных антител. Rh-антитела образуются в результате иммунизации при переливании Rh-отрицательному реципиенту Rh- положительной крови - это называется искусственной иммунизация. Rh-антитела образуются в организме беременной женщины с Rh-отрицательной кровью, если у плода Rh-положительная кровь. Это лежит в основе резус-конфликта. При переливании резус- несовместимой крови происходит гемолиз эритроцитов донора с последующим развитием посттрансфузионного шока. В случае беременности в организме матери появляются антитела - антирезус, направленные против Rh-фактора плода. У 28-35 % возникают выкидыши. При низком титре антител у новорожденных развивается гемолитическая болезнь. 85% людей имеют в своей крови резус - фактор - они резус- положительные, 15% не имеют - они резус - отрицательные.

Определение резус - принадлежности может проводиться с помощью: 1.сывороток анти - резус

2. цоликлонов анти - Д - супер, анти - С - супер.

Более удобен способ определении резуса с помощью цоликлонов. Реакцию осуществляют на плоскости. Большую каплю реагента смешивают с малой каплей исследуемой крови в соотношении 10:1. Появление через несколько секунд агглютинации свидетельствует о наличие в крови антитела Rh, т.е. о резус - положительности крови. Если смесь осталась гомогенной, розовой окраски, то кровь резус - отрицательна.

Переливать можно только одногруппную кровь: Rh-положительным - Rh-положительную, Rh- отрицательным - Rh -отрицательную кровь.

ЛЕКЦИЯ № 8

«ТРАНСФУЗИЯ, ИНФУЗИЯ»

Последовательность мероприятий при переливании крови:

1. Определить показания и противопоказания к переливанию крови.

2. Определить группу крови и резус фактор у реципиента.

3. Подобрать необходимую кровь.

4. Определить пригодность её к переливанию.

5. Собрать и заполнить систему для переливания.

6. Провести пробы на совместимость.

7. Выбрать способ переливания.

8. Соблюдая асептику, провести гемотрансфузию.

Показания к переливанию крови:

1. Абсолютные (когда можно переливать только кровь):

- тяжелые операции;

- острая кровопотеря;

- шок.

2. Относительные показания (можно начать трансфузионную терапию с гемокорректоров):

- анемия;

- снижение иммунитета;

- интоксикация;

- нарушение свертывания крови;

- кровотечения,

- ожоговая болезнь.

Противопоказания:

1. Абсолютные:

- тяжелое поражение паренхимы печени;

- острая почечная недостаточность;

- органическое поражение головного мозга (инсульт, опухоли и др.);

- выраженная хроническая и острая сердечно - сосудистая недостаточность;

- свежие инфаркты миокарда, легких, селезенки;

- милиарный туберкулез.

2. Относительные:

- острый тромбофлебит и тромбоз периферических сосудов;

- эндокардит с наклонностью к тромбоэмболии;

- аневризма аорты, левого желудочка;

- тяжелые формы ИБС;

- тяжелые формы ГБ;

- аллергические заболевания.

Кровь, использующаяся для гемотрансфузий:

1. Нативная донорская кровь:это кровь без добавления стабилизатора, вещества предотвращающего её свертывание. Используется только при прямом переливании.

2. Свежестабилизированная кровь: донорская кровь + цитрат натрия. Имеет срок хранения не более 1 суток. На 100 мл крови приходится 10 мл цитрата натрия. Возможно использование гепарина.

3. Консервированная донорская кровь: В качестве стабилизатора применяют кислые глюкозоцитратные растворы, ионообменные смолы и др. Хранят в герметично закрытых флаконах при t 2-6 гр. С. Срок годности 2-4 недели. При длительном хранении тромбоциты лизируются, у лейкоцитов снижается фагоцитарная активность, исчезают некоторые факторы свертывания крови.

4. Утильная кровь: получается при кровопусканиях от больных, например, ГБ.

5. Плацентарная кровь:из плаценты в количестве 60-80 мл во флакон с цитратом натрия. Срок хранения 12 дней. Применяют при ювенильных кровотечениях, анемии, инфекции новорожденных, при недоношенности.

6. Трупная кровь: может быть взята у трупа не позднее 6 часов после смерти и только у лиц, умерших внезапно, без агонии (от элекротравмы, ДТП и т.д.). Кровь внезапно умерших благодаря феномену фибринолиза становится жидкой и не требует стабилизатора. У трупа можно взять 2-3 литра крови.

7. Аутокровь: кровь больного, взятая у него за несколько дней до операции. Переливание такой крови называется аутогемотрансфузией. Если больному переливается кровь, излившаяся в полость тела при операции, то это называется реинфузией.

8. Иммунная кровь: получают от реконвалесцентов после инфекционных болезней или ожогов, а также от специально иммунизированных доноров. Содержит в высоком титре антитела к определенному возбудителю инфекционных болезней. Иммунотрансфузии проводят в дозе 200-400 мл.

Пути введения крови в организм:

1. В\в: чаще всего. Используют вены локтевого сгиба, или предплечья, большую подкожную вену нижних конечностей, наружную яремную вену, подключичную, бедренную вену. Детям в подкожную вену головы, грудным детям через большой родничок, в саггитальный синус.

2. В\а.

3. В губчатые кости.

Методы переливания крови:

1. Прямое переливание - это метод непосредственного переливания крови от донора реципиенту. При этом используется только цельная кровь, исключительно при массивном кровотечении, с использованием специальных аппаратов.

2. Непрямое переливание - это метод, когда кровь сначала консервируют, а потом переливают реципиенту, используя системы для одноразового пользования с фильтром.

Определение пригодности крови к переливанию:

1. Полимерный контейнер (флакон) с кровью должен быть герметичен, иметь этикетку, на которой содержится сведения о группе крови и резус-факторе донора. На этикетке должна быть цветная полоска, соответствующая определенной группе крови, дата взятия крови, фамилия донора и врача, номер контейнера, особенность консервирования, от которой зависит срок годности крови.

2. Затем проводится визуальная проверка содержимого контейнера. В норме кровь должна быть разделена на 3 слоя: сверху - желтая прозрачная плазма, внизу - слой осевших эритроцитов, а между ними - тонкий слой в виде линии из лейкоцитов и тромбоцитов.

Если плазма мутная, с хлопьями - это говорит об инфицировании крови. Если содержимое контейнера всё однородно красное - это говорит о гемолизе. В этих случаях кровь для переливания непригодна.

3. Кровь проверяют на наличие сгустков. Если они обнаружены, то кровь переливать нельзя.

Проба на индивидуальную групповую совместимость (по системе АВО):

При комнатной температуре смешивают каплю сыворотки крови реципиента с каплей крови донора в соотношении 10:1. При отсутствии агглютинации через 5 минут - кровь совместима. Наличие агглютинации указывает на несовместимость крови.

Проба на индивидуальную совместимость по Rh - фактору:

Варианты проведения:

1. С 33%-м раствором полиглюкина в пробирке без подогрева. Используется чаще всего. В пробирке смешивают 2 капли сыворотки крови реципиента, 1 каплю донорской крови и 1 каплю 33% раствора полиглюкина. Пробирку кладут на горизонтальную поверхность и «катают» 5 мин так, чтобы содержимое растекалось по стенкам, и реакция была более выраженной. Через 5 мин добавляют 2-3 мл физраствора, закрывают пробирку пробкой и 2-3 раза спокойно переворачивают. Если содержимое пробирки равномерно окрашено и нет признаков агглютинации, то кровь донора и реципиента совместимы. Если появились признаки агглютинации, то донорская кровь несовместима с кровью реципиента. Срок годности 33%-го полиглюкина 3 мес.

2. С применением желатина.

3. Тепловая проба.

Биологическая проба:

Эту пробу проводят после проб на индивидуальную и резус-совместимость, т.к. в отличие от этих проб, здесь встреча агглютиногена донора с агглютинином реципиента происходит в организме человека. Если реципиенту переливают несколько контейнеров с кровью, то биологическую совместимость необходимо проводить с каждым, так как это разные доноры.

Проба заключается в быстром (струйном) переливании реципиенту донорской крови по 10-15 мл 3-кратно с 3-минутными интервалами. Всего переливают при этом 30-40 мл. Детям до 5 лет - по 5 мл тоже 3-кратно. Во время процедуры следим за состоянием пациента. Ранними признаками несовместимости являются:

- стеснение за грудиной и чувство жара;

- гиперемия лица и шеи;

- боль в животе и пояснице;

- головокружение и слабость.

При появлении этих симптомов переливание прекращают, систему отсоединяют от иглы, к игле присоединяют систему с изотоническим раствором, вводят хлористый кальций, адреналин и сердечные препараты по назначению врача.

При отсутствии признаков несовместимости переливают всю кровь со скоростью 40-30 капель в минуту.

Перед переливанием сосуд с трансфузионной средой подогревают, используя специальное устройство или выдерживая при комнатной температуре в течение 40-60 минут. Контейнеры с остатками крови, а также пробирки с кровью (сывороткой) реципиента сохраняют в холодильнике в течение 2 суток для проверки в случае трансфузионного осложнения.

Накануне переливания больному делается ОАК и ОАМ, в конце первых суток после переливания анализы повторяют (может быть, белок в моче, гемолиз эритроцитов).

Каждый случай переливания крови и её компонентов записывают в истории болезни, отражая показания к гемотрансфузии, название перелитой среды, её паспортные данные, пробы, проведенные перед переливанием, метод переливания, начало и окончание, реакции организма на переливание.

Посттрансфузионные реакции:

Встречаются в 9,3- 12,5 % случаев.

1. Легкие реакции: повышение t тела в переделах 1 градуса, недомогание, учащение пульса, тошнота - длятся не более 2-3 часов.

2. Средние реакции: повышение t тела на 1-1,5 градуса, тахикардия, кожный зуд, крапивница, рвота.

3. Тяжелые реакции: повышение t тела на 2- 2,5 градуса, коллапс, аллергические кожные реакции, затруднение дыхания (бронхоспазм, отек гортани), уменьшение количества мочи (олигурия). Явления длятся 2-3 дня.

Легкие и средние проходят, как правило, самостоятельно, тяжелые требуют специального лечения: в\м до 10 мл 4% раствора антипирина и до 1 гр аспирина per os. Пузыри со льдом на область магистральных сосудов. Вводят атропин, гидрокортизон, глюкозу, сердечно-сосудистые препараты, комплекс витаминов.

Переливание холодной крови приводит к развитию потрясающего озноба.

Посттрансфузионные осложнения:

Встречаются в 0,1% случаев. В 25% случае заканчивается летальным исходом.

1. Механического характера - возникают при нарушении правил переливания крови: воздушная эмболия, тромбоэмболия, острое расширение правых отделов сердца при форсированном введении больших количеств крови.

2. Инфекционные осложнения - проникновение инфекции от донора (сифилис, малярии, вирусные гепатиты, СПИД).

3. Осложнения реактивного характера - гемотрансфузионный шок - наступает при переливании крови, несовместимой по системе АВО во время трансфузии, или в ближайшее время после неё. При Rh -несовместимости - через 6-24 часов. Характеризуется появлением беспокойства, озноба, болей в груди, животе и пояснице, одышки, цианоза, тахикардии, снижения АД. Гиперемия лица сменяется бледностью, появляются рвота, судороги, повышение температуры, непроизвольное мочеиспускание и дефекация, моча становится бурого цвета.

При первых признаках несовместимости гемотрансфузия должна быть прекращена, начинают вливание противошоковых средств, антигистаминных препаратов, наркотиков, витаминов, глюкозы с инсулином, преднизолона.

Наиболее эффективнее проведение гемодиализа с помощью аппарата «искусственной» почки.

Компоненты крови:

1. Эритроцитарная масса - применяется при анемиях, нарушениях эритропоэза.

2. Лейкоцитарная масса - это препарат с большим содержанием лейкоцитов и малым содержанием эритроцитов, тромбоцитов и плазмы - применяют для лечения инфекционных заболеваний, вводят онкобольным после лучевой и химиотерапии.

3. Плазма - жидкая часть крови, содержащая белки, гормоны, липиды, витамины, ферменты. Применяют нативную, замороженную, сухую, иммунную плазму - при ожогах, для восполнения плазмопотери, для восполнения ОЦК, для парентерального питания, при сепсисе, анемиях, гнойных заболеваниях.

Препараты крови:

1.Альбумин - хранят при t - 4 градуса, срок годности 5 лет. Применяют при шоке, острой кровопотере, гипопротеинемии от 100 до 500 мл 10% раствора.

2.Протеин - 4,8 % раствор белков плазмы (80% альбумины, 20% - глобулины). Показания те же.

3. Иммуноглобулины - препараты с высоким содержанием антител. Направлены на профилактику и лечение определенных заболеваний.

4. Фибриноген (гемостатическое действие) - при кровотечениях, вызванных его недостатком.

5. Гемостатическая губка - белковый препарат для местного применении.

6. Фибринолизин - обладает выраженной способностью лизировать свежие тромбы (при тромбозе центральных и периферических артерий).

Инфузия:

Инфузия - это введение в организм больших количеств жидкости, минуя пищеварительный тракт.

В соответствии с целью введения кровезаменители делятся на 3 большие группы:

1. Противошоковые средства - обладают следующими свойствами:

- осмотическое давление и вязкость их близки к показателям крови;

- не имеют анафилактических, токсических, пирогенных свойств;

- полностью выводятся из организма, не вступая в обмен веществ.

К этой группе относятся:

- полиглюкин- хорошо замещает до 2 л крови, быстро увеличивает ОЦК, хорошо удерживает АД.

- полифер - те же свойства, что и у полиглюкина + участвует в синтезе гемоглобина.

- реополиглюкин (реомакродекс) - используют при нарушении микроциркуляции. Обладает также выраженным дезинтоксикационным эффектом. Применяют в дозе 500-2000 мл.

Желатиноль - белок, содержащий аминокислоты, используется для восполнения кровопотери, при шоках, интоксикациях. Требует пробы на биологическую совместимость.

2. Детоксикационные препараты:

- Гемодез - 6 % раствор с добавлением солей. Вводится в/в и быстро выводиться из организма. Как все детоксикационные средства, связывает, нейтрализует и выводит токсические вещества из организма.

- Неогемодез- содержит ионы натрия, калия, кальция, более эффективен, чем гемодез, вводится в\в со скоростью 20-30 капель в минуту.

- Полидез- вводится капельно, медленно.

3. Препараты для парентерального питания:

- Белковые гидролизаты: гидролизин, аминокровин, амикин, аминопептид

- вводятся в\в капельно медленно 10-30 капель в минуту. Есть противопоказания: шок, массивная кровопотеря, плохая работа печени и почек.

Все требуют пробы на биологическую совместимость!

- Жировые эмульсии: интралипид, липофундин, инфузолипол. Наряду с белковыми препаратами обеспечивают парентеральное питание, противопоказаны при шоке и нарушениях функции печени.

- Углеводы: глюкоза 5%, 10%, 20%, 40% растворы - нельзя при сахарном диабете. Сорбит, маннитиксилит применяют и при сахарном диабете.

4. Регуляторы водно-солевого обмена:

- кристаллоидные растворы: изотонический раствор, раствор хлорида натрия, хлосоль, ацесоль, трисоль, квартасоль, раствор Рингера и Рингера-Локка.

- осмодиуретики: маннитол15%, сорбитол 20%.

5. Переносчики кислорода:

- перфукол,

- эригел, применяются редко.