Принципы диагностики и лечения дисбактериоза
На сегодня существуют следующие методы лабораторной диагностики дисбактериоза кишечника:
1. Бактериологический анализ (определение состава фекальной микрофлоры, отражающей микробный состав лишь дистальных отделов кишечника — наиболее доступный метод, однако недостаточно точный).
2. Биохимический экспресс — метод определения протеолитической активности супернатантов фекалий.
3. Высоковольтный электрофорез на бумаге для обнаружения β-аспартилглицина, β-аспартиллизина, β-аланина, 5-аминовалериановой и γ-аминомасляной кислот и др.
4. Ионная хроматография, определяющая в фекалиях биогенные амины, желчные и карбоновые кислоты, ароматические соединения.
5. Газожидкостная хроматография для определения в фекалиях летучих жирных кислот.
6. Микроскопия фекального мазка.
NB! Лабораторная диагностика дисбактериоза носит комплексный характер — т.е. параллельно проводится исследование направленные на выделение многих видов микроорганизмов, входящих в состав нормальной микрофлоры
NB! Исследование обязательно является количественным, т.е. направлено не только на установление факта присутствия, но и количества искомых микроорганизмов в исследуемом материале
Как правило, классический бактериологический анализ (прямой метод) требует наличия большого количества дорогостоящих питательных сред и относительно длительного промежутка времени (не менее 5 дней). Как отмечалось выше, только в кишечнике человека обитают около 1000 видов микроорганизмов нормальной микрофлоры, при этом соотношение анаэробов к аэробам 1000:1, из них культивируемых только 10%. Таким образом, учет всех, столь отдаленных в таксономическом отношении микроорганизмов, при классическом бактериологическом анализе практически невозможно.
Согласно ОСТ 91500.11.0004-2003 диагноз дисбактериоза кишечника основывается на результатах клинического обследования пациента и данных микробиологического исследования кала.
Поскольку дисбактериоз кишечника в ряде случаев протекает бессимптомно, решающее значение при постановке диагноза имеют микробиологические показатели.
Микробиологическими критериями дисбиоза являются:
– нарастание количества условно-патогенных микроорганизмов одного или нескольких видов в кишечнике при нормальном количестве бифидобактерий;
– нарастание одного или нескольких видов условно-патогенных микроорганизмов при умеренном снижении концентрации бифидобактерий (на 1-2 порядка);
– снижение содержания облигатных представителей микробиоценоза (бифидобактерий и/или лактобацилл) без регистрируемого увеличения количества сапрофитной или условно-патогенной микрофлоры кишечника;
– умеренное или значительное (<107) снижение содержания бифидобактерий, сочетающееся с выраженными изменениями в аэробной микрофлоре — редукцией лактобацилл, появлением измененных форм кишечной палочки, обнаружением одного или нескольких представителей условно-патогенных микроорганизмов в высоких титрах (до 107 — 108 КОЕ/г).
Снижение числа анаэробных представителей облигатной микрофлоры, обладающих высокой антагонистической активностью, создает условия для развития условно-патогенных микроорганизмов: энтеробактерий, стафилококков и грибов рода Candida.
При дисбактериозе нарушается нормальное соотношение между анаэробной и аэробной микрофлорой. Это, прежде всего, выражается в:
- снижении концентрации бифидобактерий на 1-2 порядка,
- снижении концентрации лактобактерий на 1-2 порядка,
- нарастании концентрации кишечных палочек с измененными свойствами,
- снижении концентрации нормальных кишечных палочек (< 1 млн. на 1 г фекалий) или увеличение их содержания в 1 г фекалий > 1 млрд.)
- нарастании концентрации других условнопатогенных микроорганизмов.
Косвенные экспресс методы диагностики дисбактериоза кишечника:
1) Высоковольтный электрофорез на бумаге для обнаружения β-аспартилглицина, β-аспартиллизина, β-аланина, 5-аминовалериановой и γ-аминомасляной кислот и др.
Высоковольтный электрофорез на бумаге применен для разделения не только моно -, но и олигосахаридов. Этот метод может быть использован не только для производных углеводов, содержащих заряженную группу (как, например, гексуроиовые кислоты, аминомоиосахариды, сульфаты и фосфаты моносахаридов), но и для нейтральных соединений, способных образовывать заряженные комплексы с такими электролитами, как борат, арсенит или молибдат натрия
2) Ионная хроматография, определяет в фекалиях биогенные амины, желчные и карбоновые кислоты, ароматические соединения.
Ионная хроматография — это вариант ионообменной хроматографии, включающий
ионообменное разделение ионов и кондуктометрическое определение концентрации хроматографически разделенных ионов. Поскольку высокочувствительное кондуктометрическое определение ионов возможно только при невысокой фоновой электропроводности потока жидкости, поступающей в детектор, были предложены два основных метода ионной хроматографии.