Работа № 3. Экспресс-диагностика сифилиса
Методические указания
При массовом обследовании населения используют экспресс-метод обследования на сифилис. Этот метод дает значимый процент ошибки, поэтому все положительные результаты подтверждаются другими серологическими реакциями (р. Вассермана, осадочные реакции).
Цель: изучить экспресс-метод обследования на сифилис
Самостоятельная работа: поставить и учесть результат экспресс-метода серологического обследования на сифилис.
Сыворотки обследуемых | |||||
Ингредиенты | |||||
1 . Инактивированная сыворотка больного | З к | З к | З к | З к | З к |
2. Эмульсия кардиолипинового антигена | 1 к | 1 к | 1 к | 1 к | 1 к |
Ингредиенты перемешать (или встряхнуть, если реакция в планшете) | |||||
3. Физиологический раствор | 1 к | 1 к | 1 к | 1 к | 1 к |
После выпадения хлопьев, учесть результат | |||||
Примечание: для демонстрации дается эталон учета результатов.
Положительная реакция (крупные хлопья) | Слабоположительная (хлопья средней величины и мелкие) | Отрицательная (нет хлопьев) |
++++ +++ | ++ + | - |
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Работа № 4.Серологическая диагностика сифилиса
Цель: изучить современные серологические методы диагностики спирохетозов
Методические указания
а) Реакция Вассермана.Реакцию ставят по принципу реакции связывания комплемента. Отличием является то, что при постановке реакции Вассермана может быть использован неспецифический антиген - липидная вытяжка бычьего сердца. Возможность использования такого антигена объясняется тем, что в сыворотке крови больного повышается содержание глобулинов и изменяется степень их дисперсности. Глобулины, вступая в соединение с липидньми экстрактами, образуют комплекс, который связывает комплемент, и поэтому гемолиз не происходит (в гемолитической системе). Отсутствие гемолиза - положительная реакция - серологически подтверждает диагноз "сифилис". При постановке серологических реакций можно использовать специфические антигены из тканевых трепонем и культуральные.
Самостоятельная работа:учесть результат готовой реакции Вассермана, поставленной с целью выявления антител в сыворотке крови больного с подозрением на сифилис. Сделать вывод.
Направление:___________________________________________________________________
Ингредиенты:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка:
Аг1 Аг2 Аг3 КС КА КГС
Результат:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
б) Реакция иммобилизации спирохет
Методические указания
К тканевым живым трепонемам прибавляют исследуемую сыворотку больного с подозрением на сифилис. Через несколько минут трепонемы теряют способность двигаться. Методика постановки реакции: все пробирки выдерживают в анаэростате при 350С 20 часов, готовят препарат "раздавленная капля" и микроскопируют в темном поле зрения. Процент иммобилизованных трепонем определяют по формуле:
х= Тк - То х 100, где
Тк
Тк - число подвижных трепонем в контроле (с инактивированным комплементом)
То - число подвижных трепонем в опыте
Учесть результат опыта при: Тк=30, То=12
Результат: положительный - процент иммобилизации выше 50, отрицательный - ниже 20, слабо положительный, сомнительный - 30-50, 20-30.
Самостоятельная работа: учесть результат реакции иммобилизации трепонем (РИТ) с целью выявления специфических антител в сыворотке крови больного сифилисом. Сделать вывод.
Ингредиенты | Пробирки | ||
"К" | "К" | "О" | |
Сыворотка здорового | + | - | - |
Сыворотка больного | - | + | + |
Физ. р-р | + | - | - |
Комплемент инактивированный | - | + | - |
Комплемент | - | - | + |
Живые тканевые трепонемы | + | + | + |
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 6. Принципиальная схема лабораторной диагностики сифилиса
Самостоятельная работа:разобрать особенности лабораторной диагностикисифилиса. Отметить наиболее информативные методы лабораторной диагностики.
Исследуемый материал:
____________________
____________________
____________________
Работа № 7.Серологическая диагностика лептоспироза
Задача. В клинику поступил больной с лихорадочным заболеванием на 8-й день болезни. Местность, где проживал больной, неблагополучна по лептоспирозу. У больного была дважды взята кровь - в момент поступления и через неделю - и направлена на исследование для определения специфических антител с диагностикумом L. interrogans в реакции связывания комплемента.
Самостоятельная работа: учесть готовый результат РСК с парными сыворотками обследуемого с подозрением на лептоспироз. Ответить на вопросы:
1) подтвержден ли диагноз лептоспироза?
2) обосновать диагностическую значимость проведенного исследования.
1-й ряд
(8-й день
заболевания)
2-й ряд
(15-й день
заболевания)
1/1001/200 1/400 1/800 1/1600 КС КА КГС
Результат: ___________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод: ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 8.Серологическая диагностика Лайм-боррелиоза
Задача. В клинику обратился пациент, который 2 недели назад снял с себя клеща. К врачу не обращался. Через неделю после присасывания клеща образовалась кожная эритема. Предварительный диагноз: «клещевой иксодовый боррелиоз». Для подтверждения диагноза была поставлена нРИФ с сывороткой обследуемого и диагностикумом
из боррелий (B.burgdorferi).
Самостоятельная работа: разобрать принцип постановки нРИФ и учесть результат реакции на обнаружение антител в сыворотке пациента с подозрением на Лайм-боррелиоз. Сделать вывод.
Механизм:
Результат: _____________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Вывод: _______________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Подпись преподавателя ________________________________________________________
Самостоятельная работа студента во внеурочное время:
1.Классифицировать предложенные антимикробные препараты в соответствии с их назначением (профилактические, диагностические, лечебные).
1.Вакцина лептоспирозная инактивированная жидкая
2._____________________________________________________________________________
3._____________________________________________________________________________
4._____________________________________________________________________________
5._____________________________________________________________________________
6._____________________________________________________________________________
1.Лептоспирозная агглютинирующая сыворотка
2._____________________________________________________________________________
3._____________________________________________________________________________
4._____________________________________________________________________________
5._____________________________________________________________________________
6.____________________________________________________________________________