Иммунная система человека. Центральные и периферические органы иммунной системы. Основные принципы и механизмы функционирования иммунной системы.
Экзаменационный билет №1
У больного с подозрением на острую форму бруцеллеза была взята кровь и засеяна на питательный бульон, поставлена реакция Райта. Через сутки питательная среда осталась стерильной, реакция Райта отрицательна. На этом основании диагноз «бруцеллез» был снят. Какие методы исследования были применены? Достаточно ли обоснованы выводы врача?
Ответ: Было проведено бактериологическое исследование и серодиагностика. Бруцеллы характеризуются замедленным ростом на питательных средах, посевы инкубируют не менее 3х недель при температуре 37 градусов, а в данном случае всего сутки. В сыворотке больного бруцеллезом накапливаются агглютинирующие (вначале IgM, затем IgG), неполные блокирующие (IgA, IgG) и опсонические (IgG) антитела. Для их выявления с диагностической целью используют реакцию Райта (развернутая агглютинация). Райта реакция— реакция агглютинации бруцелл (убитых нагреванием) сывороткой крови больного бруцеллезом. Положительной реакция Райта считается в разведении сыворотки от 1 : 200 и выше. В диагностических титрах она обнаруживается с 10—11-го дня болезни, учет результатов через 20-24ч после термостата. Бактериологический метод трудоемок, длителен, возможен лишь в специальных лабораториях, однако для диагноза бруцеллёза имеет решающее значение. Поэтому можно сделать вывод, что выводы врача были не достаточно обоснованы.
Состав и применение Иммуноглобулина человека нормального
Ответ:Иммуноглобулин человека нормальный.
Состав – 10%-ный раствор иммунологически активной фракции сыворотки крови человека. Содержание иммуноглобулина G составляет не менее 97% от общего белка. Препарат не содержит биологически активных примесей, консервантов и антибиотиков. Вирусологически безопасен. Получен из плацентарной или венозной крови человека. Содержит специфические антитела против возбудителей многих инфекционных заболеваний, в том числе возбудителей коклюша. Применяют для создания пассивного иммунитета с целью профилактики и лечения коклюша.
Выпускается в ампулах по 1,5 мл в жидком виде.
Назначение – для профилактики гепатита А, кори, гриппа, коклюша, менингококковой инфекции, полиомиелита, повышения резистентности организма в период реконвалесценции после инфекционных заболеваний. Действующим началом препарата являются иммуноглобулины, обладающие активными антителами различной специфичности. Способ применения и дозировка. Препарат вводят внутримышечно. Доза и кратность введения зависит от показаний к применению.
Экзаменационный билет №2
В гнойном материале, полученном от больного микроскопически выявлены грамотрицательные диплококки, вызывающие незавершенный фагоцитоз. При посеве на селективные среды (КДС, сывороточный агар) наблюдали рост колоний, напоминающих капли росы. Выделенная чистая культура возбудителя обладала низкой ферментативной активностью (ферментировала только глюкозу). Какой возбудитель был выделен? Какие экспресс-методы диагностики можно было использовать? (Гонококки)
Метод – экспресс: применяют встречный иммуноэлектрофорез. В качестве антигенов берут отделяемое из мочеиспускательного канала или шейки матки обследуемых. Источником антител служит гипериммунная антигонококковая сыворотка.
Ответ: Возбудитель- гонококк ( Neisseria gonorrhoeae). Для диагностики применяют бактериоскопический ( окр.по Граму и метилен.синим),бактериологический (проводят когда гонококки в мазках не обнаруживают или находят атипичные, измененные формы), и серологический (используют при хронической гонорее, при отсутствии у больного выделений. Проводят РСК по Борде-Жангу, которая бывает положительной с 3-4 недели болезни. В качестве АГ для РСК применяют гоновакцину или АГ из убитых гонококков) методы. Метод – экспресс: применяют встречный иммуноэлектрофорез. В качестве антигенов берут отделяемое из мочеиспускательного канала или шейки матки обследуемых. Источником антител служит гипериммунная антигонококковая сыворотка.
(Суть метода встречного иммуноэлектрофореза заключается в следующем:
- исследуемые антигены и смесь антител помещают в лунки, расположенные на противоположных концах пластины с гелем;
- вдоль линии, соединяющей лунки, пропускают постоянный электрический ток;
- в электрическом поле антитела и антигены быстро перемещаются по направлению друг к другу;
- в месте связывания антигенов с антителами образуются линии преципитации.
Встречный иммуноэлектрофорез применяют, когда антигены и антитела обладают разной электрофоретической подвижностью. Этот метод позволяет быстро определить антитела в пробе и применяется в экспресс диагностике инфекционных заболеваниях.)
Экзаменационный билет №3
Экзаменационный билет №4
При исследовании фекалий больного с диареей была выделена чистая культура возбудителя – грамотрицательные мелкие одиночные палочки. На агаре Эндо образовывали ярко-красные колонии, на агаре Плоскирева – бесцветные полупрозрачные колонии, в питательном бульоне давали равномерную муть. Штамм биохимически оказался очень активным , ферментировал глюкозу и лактозу с выделением кислоты и газа, сахарозу, маннит и мальтозу. Какие микроорганизмы обладают подобными свойствами? Достаточно ли данных для идентификации культуры и постановки диагноза? Какие методы исследования, кроме использованных можно предложить?
Ответ: Подобными свойствами обладают бактерии семейства энтеробактерий, род эшерихии, вид эшерихия коли. Нет, данных не вполне достаточно для постановки диагноза. Необходимо провести серотипирование:
· Ориентировочная реакция агглютинации на стекле со смесями ОВ-сывороток;
· Ориентировочная реакция агглютинации на стекле с моновалентными типоспецифическими ОВ-сыворотками;
· Развернутая реакция агглютинации с моновалентной типоспецифической ОВ-сывороткой и тогда можно будет дать окончательный ответ.
3. Состав и применение туберкулина.
Ответ: Очищенный туберкулин в стандартном разведении представляет собой смесь фильтратов убитых нагреванием культур микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего видов, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром для наркоза, растворенных в фосфатно-буферном растворе с твином-80 в качестве стабилизатора и фенолом в качестве консерванта.
Препарат выпускают в ампулах в виде раствора, содержащего в 0,1 мл 2 туберкулиновые единицы (ТЕ). Препарат имеет вид бесцветной прозрачной жидкости.
Назначение. Препарат предназначен для массовой туберкулинодиагностики, с целью:
а) с целью отбора контингента для ревакцинации БЦЖ, а также перед первичной вакцинацией детей в возрасте 2 месяца и более.
б) для диагностики туберкулеза, в том числе для раннего выявления начальных и локальных форм туберкулеза у детей и подростков.
в) для определения инфицирования микобактериями туберкулеза.
Способ применения и дозировка. Применяют для постановки внутрикожной пробы Манту Препарат вводят строго внутрикожно. Пробу Манту ставят пациентам обязательно в положении сидя, т.к. у эмоционально лабильных лиц инъекция может стать причиной обморока. Для проведения внутрикожной пробы применяют однограммовые туберкулиновые шприцы разового использования с короткими тонкими иглами.
Экзаменационный билет №5
Экзаменационный билет №6
В инфекционное отделение поступил больной с подозрением на сыпной тиф (11 сутки заболевания). Какой метод исследования следует применить для установления диагноза? Как отдифференцировать текущее заболевание от перенесенного в прошлом?
Ответ: Необходимо провести серологическое исследование (определение специфических антител в крови). С этой целью применяют РСК, РА,РНГА,РИФ,ИФА. Так как у больного уже идет 2-я неделя заболевания, то это исследование будет обосновано, так как на 1-ой неделе заболевания у больных невозможно выявить специфические антитела. (сыпь появляется ко 2 неделе) максимальных величин титры антител достигают на 15-30 сутки при отсутствии лечения антибиотиками. Отличить текущее заболевание от перенесенного в прошлом можно, если использовать непрямую реакцию иммунофлюоресценции, которая позволяет дифференцировать антитела, появляющиеся при возникновении заболевания (IgM), от циркулирующих после перенесенного сыпного тифа (IgG).
Экзаменационный билет №7
Антигены гистосовместимости
На цитоплазматических мембранах практически всех клеток обнаруживаются антигены гистосовместимости. Большая часть из них относится к системе главного комплекса гистосовместимости или МНС. Антигены гистосовместимости играют ключевую роль в осуществлении специфического распознавания свой-чужой и индукции приобретенного иммунного ответа. Они определяют совместимость органов и тканей при трансплантации в пределах одного вида, генетическую рестрикцию (ограничение) иммунного реагирования и другие эффекты.
МНС имеет сложную структуру и высокую полиморфность. Это гликопротеиды. Их отдельные фрагменты имеют структурную гомологию с молекулами иммуноглобулинов и поэтому относятся к единому суперсемейству. Различают два класса: МНС 1 класса индуцирует преимущественно клеточный иммунный ответ, а МНС 2 класса - гуморальный. МНС 1 класса состоит из двух полипептидных цепей: тяжелой альфа-цепи и легкой бета-цепи. Альфа- цепь обладает высокой сорбционной способностью по отношению к пептидам. Это свойство определяется альфа1 и альфа2 доменами формирующими так называемую «щель Бьоркмана» - гипервариабельный участок ответственный за сорбцию и презентацию молекул антигена.
Для МНС 1 класса характерна высокая скорость биосинтеза(6часов). Типирование индивидуума HLA 1 класса (то же что МНС 1 класса ассоциированный с лейкоцитами) проводится на лимфоцитах серологическими методами - в реакции микролимфоцитолиза со специфическими сыворотками. Используют поликлональные антитела, обнаруживаемые в сыворотки крови многорожавших женщин, пациентов, получавших массивную гемотрансфузию, а также моноклональные. Каждый человек строго уникален по набору антигенов гистосовместимости. Основная роль HLA 1 класса состоит в том, что они определяют биологическую индивидуальность (биологический паспорт) и являются маркерами «своего» для иммунокомпетентных клеток.
В структуре МНС 2 класса есть отличия. Во первых они имеют более сложную структуру. Во вторых щель Бьоркмана в МНС 2 класса образована одновременно обеими цепочками. Она вмещает больший по размеру олигопептид причем последний полностью скрывается в щели и в таком состоянии не обнаруживается специфическими антителами. В третьих включает в себя пептид захваченный из внеклеточной среды путем эндоцитоза а не синтезированный самой клеткой. В четвертых МНС 2 класса экпрессируется на поверхности ограниченного числа клеток: дендритных, лимфоцитах, тучных, эпителиальных и эндотелиальных клетках. Наличие и тип антигенов гистосовместимости 2 класса определяют в серологических и клеточных реакциях иммунитета (смешанная культура лимфоцитов). Биологическая роль - МНС 2 класса участвует в индукции приобретенного иммунного ответа. Фрагменты молекулы антигена экспрессируются на цитоплазматической мембране особой группы клеток кот получила название антигенпрезинтирующих клеток (АПК). Наиболее активная АПК - дендритная клетка, затем В-лимф и макрофаг.
СD-антигены
На мембране клеток обнаруживаются групповые антигены, объединяющие клетки, имеющие сходные морфофункциональные характеристики или находящиеся на определенной стадии развития. Это антигены кластеров дифференцировки клетки или CD-антигены. Это гликопротеиды, некоторые относятся к суперсемейству Ig. CD- антигены используют для выявления отличий в группах клеток из которых наиболее широкое распространение получили маркеры иммунокомпетентных клеток. Например, CD3 экспрессируются на популяции Т-лимфоцитов, CD8 – цитотоксических Т-лимфоцитов Т-киллеров. CD-антигены имеют диагностическое значение в клинике иммунодефицитных состояний. Типирование осуществляется в серологических реакциях с использованием моноклональных антител (цитотоксический тест и т.д.)
2. При исследовании сыворотки крови больного с подозрением на сыпной тиф обнаружены следующие результаты РСК:
| Иссл. сыворотка | Разведение сыворотки | ||||||||||
| 1:100 | 1:200 | 1:300 | 1:400 | 1:500 | 1:600 | 1:700 | 1:800 | 1:1000 | КС | КА | |
| Необработ | + | + | + | + | + | + | + | + | - | - | - |
| Обработ. 2-меркап- тоэтанолом | + | + | + | + | - | - | - | - | - | - | - |
Как вы расцените результаты исследования?
Ответ: Диагностические титры РСК 1: 640 и 1: 1280 на 12—20-й день болезни. В данной задаче диагностический титр 1: 800. После обработки 2-меркаптоэтанолом он стал
1: 400. Следовательно, в сыворотке крови больного много иммуноглобулинов М, что свидетельствует о первичном заболевании.
Экзаменационный билет №8
Иммуноглобулины G, IgG
Иммуноглобулины G – это мономеры, включающие 4 субкласса (IgGl – 77%; IgG2 – 11%; IgG3 – 9%; IgG4 – 3%), которые отличаются друг от друга по аминокислотному составу и антигенным свойствам. Их содержание в сыворотке крови колеблется от 8 до 16,8 мг/мл. период полураспада составляет 20-28 дней, а синтезируется в течение суток от 13 до 30 мг/кг. На их долю приходится 80% от общего содержания ИГ. Они защищают организм от инфекций. Антитела субклассов IgGl и IgG4 специфически связываются через Fc-фрагменты с возбудителем (иммунное опсонирование), а благодаря Fc- фрагментам взаимодействуют с Fc-рецепторами фагоцитов (макрофагов, полиморфноядерных лейкоцитов), способствуя тем самым фагоцитозу возбудителя. IgG4 участвует в аллергических реакциях и не способен фиксировать комплемент.
Антитела класса IgG играют основополагающую роль в гуморальном иммунитете при инфекционных заболеваниях, вызывая гибель возбудителя с участием комплемента и опсонизируя фагоцитарные клетки. Они проникают через плаценту и формируют антиинфекционный иммунитет у новорожденных. Они способны нейтрализовать бактериальные экзотоксины, связывать комплемент, участвовать в реакции преципитации.
Иммуноглобулины М, IgM
Иммуноглобулины М – это наиболее «ранние» из всех классов ИГ, включающие 2 субкласса: IgMl (65%) и IgM2 (35%). Их концентрация в сыворотке крови колеблется от 0,5 до 1,9 г/л или 6% от общего содержания ИГ. За сутки синтезируется 3-17 мг/кг, а период их полураспада составляет 4-8 суток. Они не проникают через плаценту. IgM появляется у плода и участвует в антиинфекционной защите. Они способны агглютинировать бактерий, нейтрализовать вирусы, активировать комплемент. IgM играют важную роль в элиминации возбудителя из кровеносного русла, в активации фагоцитоза. Значительное повышение концентрации IgM в крови наблюдается при ряде инфекций (малярия, трипаносомозе) как у взрослых, так и у новорожденных. Это показатель внутриутробного заражения возбудителя краснухи, сифилиса, токсоплазмоза, цитомегалии. IgM – это антитела, образующиеся на ранних сроках инфекционного процесса. Они отличаются высокой активностью в реакциях агглютинации, лизиса и связывания эндотоксинов грамотрицательных бактерий.
Иммуноглобулины A, IgA
Иммуноглобулины А – это секреторные ИГ, включающие 2 субкласса: IgAl (90%) и IgA2 (10%). Содержание IgA в сыворотке крови колеблется от 1.4 до 4.2 г/л или 13% от общего количества ИГ; ежедневно синтезируется от 3 до 50 мкг/кг. Период полураспада антител составляет 4-5 суток. IgA содержится в молоке, молозиве, слюне, в слезном, бронхиальном и желудочно-кишечном секрете, желчи, моче. В состав IgA входит секреторный компонент, состоящий из нескольких полипептидов, который повышает устойчивость IgA к действию ферментов. Это основной вид ИГ, участвующих в местном иммунитете. Они препятствуют прикреплению бактерий к слизистой, нейтрализуют энтеротоксин, активируют фагоцитоз и комплемент. IgA не определяется у новорожденных. В слюне он появляется у детей в возрасте 2 месяца., причем первым обнаруживается секреторный компонент SC. И только позднее полная молекула SigA. Возраст 3 мес. Многими авторами определяется как критический период; этот период особенно важен для диагностики врожденной или транзиторной недостаточности местного иммунитета.
Иммуноглобулины Е, IgE
Иммуноглобулины Е — это мономеры, содержание которых в сыворотке крови ничтожно мало – 0.00005-0,0003 г/л или 0.002% от общего количества ИГ. За сутки синтезируется 0,02мг/кг, а период их полураспада в сыворотке крови составляет 2-3 дня, а в коже -9-14 дней. К классу IgE относится основная масса аллергических антител – реагинов. Уровень IgE значительно повышается у людей, страдающих аллергией и зараженных гельминтами. IgE связывается с Fc-рецепторами тучных клеток и базофилов. 11ри контакте с аллергеном образуются мостики «IgE-aHTHreH-IgE», что сопровождается поступлением ионов кальция в клетку-мишень, активацией в ней биохимических процессов и выделением БАВ. Вызывающих аллергические реакции немедленного типа. Эозинофильный хемотаксичеекий фактор, выделяемый тучными клетками, способствует аккумуляции эозинофилов и деструкции гельминтов. Предполагается также, что IgE, покрывая паразита, аккумулирует макрофаги благодаря Fc-рецепторам этих клеток.
Иммуноглобулины D, IgD
Иммуноглобулины D – это мономеры; их содержание в крови составляет 0,03-0.04 г/л или 1% от общего количества ИГ; в сутки их синтезируется от 1 до 5 мг/кг, а период полураспада колеблется в пределах 2-8 дней. IgD участвуют в развитии местного иммунитета, обладают антивирусной активностью, в редких случаях активируют комплемент. Плазматические клетки, секретирующие IgD, локализуются преимущественно в миндалинах и аденоидной ткани. IgD выявляются на B-клетках и отсутствуют на моноцитах, нейтрофилах и Т-лимфоцитах. Полагают, что IgD участвуют в дифференцировке В-клеток, способствуют развитию антиидиотипического ответа, участвуют в аутоиммунных процессах.
При исследовании фекалий больного с подозрением на брюшной тиф (1 неделя заболевания) чистую культуру выделить не удалось. На основании чего диагноз брюшной тиф был снят. Какой метод исследования был использован? В чем заключается методическая ошибка врача? Какой дополнительный метод исследования следует применить для уточнения диагноза?
Ответ: Был использован бактериологический метод.
Методическая ошибка врача –необходимо было взять кровь на бактериологическое исследование изасеять на 10- 20%-ный желчный бульон или среду Раппопорта, так как идет только 1 неделя заболевания. Возбудитель сыпного тифа появляется в испражнениях и моче только со 2-3 недели заболевания (засевают на среды Мюллера, висмут-сульфитный агар).
Дополнительный метод исследования – серологический метод с постановкой РНГА. Для серологической диагностики брюшного тифа используется с 5-7-го дня заболевания РНГА (реакция непрямой гемагглютинации) с эритроцитарными диагностикумами (О, Н, Vi-антигенами). Положительной считается реакция в титре 1: 200 и выше. Учитываются результаты в парных сыворотках, взятых в динамике заболевания, диагностически значимым считается четырехкратное и большее нарастание титра антител. Для выявления бактерионосителей используют РНГА с Vi-антигеном.
Экзаменационный билет №9
Клетки ИС
Т- лимфоциты - самая многочисленная (60%) популяция клеток ИС, которая в свою очередь разделяется на субпопуляции. Отвечают за развитие клеточного иммунитета. Хелперы и супрессоры являются иммунорегуляторными клетками, а киллеры и эффекторы ГЗТ- эффекторными. Т - киллеры разрушают инфицированные клетки и клетки опухолей. Существует еще субпопуляция т.н. естественных киллеров (ЕК), они имеют CD56/57+. Это большие гранулярные клетки,вызывают лизис клетки.
В- лимфоциты (15-20%) являются более гомогенной популяцией, отвечают за развитие гуморального иммунитета. Стимулированные В - лимфоциты называют плазмацитами, они вырабатывают иммуноглобулины.
Моноциты (CD16+) - являются предшественниками тканевых макрофагов. Стадии дифференцировки: монобласт R промоноцит R моноцит крови R тканевой макрофаг.
Макрофаги - перитонеальные, легочные, купферовские клетки, клетки Лангерганса, мезангиальные клетки почек, остеокласты, клетки микроглии и др. в формировании фагоцитарной реакции, гуморального иммунитета, одна из важнейших функций - "презентация" антигенов.
Нейтрофилы, базофилы и эозинофилы - играют определенную роль в фагоцитозе условно-патогенных бактерий, развитии аллергий. Активированной формой базофилов являются т.н. тучные клетки (mast cells) - их еще называют тканевыми базофилами. Они принимают участие в иммунном ответе аллергического характера.
Фибробласты и эпителиальные клетки - являются микроокружением лимфоидных органов, участвуют в локализации микроорганизмов и воспалительных процессов (образование гранулем), вырабатывают фибробластный интерферон.
Клетки АПК. В периферической лимфоидной ткани имеются типы специализированных клеток, которые способны усваивать антиген и представлять его в иммуногенной форме на своей поверхности для распознавания. В основном это макрофаги , дендритные клетки и В- клетки. Все они получили название антигенпрезинтирующих клеток. Функция этих типов клеток - представление ( презентация ) антигенных пептидов в комплексе с молекуламиМНС, т.е. придание проникшему антигену иммуностимулирующих свойств.
Таким образом, антигенпрезентирующие клетки, т.е. клетки, представляющие антиген - это гетерогенная популяция лейкоцитов с весьма выраженной иммуностимулирующей активностью.
Определенные АПК играют центральную роль в индукции функциональной активности хелперных Т-клеток, какие-то взаимодействуют с другими клетками иммунной системы. Антигенпрезентирующие клетки локализованы преимущественно в коже, лимфатических узлах, селезенке, эпителиальном и субэпитеальном слоях большинства слизистых оболочек и в тимусе.
Относящиеся к ним клетки Лангерганса из кожи и других плоскоэпителиальных покровов тела мигрируют в виде "вуалевидных" клеток (с характерными, напоминающими теннисные ракетки, бербековыми гранулами в цитоплазме) по афферентным лимфатическим сосудам в паракортикальные области регионарных лимфоузлов.
У мужчины, занимавшегося охотой в зоне природного очага чумы, появилась головная боль, повысилась температура, стали болезненными лимфоузлы в области шеи. При микроскопировании мазков из крови больного, возбудитель чумы не обнаружен. Достаточно ли данных для того, чтобы отвергнуть диагноз «чума»?
Ответ: Данных недостаточно, так как микроскопическое исследование дает только ориентировочное заключение (по морфологии нельзя точно сказать, что это возбудитель чумы Yersinia pestis(энтеробактерия) – овоидная палочка с биполярным окрашиванием, возможна эта другая иерсиния).
Для подтверждения диагноза «чума» необходимо также произвести посев материала на пит. среды (мясопептонный агар, элективные среды, Бульон Хоттингера) – бактериологический метод ( окончательный диагноз). Инкубацию посевов проводят при 28 °С. В положительных случаях через 12 ч появляются колонии в виде характерных "кружевных платочков".
Ставят биопробы на морских свинках и белых мышах.Для постановки биологической пробы животных заражают внутрибрюшинно. подкожно или внутрикожно, а в случае загрязнения материала посторонней микрофлорой втиранием в скарифицированную кожу. В зависимости от способа заражения и степени чувствительности к возбудителю животные погибают от чумы на 3—9-й день после инфицирования, изменения во внутренних органах в виде геморрагического воспаления, кровоизлияниям мазках- отпечатках из органов -множество чумных микроорганизмов; посевы инфицированных органов и крови дают обильный рост возбудителя.
В качестве экспресс-диагностики используют РИФ, позволяющую поставить предварительный диагноз уже через 2 часа. Метод ускоренной диагностики чумы основан на свойстве чумного бактериофага быстро (30—40 мин) размножаться в присутствии микроба чумы.
Серологическое исследование проводится постановкой РНГА, ИФА, РН антитела.
Экзаменационный билет №10
У больного с обширной инфицированной раной для анализа было взято раневое отделяемое. Исследуемый материал засеяли на элективные плотные и жидкие среды. Через сутки в посеве на плотную среду обнаружили среднего размера желтоватые выпуклые колонии с ровными краями и блестящей поверхностью. В пробирках с бульоном образовалась равномерная муть. В окрашенных по Граму мазках обнаружили небольшие (по 2-3 бактерии) группы шаровидных бактерий, окрасившихся в сине-фиолетовый цвет. Какой метод диагностики был применен? Какие элективные среды использовали? К какой группе может быть отнесен выделенный возбудитель?
Ответ: - Использовались бактериоскопический и бактериологический методы.
- При выделении стафилококков из исследуемого материала, содержащего различные микроорганизмы, используются элективные среды: молочно-солевой агар, желточно - солевой агар Чистовича. Повышенные концентрации хлорида натрия (5—10%), не мешая росту стафилококков, подавляют размножение сопутствующей флоры. Использовались бактериоскопический и бактериологический методы. На мясопептонном бульоне дают диффузный рост, на плотных средах образуют колонии диаметром 2—3 мм. круглые, с ровными краями, слегка выпуклые. Цвет колоний различен, в зависимости от образуемого пигмента: золотистый, лимонно-желтый, палевый.
- Возбудитель: Стафилококки имеют шаровидную форму от 0.6 до 1 мкм в диаметре. В чистой культуре располагаются в виде скоплений, напоминающих гроздья винограда. В мазках из гноя встречаются одиночные кокки, иногда диплококки и небольшие скопления (рис. 30. а). Стафилококки неподвижны, не образуют капсул и спор.
Экзаменационный билет №11
Развитие, дифференцировка.
Важную роль в их развитии играет тимус. Дифференцировка Т-лимфоцитов начинается уже в период эмбрионального развития. В вилочковой железе создается особое микроокружение за счет тимического эпителия, влияющее на дифференцировку Т – лимфоцитов. Предшественники Т-лимфоцитов заселяют вилочковую железу, пролиферируют там, превращаются в Т-лимфоциты, а затем мигрируют в тимусзависимые зоны периферические органы иммунной системы, где приобретают способность к специфической активации. Под влиянием стромальных элементов лимфоциты приобретают способность реагировать на стимулы микроокружения, т.е. на тимические факторы, и синтезировать специфические маркеры тимоцитов и Т-лимфоцитов.
Процесс пролиферации лимфоцитов в вилочковой железе протекает очень интенсивно, но не все клетки мигрируют из вилочковой железы в виде Т-лимфоцитов: большинство из них там же погибает. Полагают, что причиной их гибели служит присоединение антигена к антигенспецифическому рецептору этих клеток. Специфическое взаимодействие с антигеном служит началом процесса дифференцировки в зрелые и долгоживущие клетки, составляющие большую часть рециркулирующих Т-лимфоцитов. Т-лимфоцит. Аналогично B-лимфоциту, несет на своей поверхности специфические рецепторы для распознавания антигенов.
Т-хелперы.
Это субпопуляция Т-лимф которые выполняют регуляторную функцию. На наружной поверхности их цитоплазматической мембраны определяют молекулы CD4, а также αβТСR к антигену, представленному в комплексе с МНС 2 класса. При помощи специфического рецептора Т-хелпер анализирует информацию, передаваемую ему АПК. Рецепция антигена Т-хелпером т.е. анализ его чужеродности – это сложный процесс. Ему способствуют множество факторов: молекула CD3, молекулы адгезии стабилизирующие межклеточный контакт. Продуктивная рецепция стимулирует Т-хелпер к продукции широкого спектра иммунноцитокинов, при помощи которых он управляет биологической активностью множества клеток, вовлеченных в иммунный ответ. Различают Т1 и Т2 хелперы. Т1-хелпер образует ИЛ-2, -3, γ- ИФН, фактор некроза опухолей и другие необходимые для развития клеточного иммунного ответа, ГЗТ, иммунного воспаления. Потребность в этой клетке определяет активированный макрофаг, естественный и Т-киллеры, синтезирующие ИЛ-12 и γ- ИФН. Т2-хелпер продуцирует ИЛ-4,5,6,10,13 и т.д. которые поддерживают гуморальный иммунитет а также ГНТ.В организме поддерживается баланс Т1-/Т2-хелперов.Он необходим для развития адекватного иммунного ответа. Сами клетки находятся в конкуретных взаимоотношениях. В организме новорожденных преобладают Т2-хелперы. Нарушения заселения ЖКТ нормальной микрофлоры тормозит развитие субпопуляции Т1-хелперов и ведет к аллергизации организма.
Т-киллеры
Это субпопуляция Т-лимфоцитов эффекторов. На поверности цитоплазматической мембраны Т-киллера определяются молекулы CD8, а также αβТСR к антигену в комплексе с МНС1 класса по которому свои клетки отличаются от чужих. Т-киллер анализирует клетки собственного организма в поисках измененной т.е. отличной от собственной, структуры комплекса аниген-МНС1класса. Мутантные клетки, клетки пораженные вирусом или клетки аллогенного трансплантата несут на своей поверхности такие признаки генетической чужеродности. Поэтому они являются мишенью Т-киллера. Т-киллер устраняет клетки-мишени путем антителонезависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности для чего синтезирует ряд токсических субстанций:перфорин,гранзимы и гранулизин.Перфорин-токсический белок, который синтезируют цитотоксические лимфоциты-Т-киллеры и естественные киллеры.Обладает неспецифическим действием.Вырабатывается только зрелыми активированными клетками.Перфорин образуется в виде растворимого белка-предшественника и накапливается в цитолазме в гранулах которые сосредотачиваются около рецепторов, связавшегося с клеткой-мишенью. Содержимое гранулвысвобождается в узкую щель, образованную тесным контактом цитотоксическиго лимфоцита и клетки мишени. За счет гидрофобных участков перфорин встраивается в цитоплазматическую мембрану клетки-мишени и полимеизуется в трансмембранную пору. Образовавшийся дефект цитоплазматической мембраны может вызвать осмотический лизис клетки-мишени(некроз) и обеспечить проникновение в нее гранзимов гранулизина. Гранзимы
Синтезируются зрелыми активированными цитотоксическими лимфоцитами.Различают три типа:А В и С. После синтеза гранзимы накапливаются в гранулах подобно перфорину и вместе с ним выделяются из клетки в синаптическую щель. В клетку-мишень проникают через поры, образованные порфином. Мишенью для гранзимов являются внутриклеточные специальные ферменты, инициирующие апоптоз которые обладают широкой нуклеазной активностью. Таким образом гранзимы индуцируют гибель клетки путем апоптоза и санацию организма от зараженных клеток. Гранулизин-эффекторное вещество с ферментативной активностью. Способно запускать в клетках-мишенях апоптоз, повреждая мембрану их митохондрий. Т-киллер обладает огромным биологическим потенциалом-его называют «серийным убийцей».За короткий срок он может уничтожить несколько клеток мишеней.
Естественные киллеры(ЕК)
Это главный защитник макроорганизма от внутриклеточных паразитов. Он срабатывает задолго до активации адаптивного иммунитета. Вместе с тем, биологические возможности весьма ограничены. «Кровяные» ЕК – это активно циркулирующие в кровотоке клетки. Обнаруживаются в красной пульпе селезенке. При цитокиновой активации синтезирует накапливая в гранулах перфорин,гранзимы и гранулизин. Эффекторная функция кровяных ЕК в отношении меченных иммуноглобулинами клеток реализуется в антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности. Мишенями являются клетки инфицированные внутриклеточными паразитами и аллогенные клетки трансплантата. «Тканевые» ЕК ведут более оседлый образ жизни и обнаруживаются в большом количестве в печени и децидаульной оболочке беременной матки.Реалзуется эффекторный механизм – антителонезависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность. Клетками-мишенями являются лимфоциты активированные пищевыми антигенами или аллоантигенами плода.
В поликлиническое отделение обратилась женщина с жалобами на периодическую диарею в течение последних трех месяцев. Других клинических проявлений заболевания не было выявлено. При опросе выяснили, что среди коллег в последнее время многие болели шигеллезной дизентерией. Принимая во внимание давность заболевания, какое исследование следует провести?
Ответ: Принимая давность заболевания, используется серологический метод (РНГА) — определение в крови специфических противошигеллезных антител. В качестве стандартных антигенов используют эритроцитарные диагностикумы из шигелл Флекснера и Зонне. Диагностическим для шигеллеза Зонне считают титр 1:100, шигеллеза Флекснера — 1:200.
Также используют бактериологический метод как основной. Он предполагает выделение возбудителя из испражнений при посевах на питательные среды, определение чувствительности к антибиотикам и должен проводиться до начала этиотропной терапии. Посев лучше делать у постели больного. Если это невозможно, то взятый материал (испражнения с патологическими примесями, за исключением крови) следует поместить в пробирку с консервирующей средой и не позже, чем через 2 ч доставить в лабораторию. Посев материала осуществляют на сложные питательные среды Плоскирева, Левина. Предварительный результат исследования может быть получен на 2-й день, окончательный - на 4-5-й день. Возбудитель: Shigella dysenteriae.
К участковому врачу в поликлиническом отделении обратилась молодая женщина с жалобами на боль в желудке и частую изжогу. Свое недомогание связывает с недавно выделенным хеликобакериозом у старших членов семьи. При эндоскопическом исследовании был выявлен эрозивный гастрит, промывные воды и желудочный сок взяли для проведения микробиологического исследования. Хеликобактер в материале от больной не обнаружили. В чем заключалась методологическая ошибка врача? Какие методы исследования следует применить для уточнения диагноза?
Ответ: Методологическая ошибка врача заключается в том, сто он неправильно взял материал для исследования. Хеликобактерии имеют тропность к эпителию ЖКТ, поэтому следовало взять биоптаты слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки.
Фиброгастроскопия с взятием биопсии с пораженных участков слизистой. Требует правильного забора, соблюдения правил транспортировки материала и зависит от качества гистологического обследования. Хорошо применять для первичного обследования с целью установления характера поражения слизистой и места локализации. После проведения курса антибактериальной терапии применение фиброгастроскопии нежелательно - доказано что даже при самой тщательной обработке зонда могут сохранится хеликобактерии
Бактериоскопический метод. Выявляют бактерии в препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином или акридиновым оранжевым. Это грамотрицательные, короткие, извитые S-образные бактерии средних размеров, подвижные, имеют 4-5 жгутиков. В фазовоконтраст