Отбор проб для клинического исследования

6.1. Материал для исследования на ООВИ представляет особую опасность для лабораторных работников, а многие методики исследований этого материала затрудняют создание надежного противоэпидемического режима. В этих случаях клинические лабораторные исследования следует ограничить. Взятие проб крови для гематологических, биохимических исследований, а также для определения ее стерильности должно производиться в достаточном количестве, однократно. Всасывание крови в смесители ртом категорически запрещается (для этого необходимо пользоваться резиновой грушей). Вся работа проводится в противочумном костюме.

6.2. Взятие крови из пальца проводится непосредственно в боксе-изоляторе, где помещен больной. Копье и тампон после использования помещается в дезинфицирующий раствор (5% лизол).

Кровь с помощью груши набирают в 4 пробирки (пенициллиновые флаконы), которые закрывают резиновыми пробками. Пробирки в строго вертикальном положении помещают в металлический пенал.

6.3. Тонкие кровяные мазки на 6-ти предметных стеклах фиксируются свежей смесью Никифорова в течение 10 минут и высушиваются на воздухе.

6.4. Приготовление толстой капли. На свежеприготовленные, слегка подсушенные, тонкие кровяные мазки на трех предметных стеклах наносят по 3 толстых капли крови размером с 10-копеечную монету. Толстая капля высушивается на воздухе.

6.5. Моча в количестве 100 мл собирается в стерильную стеклянную посуду, которая плотно закрывается резиновой пробкой и заклеивается лейкопластырем.

6.6. Посуда, содержащая пробы крови, мочи обрабатывается с поверхности дезраствором (5% лизол) и помещается в металлический контейнер. Внутрь контейнера для предупреждения повреждения емкостей с забранным материалом и их опрокидывания помещают лигмин, вату или бумагу. Контейнер снаружи протирают дезраствором, передают в предбоксник, там оборачивают полотенцем, смоченным 5% лизолом, и помещают в пластиковый мешок, в ведро или бачок для передачи в клиническую лабораторию. Одновременно с материалом передаются направления для исследования. При отсутствии условий исследования материала на месте, он упаковывается, как указано в пунктах 5.9 и 5.10.

ПОРЯДОК ОДЕВАНИЯ И РАЗДЕВАНИЯ ПРОТИВОЧУМНОГО КОСТЮМА.

Противочумный костюм надевают до входа в заразное отделение или на территорию очага. Костюм необходимо надевать не спеша, в строго установленной последовательности, тщательно, чтобы в нем было удобно и безопасно работать.

ПОРЯДОК НАДЕВАНИЯ КОСТЮМА СЛЕДУЮЩИЙ: комбинезон, носки, сапоги, капюшон или большая косынка и противочумный халат. Тесемки у ворота халата, а также пояс халата завязывают спереди, на левой стороне, обязательно петлей, после чего тесемки закрепляют на рукавах. Респиратор (маску) надевают на лицо так, чтобы были закрыты нос и рот, для чего верхний край маски должен находиться на уровне нижней части орбит, а нижний – заходить на подбородок. Верхние тесемки маски завязывают петлей на затылке, а нижние на темени (по типу пращевидной повязки). Надев респиратор (маску), по бокам крыльев носа закладывают ватные тампоны и принимают все меры для того, чтобы воздух фильтровался только через маску.

Очки должны быть хорошо пригнаны и проверены на отсутствие фильтрации воздуха и на прочность, стекла – натерты специальным карандашом или кусочками сухого мыла, предупреждающими их запотевание. В местах вероятной фильтрации воздуха закладываются ватные тампоны. Затем надеваются перчатки, предварительно проверив их на целостность. За пояс халата с правой стороны закладывают полотенце. Защитный костюм снимают после работы в специально выделенном для этого помещении или в той же комнате, где проводилась работа, но только после полного обеззараживания этого помещения. Иногда надевают фартук и нарукавники.

Для обеззараживания костюма должны быть предусмотрены:

- тазик или бачок с дезраствором для обработки наружной поверхности сапог или галош

- металлический бачок с дезинфицирующим раствором для обеззараживания халата, капюшона или косынки, перчаток и полотенца

- тазик с дезинфицирующим раствором для обеззараживания рук

- банки с притертой пробкой, содержащие 70 градусный спирт для обеззараживания очков и фонендоскопа

- кастрюля с дезинфицирующим раствором или мыльной водой для обеззараживания ватно-марлевых масок.

При обеззараживании костюма все его части должны быть погружены в дезинфицирующий раствор. В тех случаях, когда обеззараживание проводится автоклавированием или в дезкамере, костюм складывается соответственно в биксы или камерные мешки, которые снаружи обрабатываются дезинфицирующим раствором.

Снимают костюм медленно, не торопясь, и в строго установленном порядке. После снятия каждой части костюма руки в перчатках погружают в дезраствор. Тесемки халата и фартука, завязанные петлей с левой стороны, облегчают снятие костюма.

Костюм снимают в следующем порядке:

1. В течение 1-2 минут, не снимая перчаток, руки тщательно моют в дезинфицирующем растворе.

2. Медленно вынимают полотенце.

3. Протирают ватным тампоном, обильно смоченным раствором, клеенчатый фартук, снимают его, сворачивая наружной стороной внутрь.

4. Снимают нарукавники.

5. Сапоги или галоши протирают сверху вниз ватным тампоном, смоченным дезраствором (для каждого сапога применяют отдельный тампон).

6. Не касаясь открытых частей кожи, вынимают фонендоскоп.

7. Очки снимают плавным движением, оттягивая их двумя руками вперед, вверх, назад, за голову.

8. Ватно-марлевую маску снимают, не касаясь лица наружной ее стороной.

9. Развязывают завязки ворота халата, пояс и, опустив верхний край перчаток, развязывают завязки рукавов, снимают халат, заворачивая наружную часть его внутрь.

10. Снимают косынку, осторожно собирая все концы ее в одну руку на затылке.

11. Снимают перчатки, проверяют их на целостность в дезрастворе (но не воздухом).

12. Еще раз обмывают сапоги в баке с дезраствором и снимают их. После снятия защитного костюма руки тщательно моют с мылом в теплой воде. Для мытья рук во всех отделениях бактериологических лабораторий, госпиталях, изоляторах и др.используют туалетное мыло. После работы рекомендуется принять душ.

13. Защитная одежда обеззараживается после разового применения путем кипячения в 2% растворе соды (15 минут), автоклавирования в дезинфицирующем растворе (2 часа).

Техника посева крови на гемокультуру у брюшнотифозных больных и других возбудителей инфекционных болезней.

Показания: производится с целью выделения возбудителей в чистой культуре, путем посева материала на искусственную питательную среду.

Оснащение:термометр, жгут, плоская подушечка, стерильные шарики в крафтупаковке, атисептик для обработки кожи, спиртовка, шприц 10 или 20 мл, спички, флакон с питательной средой, лоток для отработанного материала, халат для выполнения инъекций, фартук, очки, маска, перчатки, бланк направления, емкости для обработки отработанного материала.

Техника выполнения.

1. Забор проводится в боксе у постели больного перед проведением забора крови, воздух в боксе следует подвергнуть кварцеванию.
2. Перед забором крови питательную среду следует подогреть до комнатной температуры.
3. Измерить температуру пациенту, так как посев осуществляется на высоте подъема температуры.
4. Посев выполняют две медсестры: одна держит флакон с питательной средой, а вторая шунтирует кровь во флакон.
5. Выполнить внутривенную инъекцию и набрать 5 – 10 мл крови. Соотношение крови и питательной среды должно быть 1:10, указанное разведение необходимо точно соблюдать, чтобы избежать бактерицидных свойств крови. Чем большие количества крови используют для посева, тем выше процент положительных высевов.
6. Поместить шприц с кровью на стерильный лоток.
7. Зажечь спиртовку.
8. Снять защитный колпачок с питательной среды.
9. Взять шприц с лотка и пронести канюлю шприца над пламенем спиртовки.
10. Раскрыть питательную среду и обжечь горлышко флакона над пламенем спиртовки.
11. Иглу внести во флакон по канюлю и осторожно шунтировать по стенке кровь во флакон, держа последний максимально близко к пламени спиртовки.
12. Обжечь горлышко флакона и пробку над пламенем спиртовки. Закрыть флакон.
13. Провести заключительный этап внутривенной инъекции.
14. Заполнить направление в нем обязательно указывают температуру и время забора материала у пациента, день заболевания, дату забора материала и полностью указывают ФИО медицинской сестры, которая осуществляла забор материала и ФИО доктора направившего материал на исследование.
15. Питательную среду с кровью доставляют в лабораторию немедленно или если это невозможно, то ставят в термостат в отделении.

Техника постановки кожно-аллергической пробы.

Показания:

- выявление и диагностика инфекционных заболеваний.

Противопоказания:

- кожные заболевания

- другие противопоказания в зависимости от вида аллергена.

Материальное обеспечение:

- Аллерген в стандартном разведении.

- Шприцы туберкулиновые (инсулиновые).

- Иглы № 0415, тонкие, короткие с косым срезом, для внутрикожных инъекций.

- Иглы длинные № 0840 для забора аллергена из ампулы (флакона).

- Пилка для ампул.

- Пинцет в крафт-пакете.

- Стерильный материал (ватные шарики и марлевые салфетки) в крафт-пакете.

- Холодовой элемент с ячейками.

- 70% этиловый спирт во флаконе.

- Манипуляционный столик.

- Клеенчатый фартук, перчатки, маска.

- Емкость с дезинфицирующим раствором для обработки поверхностей.

- Две емкости с 5% раствором хлорамина для промывания и обеззараживания использованных шприцев и игл.

- Пинцет для снятия использованных игл извлечения шприцев и игл после дезинфекции.

Последовательность выполнения:

1. Убедится в наличии письменного врачебного разрешения на проведение кожно-аллергической пробы.

2. Надеть фартук, маску.

3. Вымыть и просушить руки.

4. Надеть перчатки.

5. На верхнюю полку манипуляционного столика поставить 70% этиловый спирт, выложить стерильный материал в крафт-пакетах, пинцет в крафт-пакете, шприцы туберкулиновые (инсулиновые), иглы для внутрикожных инъекций и забора аллергена из ампулы (флакона), пилку.

6. На нижнюю полку поставить емкости с дезинфицирующим раствором для промывания игл, пинцет для снятия игл, лоток для использованного материала.

7. Извлечь из холодильника и обработать дезинфектантом холодовой элемент, поставить его на манипуляционный столик.

8. Накрыть холодовой элемент марлевой салфеткой.

9. Убедится в наличии письменного врачебного разрешения на проведение пробы.

10. Достать из холодильника (сумки-холодильника) аллерген, проверить его годность: целостность флакона (ампулы), внешний вид препарата, наличие этикетки, срока годности.

11. Установить флакон (ампулу) с аллергеном в ячейку холодового элемента.

12. Вымыть и просушить руки, обработать 70% этиловым спиртом.

13. Обработать 70% этиловым спиртом шейку ампулы, надпилить ее и повторно обработать спиртом. Ампулу вскрыть. Если аллерген находится во флаконе, то удалить пинцетом центральную часть металлического колпачка, резиновую пробку обработать спиртом.

14. Вставить ампулу (флакон) в ячейку холодового элемента, накрыть стерильной марлевой салфеткой.

15. Бросить верхушку ампулы в лоток для использованного материала.

16. Обработать двумя шариками, смоченными 70% этиловым спиртом, кожу внутренней поверхности предплечья.

17. Вскрыть упаковку туберкулинового (инсулинового) шприца, зафиксировать на канюле длинную иглу № 0840, взять стерильную салфетку.

18. Ввести иглу шприца в ампулу (флакон), набрать 0,2 мл аллергена и, придерживая стерильной салфеткой канюлю иглы, отсоедините шприц, оставив иглу в ампуле (во флаконе).

19. Прикрыть ампулу (флакон) с иглой стерильной салфеткой. Поставить в холодовой элемент.

20. Зафиксировать на шприце короткую тонкую иглу № 0415. Вытеснить из шприца воздух и избыток препарата на плотно прижатый ватный шарик, не снимая полностью колпачка с иглы, оставив в шприце 0,1 мл аллергена.

21. Ватный шарик бросить в емкость с дезраствором. На иглу надеть колпачок.

22. Обработать руки 70% этиловым спиртом, снять с иглы колпачок.

23. Зафиксировать предплечье пациента кистью руки.

24. Натянуть кожу на границе верхней и средней трети внутренней поверхности предплечья и ввести внутрикожно 0,1 мл аллергена (образуется папула беловатого цвета, 6-8 мм в диаметре, по типу лимонной корочки, исчезающая через 15-20 мин).

25. Место инъекции больше не обрабатывают 70% этиловым спиртом и не промакивают просто сухим стерильным шариком.

26. Ампулу (флакон) с остатком аллергена погрузить в емкость с 10% раствором хлорной извести для дезинфекции.

27. Промыть использованные шприц и иглы в первой емкости с 5% раствором хлорной извести и замочить во второй емкости с 5 % раствором хлорамина шприц в разобранном виде и иглы на (4 часа).

28. Вымыть и обработать антисептическим раствором руки в перчатках, снять их. Вымыть и просушить руки.

29. Предупредить пациента о необходимости оберегать кожу в области пробы от раздражения.

30. Пригласить пациента для оценки пробы в зависимости от вида через 24-72 часа.

31. Зарегистрировать результат пробы в тех же документах, что и профилактические прививки, согласно инструкции оценки данного аллергена.

ЗАБОР МАТЕРИАЛА

ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ НА ХОЛЕРУ

Забор материала от больных осуществляется медицинским персоналом лечебного учреждения немедленно при выявлении больного и до начала лечения антибиотиками. Руководитель несет ответственность за правильность отбора проб, хранения и их доставки в лабораторию.

В зависимости от конкретных задач и условий материал может быть направлен в лабораторию в нативном виде (срок транспортировки не более 2 часов) в 1% п.в. или консервированные. У больных тяжелой формой ГЭК материал направляют в лабораторию нативным и в 1% п.в.

При обследовании больных с тяжелой формой холеры для посева достаточно 0,5мл. материала, а легкими формами энтерита – 2г. испражнений. В консервант материал следует помещать в количестве 3г. на 5-6мл. среды.

Способы отбора проб

1. Испражнения и рвотные массы в объеме 10-20г. стерильными ложками или стеклянными трубками с резиновой грушей переносят из судна (лотка) в стерильную банку или пробирку.

2. Для взятия материала у больных с обильным водянистым стулом можно использовать резиновый катетер №26 или №28, один конец которого вводят в прямую кишку, а другой отпускают в банку или пробирку. Жидкие испражнения набирают в сосуд свободно или при легком надавливании на брюшную полость – стенку.

3. Стерильный ректальный ватный тампон из гигроскопичной ваты вводят в прямую кишку на глубину 5-6см и собирают им содержимое со стенок кишечника. Тампон опускают во флакон или пробирку с 1% п.в., обломив часть деревянного стержня.

4. Стержневую петлю из алюминиевой проволоки перед забором материала смачивают стерильным физ. р-ром и вводят в прямую кишку на 8-10см. Взятый материал переносят во флакон или пробирку с 1% п.в.

5. Желчь берут при дуоденальном зондировании в лечебном учреждении. В отдельные пробирки собирают 2 порции. Из желчного пузыря и желчных протоков материал доставляют нативным.

6. От умерших с подозрением на холеру берут отрезки верхней, средней и нижней частей тонкого кишечника длиной около 10см. Отрезки вырезают между двойными лигатурами, наложенными на оба конца изымаемого участка кишечника.

Желчный пузырь после перевязки протока извлекают целиком. Взятые образцы органов трупа укладывают отдельно в стерильные банки. Для отбора проб используют чистую стерильную или обмытую кипятком посуду, не содержащую даже следов дезинфицирующих растворов. Стерилизацию ее проводят автоклавированием, сухим жаром или кипячением в 1% содовом растворе. Банки или пробирки с материалом закрывают непромокающими пробками и пергаментной бумагой, укладывают в специально подготовленную для транспортировки тару и перевозят на служебном транспорте с сопровождающим.

При осуществлении эпидемического надзора за холерой исследование материала от здоровых и больных ОКЗ без подозрения на холеру при отсутствии возможности 2-х сменной работы, можно проводить в условиях односменной работы, используя 1% п.в. с теллуритом К в качестве 1 или 2 среды накопления.

Используют 1% п.в. по 5-10мл без теллурита К. Продолжительность сохранения проб при температуре до 25⁰С до 24 часов в биксах, шкафу, в специально выделенной комнате, закрывающейся на замок. В случае, когда температура больше 25⁰С материал следует брать в 5-10мл 1% п.в. с теллуритом К.

НА ВЫХОДНЫЕ ДНИ: забор материала в 50мл. 1%п.в. с теллуритом К (время при 25-60 часов, 25-30-48 часов). На флаконах или пробирках с п.в. добавляется этикетка или надпись с указанием названия среды и времени приготовления ее. В стационарах среды для отбора проб рекомендуется сохранять не более 2-х суток при температуре не выше 10 градусов.

Варианты	Время взятия материала	Время доставки в лабораторию	Среда накопления
1.	6.00-10.00	До 10.00	1%п.в. 50мл
2.	10.00 до конца раб.дня	После 10.00 в течение раб.дня	1%п.в. 5-10мл
3.	По окончании раб.дня	До 10.00 следующего дня	1%п.в. 5-10мл
4.	Выходные дни лаборатории	До 10.00	1%п.в. с тел.К 50 мл

между контейнерами заполняется льдом. Второй контейнер упаковывается в ящик, на котором указывается адрес доставки.

Перевозка материала осуществляется специально выделенным транспортом с нарочным (2 человека).

До отправки в лабораторию пробы должны храниться на холоде при температуре не выше 4⁰С.

НАПРАВЛЕНИЕ ЗАПОЛНЯЕТСЯ ПО ФОРМЕ:

- наименование лаборатории, куда направляется материал

- наименование материала и вид исследования

- Ф.И.О. обследуемого

- Диагноз, подданство и название страны, откуда прибыл больной

- Дата убытия из данной страны

- Дата прибытия в РБ

- Дата заболевания

- Дата и время забора материала

- Наименование учреждения, забравшего материал

- Должность и фамилия забравшего материал

- Наименования учреждения, направившего материал

ЗАБОР МАТЕРИАЛА ПРИ ЧУМЕ

Кровь на гемокультуру

Кровь берется стерильно в количестве 10мл. из локтевой вены, посев делается у постели больного во флакон с питательной средой над пламенем спиртовки. Пробка и горлышко флакона обжигаются. В направлении – указать температуру больного, при которой забиралась кровь.