Дифференциация холерных вибрионов
| Название вибрионов | Ферментация | Тест на аце-тилме-тилкар-бинол | Агглю-тина-ция ку-риных эритро- цитов | Чувст-витель-ность к 30ЕД поли-микси-на | Гемо-лиз эрит-роци-тов бара-на | Агглютинация | ||||||
| саха-розы | ман-нозы | араби-но-зы | О1 холер-ной сыво-рот-кой | О139 холер-ной сыво-рот-кой | Огава АВ | Ина-ба АС | Гико- шима АВС | |||||
| V.cholerae O1 биовар cholerae | + | + | - | - | - | S | - | + | - | + | + | + |
| --«--eltor | + | + | - | + | + | R | ± * | + | - | + | + | + |
| V.cholerae O139 | + | + | - | + | + | R | ± | - | + | - | - | - |
* - V.cholerae O1 Hly-tox+ -эпидемический, содержит Vct –ген,
Hly+tox- неэпидемический, не содержит Vct-ген
6) Учесть, записать и зарисовать результаты пробы для обнаружения ацетилметилкарбинола (ацетоина) в глюкозо-фосфатном бульоне.
биовар cholerae  | биовар eltor |
7) Изучить и зарисовать результат определения чувствительности выделенной культуры к диагностическим холерным фагам «С» и «Еltor».
|   |
8) 
Выявить и зарисовать результат определения чувствительности выделенной культуры к полимиксину.
|   | |||
| ______________________________ | ______________________________ |
9) Произвести учет развернутой реакции агглютинации выделенной культуры с сыворотками Огава и Инаба для определения серовара.
 | | | | | | | РА с сывороткой Огава (АВ) | |
 | | | | | | | РА с сывороткой Инаба (АС) |
Сопоставить свойства исследуемой культуры вибрионов с данными таблицы и определить вид, биовар, серовар (см. таблицу).
Заключение: из исследуемого материала (испражнения, рвотные массы больного) выделен Vibrio __________, О_______, биовар _________, серовар ___________.
10. Перечислить факторы патогенности холерного вибриона:_______________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
11. Описать молекулярный механизм действия экзотоксина-холерогена: __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
12. Дополнить схему исследования материала от больного холерой.
Исследуемый материал:
Экспресс-методы
| РИФ | Реакция иммобилизации вибрионов | Генетические методы ПЦР | ||||||||||||||||||||||
| Бактериологический метод: | ||||||||||||||||||||||||
| I |  |    | ||||||||||||||||||||||
| II III |
| |  | |||||||||||||||||||||
 | | |||||||||||||||||||||||
  |   | |||||||||||||||||||||||
| Гемолиз эритроцитов |   | |||||||||||||||||||||||
| Развернутая РА с сыворотками | ||||||||||||||||||||||||
 | | | | | | | | |  | |||||||||||||||
| Огава Инаба | ||||||||||||||||||||||||
13. Изучить препараты, используемые для диагностики, лечения и профилактики холеры (диагностические сыворотки, холерные фаги, антибиотики, холерные вакцины.
14. Дать характеристику холерным вакцинам:
Анатоксин –холероген ______________________________________________
____________________________________________________________________
Комбинированная вакцина: О-Аг холерного вибриона + холероген-анатоксин ____________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________________________________________
*Таблетированная форма холерной химической бивалентной вакцины: протективные О-антигены V.cholerae сероваров Инаба и Огава +различные ферменты разработана в России, включена в национальный календарь прививок по эпидемическим показаниям.
15. Промикроскопировать фиксированный препарат из чистой культуры вакцинного штамма Bacillus anthracis, окрашенный по Граму («бамбуковая трость»), и зарисовать.
| Рис. 1. Препарат-мазок из чистой культуры вакцинного штамма Bacillus anthracis. Окраска по Граму. |
16. Изучить и зарисовать культуральные свойства B. anthracis на МПА и в МПБ.
17. Промикроскопировать демонстрационный препарат, приготовленный из культуры B. anthracis на МПА, с добавлением пенициллина, и выявить образование протопластов (тест «жемчужное ожерелье»). Препарат зарисовать.
| Рис. 4. Протопласты B. аnthracis, сформированные в результате действия пенициллина (тест «жемчужное ожерелье») |
18. Поставить реакцию термопреципитации по Асколи, учесть результаты реакции и зарисовать, дать заключение.
а б в
Рис. 3. Реакция термопреципитации по Асколи:
а – опыт (преципитирующая сибереязвенная сыворотка + исследуемый экстракт);
б – контроль АТ (преципитирующая сибереязвенная сыворотка + 0,85% раствор NaCl);
с – контроль АГ (нормальная сыворотка + исследуемый экстракт).
Заключение: в исследуемом экстракте сибиреязвенный АГ ________________
19. Изучить по таблице ключевые признаки, используемые при идентификации B. anthracis.
Таблица