Исследования, выполняемые в бактериологической лаборатории

2.1 Клиническая микробиология (исследование биологических жидкостей и тканей организма человека)

В рамках клинической микробиологии в бактериологической лаборатории проводят разнообразные исследования крови, спинномозговой жидкости, желчи, мочи, исследование отделяемого дыхательных путей, глаз, ушей, открытых инфицированных ран, исследование кишечника на дисбактериоз, исследование на дизентерию и сальмонеллез, ЭПКП, исследование воздушнокапелъной инфекции (дифтерия, менингит, коклюш) и т.д.

Бактериологическое исследование крови на стерильность

Посев крови на стерильность выполняется для определения бактериемии, которая указывает на серьезное инфекционное заболевание. Исследование показано для выявления патогенных микроорганизмов, которые в норме отсутствуют в кровеносном русле: стрептококк, синегнойная палочка, золотистый стафилококк, энтеробактерии, дрожжевые грибы. Возможно заражение эпидермальным стафилококком. Его можно обнаружить только многократным тестированием. Микробиологические посевы имеют значение для обследования пациентов с ослабленной иммунной системой. У пациентов с ВИЧ-инфекций в крови могут быть микобактерии туберкулеза.

Сдать анализ крови на стерильность рекомендуется перед началом терапии, чтобы исключить получение ложноотрицательного результата. Посев позволяет подтвердить следующие диагнозы: сепсис, менингит, пиодермия.

Для идентификации вида бактерий изучают свойства возбудителей: морфологические, тинкториальные (способность вступать в реакции с красителями), культуральные, биохимические, токсигенные, антигенные.

Если анализ на стерильность крови подтверждают проникновение микроорганизмов, то следует учитывать риск заражения внутренних органов. Необходимость в дальнейших исследованиях определяет врач, используя данные анамнеза и диагностики.

При проведении бак посева предварительный результат получают через 3 дня, а окончательный результат может быть получен через 10 дней.

Главной целью назначения анализа на стерильность считается определение присутствия в организме патологических бактерий. После получения анализа специалист сможет подобрать необходимые лекарства и назначить эффективное лечение заболевания.

Бактериологическое исследование кала

Бактериологическое исследование кала проводится путем посева испражнений на питательные среды с целью качественного анализа и количественного определения нормальной кишечной микрофлоры, а также условно-патогенных и патогенных форм микроорганизмов. Бактериологический посев кала используется для диагностики синдрома избыточного бактериального роста в кишечнике (дисбактериоз кишечника), кишечных инфекций и контроля за эффективностью их лечения:

- количественная оценка микрофлоры (бифидо- и молочнокислые бактерии, клостридии, условно-патогенная и патогенная микрофлора, грибы) с определением чувствительности к антибиотикам и фагам;

- выявление возбудителей кишечных инфекций (шигеллы, сальмонеллы, Proteus, Pseudomonas, Yersinia enterocolitica, Campilobacter jejuni, E.coli, Candida, ротавирусы, аденовирусы).

Характеристика выявленных изменений по степеням:

- I степень характеризуется невыраженными изменениями в аэробной части микробиоценоза, при этом посторонняя микрофлора отсутствует;

- II степень характеризуется изменениями количества лакто- и бифидофлоры, параллельно проявляются количественные изменения эшерихий;

- III степень характеризуется резким снижением и даже отсутствием бифидофлоры, лактофлоры и преобладанием гемолитических стафилококков и дрожжеподобных грибов;

- IV степень характеризуется глубокими изменениями микробиоценоза: увеличением условно-патогенных микроорганизмов, появлением протея. При сдаче кала на данный анализ необходимо помнить, что прием антибиотиков или пробиотиков оказывает влияние на достоверность результата.

Бактериологическое исследование мочи

Бактериологический посев мочи (бакпосев мочи) - вид бактериологического исследования, при котором выявляются и идентифицируются микроорганизмы (чаще всего это бактерии), находящиеся в моче, определяется их концентрация. С этой целью биологический материал (моча) помещается в благоприятную для роста и развития бактерий питательную среду (агар, сахарный бульон). Если рост микроорганизмов отсутствует, то результат отрицателен. Если рост бактерий или других микроорганизмов (например, грибков) все же выявлен в такой концентрации, при которой возможно развитие инфекции, то результат бакпосева мочи считается положительным.

Концентрация (количество микроорганизмов в единице объема биоматериала) при бакпосеве мочи определяется в колониеобразующих единицах (КОЕ). Колониеобразующая единица (colony-forming unit - CFU) - одна живая микробная клетка (или группа клеток), из которой вырастает видимая колония микроорганизмов.

В случае положительного результата бакпосева мочи - идентификации выявленного возбудителя инфекции необходимо выбрать эффективный для борьбы с ним антибактериальный препарат (антибиотик). Для этого проводится определение чувствительности к антибиотикам выделенных культур микроорганизмов (антибиотикограмма). Определение чувствительности к антибиотикам исключительно важно при назначении рациональной антибактериальной терапии.

Бактериологический посев мочи (бакпосев мочи) - довольно распространенное исследование, обладающее высокой чувствительностью и специфичностью. Широко применяется анализ на бакпосев при беременности. Серьезным преимуществом является высокая точность полученных результатов.

Анализ мочи на бакпосев (бакпосев мочи) также показан для определения эффективности проводимого лечения инфекций мочевыводящей системы.

Недостатками метода (преимущественно техническими) являются относительная длительность исследования и высокие требования к забору материала. Однако с помощью бакпосева мочи можно получить информацию, которую не могут дать другие методы исследований.

Бактериологическое исследование дыхательных путей, мазок из зева и носа.

Мазок из зева берут для проведения стандартного бактериологического исследования с целью изучения микробного состава и количественного соотношения микрофлоры носоглотки. Это метод лабораторной диагностики, позволяющий выявить возбудителей инфекционно-воспалительных заболеваний верхних отделов респираторного тракта. Для определения этиологии инфекции необходимо провести бактериологическое исследование отделяемого носа и зева на микрофлору.

Мазок из носоглотки засевают на питательные среды, материал втирают тампоном в среду на небольшой площадке размером 2 кв. см., а затем с помощью бактериологической петли штрихами рассевают по всей поверхности чашки Петри. Посевы инкубируют в термостате при определенной температуре. На следующий день посевы просматривают, учитывают количество выросших колоний и описывают их характер. Пересевают отдельные колонии на селективные питательные среды для выделения и накопления чистой культуры. Микроскопическое изучение чистой культуры позволяет определить размер и форму бактерии, наличие капсулы, жгутиков, спор, отношение микроба к окрашиванию. Идентифицируют выделенные микроорганизмы до рода и вида, при необходимости проводят фаготипирование и серотипирование.

У здоровых людей на слизистой оболочке носоглотки живут бактерии, выполняющие защитную функцию. Они не доставляют дискомфорта и не вызывают развития воспаления. Под воздействием неблагоприятных эндогенных и экзогенных факторов количество этих микроорганизмов резко увеличивается, что приводит к развитию патологии.

При патологии в мазке из зева и носа можно обнаружить такие микроорганизмы: β-гемолитический стрептококк группы А, пневмококк, коринобактерии дифтерии, Haemophilis influenzae, Neisseria meningitidis, Candida albicans, Бордетелла, Листерия, Branhamella catarrhalis, Acinetobacter baumannii, Энтеробактерии.

Бактериологический посев выделений из раны.

Обследуются открытые инфицированные раны при гнойно-воспалительной хирургической патологии (инфицированные раны, ожоги, пролежни, язвы при остеомиелите, диабетическая язва стопы). Закрытые, укушенные раны, пунктаты из абсцессов для полноты диагностики подлежат обследованию на анаэробы.

Метод определения - бактериологический посев на широкий спектр питательных сред.

Выделяемые микроорганизмы: S.pyogenes, Streptococcus spp., коагулазонегативные стафилококки, S.aureus, Enterobacteriaceae, Pseudomonas spp.

Забор материала осуществляется с пораженных мест в разгар воспалительного процесса с соблюдением правил асептики.

При заболевании высевается этиологически значимый возбудитель в диагностическом титре (III и IV степени роста).

I степень роста (очень скудный рост) – единичные колонии до 10 (< 10³ КОЕ/тампон);

II степень роста (небольшое количество) – до 20 колоний (10³ КОЕ/тампон);

III степень роста (умеренное количество) – более 21, но менее 100 колоний (10⁴ КОЕ/тампон);

IV степень роста (большое количество) – более 100 колоний (> 10⁵ КОЕ/тампон).

Бактериологическое исследование отделяемого из глаз.

Посев отделяемого из глаз с определением чувствительности к антибиотикам представляет собой микробиологическое исследование, которое определяет качественный и количественный состав микрофлоры биоматериала, а также позволяет выявить условно-патогенные микроорганизмы и патогенные микроорганизмы, определить их титр и чувствительность к антибиотикам.

Для анализа используют отделяемое глаза или мазок с конъюнктивы глаз.

За две недели до анализа не стоит употреблять антибактериальные средства.

Нормальная микрофлора глаза человека состоит из совокупности микроорганизмов, которые делятся на постоянные, факультативные и случайные.

Микроорганизмы, которые способны вызывать заболевания глаз, классифицируются на непатогенные, условно-патогенные и патогенные.

Бактериологический посев отделяемого глаз на флору определяет состав микрофлоры биоматериала и выявляет патогенные микроорганизмы. Высокий титр условно-патогенных микроорганизмов и наличие патогенных микроорганизмов – показание к определению их чувствительности к антибиотикам и бактериофагам.

Данный анализ используется для определения возбудителя инфекционного заболевания глаз, назначения рациональной антибактериальной терапии и оценки ее эффективности.

Назначают бактериологический посев отделяемого глаз на микрофлору и определение чувствительности к антибиотикам при воспалительных заболеваниях глаз.

Нормальная микрофлора глаза представлена облигатными микроорганизмами и условно-патогенными микроорганизмами в низком титре. Появление патогенных микробов и значительного роста условно-патогенных бактерий говорит о том, что они являются возбудителями заболевания. При отсутствии роста в посеве материала исследование необходимо повторить, так как такой результат возможен при неправильном взятии биоматериала или нарушении его транспортировки в микробиологическую лабораторию.