ПМ 05: Проведение лабораторных гистологических исследований
Специальность: 060604 Лабораторная диагностика
Составлено в соответствии с Государственными требованиями к минимуму содержания и уровню подготовки выпускников по специальности: 060604 Лабораторная диагностика
Общая редакция: Кочерыжкина Н.А. – преподаватель высшей квалификационной категории ГОУ СПО МУ №4
АЛГОРИТМЫ ДЕЙСТВИЙ СТУДЕНТОВ
ПРИ ВЫПОЛНЕНИИ ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАДАНИЙ
ПМ 05: Проведение лабораторных гистологических исследований
1. Подготовка посуды и предметных стекол к работе
2. Приготовление фиксаторов
3. Фиксация материала
4. Промывание материала для удаления фиксатора (формалина)
5. Обезвоживание, уплотнение и заливка материала в парафин
6. Приготовление спиртов различной концентрации»
7. Разведение спиртов
8. Приготовление гистологических срезов
9. Устранение артефактов приготовления гистологических срезов
10. Уход за микротомом и микротомными ножами
11. Монтировка срезов на стекло
12. Приготовление адгезивной среды
13. Депарафинирование гистологических срезов (подготовка срезов к окраске)
14. Приготовление красящих растворов
15. Окраска гистологических препаратов
16. Обезвоживание и просветление препаратов
17. Заключение препаратов
18. Обработка материала при срочной операционной биопсии
19. Микроскопирование препаратов
Подготовка посуды и предметных стекол к работе
Оснащение: раковина с проточной водой, эмалированная посуда для замачивания и кипячения стекол, электрическая плита, вытяжной шкаф, эксикаторы, банкас широким горлом, пинцет, хлопчатобумажные салфетки, картонные коробки.
Реактивы:2-3% раствор гидрокарбоната натрия, раствор моющего средства, смесь Никифорова,
Алгоритм действий:
- Сложить стекла в эмалированную посуду и замочить в теплой мыльной воде
- Прокипятить стекла в 2-3% растворе гидрокарбоната натрия
- Промыть в проточной воде в течение нескольких часов
- Протереть чистой хлопчатобумажной тканью
- Поместить в смесь Никифорова на несколько дней.
- Пинцетом извлечь стекла из смеси Никифорова
- Протереть чистой тканью
- Проверить качество обезжиривания: капнув на предметное стекло воду из пипетки: по обезжиренному стеклу вода растекается тонким слоем, а не собирается в каплю.
- Сложить в коробку
Приготовление фиксаторов»
Приготовление 10% раствора формалина
Оснащение: вытяжной шкаф, банкас широким горломи притертой пробкой
Реактивы: 1 л40% формальдегида, 100 гкарбоната кальция или магния.
Алгоритм действий:
- На дно широкогорлой банки насыпать 100г карбоната кальция или магния
- Добавить 1 л 40% формальдегида
- Перемешать и оставить на сутки
- Полученный нейтральный формалин разбавить водопроводной водой в соотношении 1:10
Приготовление раствора Карнуа
Оснащение: вытяжной шкаф, банкас широким горломи притертой пробкой,мерный цилиндр, пипетки
Реактивы: спирт 100%, хлороформ , ледяная уксусная кислота.
Алгоритм действий:
- В приготовленную емкость последовательно отмерить и добавить:
o 60мл 100% спирта
o 30 мл хлороформа
o 10мл ледяной уксусной кислоты
- Перемешать
- Использоватьфиксатор следует сразу после приготовления.
Фиксация материала»
Вариант 1. С использованием гистологических кассет
Оснащение: вытяжной шкаф, емкость с широким горлом, гистологические кассеты, плотная бумага, простой карандаш
Реактивы: 10% раствор нейтрального формалина
Алгоритм действий:
 | ХХХ ХХХ |  |
| - Вырезанный кусочек материала поместить в кассету | - Подготовить бумажную этикетку. - простым карандашом написать порядковый номер, под которым материал зарегистри-рован в журнале | - Этикетку поместить в кассету |
- Закрыть кассету (при этом должен раздаться щелчок).
- Поместите кассету с материалом в емкостьшироким горлом
- Добавьте фиксатор в объеме в 10-20 раз превышающем объем фиксируемого материала
- Если цвет фиксатора изменился после погружения в него кусочков ткани, необходимо немедленно сменить фиксатор.
- Закрыть емкость крышкой и оставить под вытяжкой на время, необходимое для фиксации.
Вариант 2.
Оснащение: вытяжной шкаф, емкость с широким горлом, марлевые салфетки, плотная бумага, простой карандаш
Реактивы: 10% раствор нейтрального формалина
Алгоритм действий:
- Налить фиксатор в подготовленную емкость
- Подготовить марлевую салфетку
- Подготовить бумажную этикетку: простым карандашом написать на ней порядковый номер, под которым материал зарегистрирован в журнале.
- Положить этикетку в центр салфетки надписью вниз
- Поместить на салфетку вырезанные кусочки материала
- Завязать салфетку
- Поместить материал в сосуд с фиксатором
- Если цвет фиксатора изменился после погружения в него кусочков ткани, необходимо немедленно сменить фиксатор.
- Закрыть емкость крышкой и оставить материал в вытяжном шкафу до конца фиксации
4. «Промывание материала для удаления фиксатора (формалина)»
Оснащение: раковина с проточной водой, банкас широким горлом, отводная трубка, марлевая салфетка
Алгоритм действий:
- Материал поместить в стеклянную банку
- Вставить резиновую отводную трубку
- Обвязать горлышко банки марлей
- Поместить банку в раковину, отрегулировать напор воды и оставить на 24-48 часов