II. Исследование В-системы иммунитета.
1. Количественное изучение В-лимфоцитов:
§ в реакции розеткообразования с эритроцитами мышей (ЕАРОК);
§ в реакция розеткообразования с бараньими эритроцитами, сенсибилизированными антителами и комплементом (ЕАС-РОК) (N=10-20%);
§ по кластерам дифференцировки CD-19, 20, 22 в непрямой РИФ и ИФА.
2. Определение функциональной активности В-лимфоцитов:
§ РБТ;
§ уровень нормальных антител в реакции агглютинации (РА) с эритроцитами барана и с микробными антигенами (E.coli, стафилококки);
§ содержание сывороточных иммуноглобулинов классов G, М, А методом Манчини(реакция преципитации в геле), непрямым ИФА и РИА(N IgM=109, IgG=233 и IgA=147 МЕ/мл).
Практическое использование методов исследования иммунной системы:
1. Оценка иммунного статуса;
2. Серотипирование бактериальных и вирусных культур;
3. Серодиагностика инфекционных болезней;
4. Выявление иммунопатологических состояний;
5. Определение антигенов тканей человека: групп крови, Rh-фактора, HLA;
6. Выявление в организме человека или во внешней среде любых веществ, обладающих антигенными свойствами (гормонов, ферментов, ядов, лекарств, наркотических средств).
В настоящее время в практической деятельности часто используется рациональный подход к изучению иммунитета, когда исследования распределены на 2 этапа.
Оценка иммунного статуса:
I этап – клиническая долабораторная диагностика иммунопатологических состояний:
§ оценка иммунологического анамнеза (частота инфекционных заболеваний, характер их течения, выраженность температурной реакции, наличие очагов хронической инфекции);
§ оценка общего анализа крови (содержание лейкоцитов, в т.ч. лимфоцитов, моноцитов, сегментоядерных);
§ исследование на бактерио(вирусо-)носительство.
II этап предусматривает применение тестов 2 уровней.
Тесты первого уровня позволяют выявить грубые нарушения функций иммунной системы:
§ процентное содержание и абсолютное количество Т- и В-лимфоцитов;
§ уровень иммуноглобулинов сыворотки крови классов М, G, А, Е;
§ фагоцитарная активность нейтрофилов.
Тесты второго уровня включают углубленное иммунологическое обследование для установления регуляторных нарушений и дисфункций иммунитета:
§ определение субпопуляций Т-лимфоцитов (CD4, CD8), их соотношения;
§ функциональной активности Т- и В-лимфоцитов в РБТ и РТМЛ;
§ цитотоксическая активность лейкоцитов;
§ кожные тесты.
При диагностике различных иммунопатологических состояний перечень диагностических исследований может изменяться. Например, диагностические мероприятия при аллергических заболевания проводятся с учетом механизмов аллергической реакции, направлены на идентификацию причинного аллергена и должны включать:
§ аллергологический анамнез (наличие аллергических реакций на антибиотики, пищевые продукты, пыльцу растений и т. д.);
§ данные клинико-лабораторных исследований (лейкоцитоз, эозинофилия);
§ определение содержания общего и специфических JgE в сыворотке крови при аллергических реакциях I типа;
§ определение содержания аутоантител (антиэритроцитарные, антилейкоцитарные, антитромбоцитарные…) в сыворотке крови при аллергических реакциях II типа;
§ определение содержания комплексов АГ-АТ, циркулирующих в крови или фиксированных на тканях, при аллергических реакциях III типа;
§ проведение кожно-аллергических проб.
Кожно-аллергические пробы:
| Назначение | Тип реакции | Диагностические препараты |
| Диагностика аллергических заболеваний | ГНТ | Аллергены из пищевых продуктов, растений… |
| Выявление гиперчувствительности к лекарственным препаратам | ГНТ | Лекарственные препараты |
| Диагностика хронических инфекций и инвазий | ГЗТ | Аллергены из возбудителей заболеваний (туберкулин, бруцеллин, дизентерин и др.) |
При постановке кожно-аллергических проб наиболее часто применяют внутрикожное и накожное введение аллергена в область предплечья.
Оценка кожно-аллергических проб:
* «положительная» – при ГНТ через 20-30 минут, при ГЗТ через 24-48 часов на месте введения аллергена возникает гиперемия и образуется папула (выраженность реакции зависит от степени сенсибилизации организма);
* «отрицательная» – уколочная реакция.