Комплемент, его структура, функции, пути активации, роль в иммунитете. Методы оценки активности системы комплемента.

Ответ: Комплемент является одним из важных факторов гуморального иммунитета, играющим роль в защите организма от антигенов. Он представляет собой сложный комплекс белков сыворотки крови, находящийся обычно в неактивном состоянии и активирующийся при соединении антигена с антителом или при агрегации антигена. В состав комплемента входят 20 взаимодействующих между собой белков, 9 из которых являются основными компонентами комплемента; их обозначают цифрами : С1,С2,С3….С9. Важную роль играют также факторы В,D и P(пропердин). Компоненты комплемента синтезируются в большом количестве (составляют 5-10 % от всех белков крови), часть из них образуют фагоциты. Функции комплемента многообразны: участвует в лизисе микробных и других клеток (цитотоксическое действие); обладает хемотаксической активностью; принимает участие в анафилаксии; участвует в фагоцитозе. Следовательно, комплемент является компонентом многих иммунолитических реакций, направленных на освобождение организма от микробов и других чужеродных клеток и антигенов(опухолевых клеток, трансплантата). Механизм активации комплемента очень сложен и представляет собой каскад ферментативных протеолитических реакций, в результате которого образуется активный цитолитический комплекс, разрушающий стенку бактерий и других клеток. Различают 3 пути активации комплемента: классический, альтернативный и лектиновый .По классическомупути комплемент активируется комплексом антиген-антитело(IgG или IgM). Процесс начинается с присоединения к комплексу АГ+АТ компонента С1, который распадается на субъединицы С1q, С1r и С1s. Далее в реакции последовательно участвуют активированные «ранние» компоненты комплемента в такой последовательности: С4,С2,С3. Затем за счет каскада реакций компонентов комплемента формируется литический мембраноатакующий комплекс (МАК), который в мембране клетки-мишени образует канал, полностью проницаемый для электролитов и воды. За счет высокого коллоидно-осмотического давления внутри клетки в нее поступают ионы натрия и вода, что и приводит к осмотическому разрыву (лизису) патогенной клетки. Альтернативный путь проходит без участия антител. Этот путь характерен для защиты от грамотрицательных микробов. Каскадная цепная реакция начинается с взаимодействия антигена с протеинами B,D и пропердином ( P) с последующей активацией компонента С3. Далее реакция идет также, как и при классическом пути – образуется мембраноатакующий комплекс. Лектиновый путьтакже происходит без участия антител. Он инициируется особым маннозосвязывающим белком сыворотки крови, который после взаимодействия с остатками маннозы на поверхности микробных клеток катализирует С4. Дальнейший каскад реакций сходен с классическим путем. В процессе активации комплемента образуются продукты протеолиза его компонентов – субъединицы С3а и С3b, С5а и С5bи др, которые обладают высокой биологической активностью. Например С3а и С5а принимают участие в анафилактических реакциях, являются хемоаттрактантами, С3b- играет роль в опсонизации объектов фагоцитоза. Т.о. система комплемента обладает многосторонней биологической активностью и вносит огромный вклад в процесс элиминации инфекционных агентов из организма.

Тесты по выявлению комплемента подразделяются на 2 типа. Определение общей гемолитической активности – принцип основан на лизисе эритроцитов сенсибилизированными АТ в присутствии комплемента. Инкубируя такие эритроциты с различным разведением комплемента, можно провести его полуколичественное определение. За единицу количества комплемента принимают активность, необходимую для гемолиза 50% эритроцитов. И выявление активности комплемента его отдельных компонентов с помощью ИФА.

При исследовании фекалий больного с диареей была выделена чистая культура возбудителя – грамотрицательные мелкие одиночные палочки. На агаре Эндо образовывали ярко-красные колонии, на агаре Плоскирева – бесцветные полупрозрачные колонии, в питательном бульоне давали равномерную муть. Штамм биохимически оказался очень активным , ферментировал глюкозу и лактозу с выделением кислоты и газа, сахарозу, маннит и мальтозу. Какие микроорганизмы обладают подобными свойствами? Достаточно ли данных для идентификации культуры и постановки диагноза? Какие методы исследования, кроме использованных можно предложить?

Ответ: Подобными свойствами обладают бактерии семейства энтеробактерий, род эшерихии, вид эшерихия коли. Нет, данных не вполне достаточно для постановки диагноза. Необходимо провести серотипирование:

· Ориентировочная реакция агглютинации на стекле со смесями ОВ-сывороток;

· Ориентировочная реакция агглютинации на стекле с моновалентными типоспецифическими ОВ-сыворотками;

· Развернутая реакция агглютинации с моновалентной типоспецифической ОВ-сывороткой и тогда можно будет дать окончательный ответ.

3. Состав и применение туберкулина.

Ответ: Очищенный туберкулин в стандартном разведении представляет собой смесь фильтратов убитых нагреванием культур микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего видов, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром для наркоза, растворенных в фосфатно-буферном растворе с твином-80 в качестве стабилизатора и фенолом в качестве консерванта.
Препарат выпускают в ампулах в виде раствора, содержащего в 0,1 мл 2 туберкулиновые единицы (ТЕ). Препарат имеет вид бесцветной прозрачной жидкости.

Назначение. Препарат предназначен для массовой туберкулинодиагностики, с целью:
а) с целью отбора контингента для ревакцинации БЦЖ, а также перед первичной вакцинацией детей в возрасте 2 месяца и более.
б) для диагностики туберкулеза, в том числе для раннего выявления начальных и локальных форм туберкулеза у детей и подростков.
в) для определения инфицирования микобактериями туберкулеза.

Способ применения и дозировка. Применяют для постановки внутрикожной пробы Манту Препарат вводят строго внутрикожно. Пробу Манту ставят пациентам обязательно в положении сидя, т.к. у эмоционально лабильных лиц инъекция может стать причиной обморока. Для проведения внутрикожной пробы применяют однограммовые туберкулиновые шприцы разового использования с короткими тонкими иглами.

Экзаменационный билет №5