Обнаружение кумаринов хроматографей в тонком слое сорбента
Хроматографирование проводили восходящим способом на пластинках «Силуфол» (15х15).
Хлороформные извлечения наносили с помощью микропипетки на линию старта в количестве 0,1мл. Рядом наносили 0,05% этанольные растворы стандартов герниарина, кумарина, скополетина, эскулина, эскулетина, умбиллиферона. В качестве подвижной фазы использовали систему растворителей этилацетат - бензол (1:2). Камеру насыщали в течение 40 минут. Пластинки с нанесенными пробами помещали в хроматографические камеры. После прохождения фронта растворителя, примерно 13 см, пластинки высушивали на воздухе до удаления запаха растворителей. В качестве проявителя использовали 10% спиртовой раствор едкого натра. Кумарины на хроматограммах обнаруживали до и после проявления в УФ – свете, а так же по появлению ярких пятен (от кирпично-красного до сине-фиолетового) после обработки хроматограмм свежеприготовленным диазореактивом. Отмечали цвет и интенсивность окраски пятен, для каждого из пятен вычисляли Rf.
В результате исследования установлено, что листья пузыреплодника калинолистного содержат 5 кумаринов, из них 3 идентифицированы как эскулин, эскулетин, герниарин (Рис. 8, табл. 1).
| Rf | |
| 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 | |
| 1 K Э1 Э К Г |
Рис. 8. Схема тонкослойной хроматограммы кумаринов хлороформного извлечения листьев пузыреплодника калинолистного в системе этилацетат – бензол (1:2)
Обозначения:
1–хлороформное извлечение листьев пузыреплодника калинолистного;
К – 0,05% этанольный раствор кумарина;
С – 0,05% этанольный раствор скополомина;
Э1 – 0,05% этанольный раствор эскулина;
Э– 0,05% этанольный раствор эскулетина;
У– 0,05% этанольный раствор умбеллиферона;
Г– 0,05% этанольный раствор герниарина.
Таблица 1 Результаты хроматографического определения кумаринов в листьях пузыреплодника калинолистного
| Rf в системе1 | Цвет пятна в УФ-свете | После проявления азокрасителем | Кумарины стандарты | Исследуемое извлечение |
| 0,24 | Голубой | Оранжевый | Скополетин | - |
| 0,35 | Голубой | Оранжевый | --------- | + |
| 0,41 | Голубой | Желтый | Умбелиферон | - |
| 0,49 | Голубой | Оранжевый | Эскулин | + |
| 0,56 | Фиолетовый | Оранжевый | Герниарин | + |
| 0,70 | Гол.-зеленый | Оранжевый | Эскулетин | + |
| 0,81 | Фиолетовый | Кирпично-красный | --------- | + |
| 0,84 | ------- | Кирпично-красный | Кумарин | - |
Заключение
Совокупность биологических эффектов фитоэстрогенов позволяет предположить, что эти вещества могут быть реальной альтернативой гормонально заместительной терапии в условиях эстрогенной недостаточности. Несмотря на доказанную активность, фитоэстрогенные препараты на фармацевтическом рынке представлены весьма скромно.
Доказано, что полностью заменить естественные эстрогены такие вещества, конечно же, не смогут, но они способны существенно улучшить самочувствие в различных случаях. Фитоэстрогены предотвращают развитие недугов сердечнососудистой системы, предупреждают вымывание кальция из костей. Также замедляется старение кожи, нормализуются процессы обмена в дерме, предотвращаются ее повышенная сухость и сморщивание.
Поэтому поиск новых источников природных эстрогенов, а также дальнейшие исследования в данной области являются актуальной задачей в области органической химии и фармакогнозии.
В результате исследования:
· мы ознакомились с основными источниками получения фитоэстрогенов;
· определили, какова роль фитоэстрогенов в медицине и фармации;
· изучили классификацию природных эстрогенов с химической точки зрения, а также их структуру и характерные свойства;
· доказали присутсвие кумаринов в траве клевера лугового с ранее изученным химическим составом, предварительно произведя экстракцию, а затем ряд качественных реакций;
· исследовали листья пузыреплодника калинолистного на наличие кумаринов, качественный анализ на который и ТСХ дали положительный результат.
Исходя из этого, можно сделать вывод, что исследованный объект пузыреплодник калинолистный является перспективным источником кумаринов и возможно других фитоэстрогенов в плане создания лекарственных средств на его основе.
Список литературы
1. Аносова, О.Г. Фармакогнозия. Атлас : учеб.пособие : в 2 т. / И.А. Самылина, О.Г. Аносова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. – 192 с.
2. Булгакова Н.Ф. Изучение влияния различных фитоэстрогенов/ Булгакова Н.Ф.//Ветеринария. Реферативный журнал.-2009.-№ 3. -С. 605.
3. Иванова Е.А. Изофлавоны в соевых продуктах питания/ Е.А. Иванова// Пищевая и перерабатывающая промышленность. Реферативный журнал. -2002. -№ 2. -С. 453.
4. Изучение фенольных соединений листьев пузыреплодника калинолистного методом ВЭЖХ/ Сафонова И.А., Яцюк В.Я., Кузьминова А.В.// Курский научно-практический вестник "Человек и его здоровье". -2009. -№ 4.- С. 127-132.
5. К исследованию биологически активных лигнанов найстойки и семн лимонника китайского/ Е. Н. Жукович, С.Ю. Бокарева, Л.А. Шарикова и др.//Химико-фармацевтический журнал.-2007.-№2.-С.35-37
6. Как правильно применять фтоэстрогены Электронный ресурс/ Режим доступа: http://tutknow.ru/medicina/7832-kak-pravilno-prinimat-fitoestrogeny.html, свободный.
7. Клевер луговой Электронный ресурс/ Режим доступа: http://oblepiha.com/lekarstvennye_rasteniya/2064-klever-lugovoy.html, свободный.
8. Лигнаны семени льна Электронный ресурс/ Режим доступа: http://works.doklad.ru/view/Y96DiMuT7LE/3.html, свободный.
9. Машковский М.Д. Лекарственные средства- 16изд., испр. и доп. - М.: Новая Волна,2012.- 1216 с.
10. Методика определения изофлаваноидов в траве клевера лугового: научное издание/В.Ю. Андреева и др. // Фармация.-2012.-№8.-С.5-7
11. Минина С. А. Химия и технология фитопрепаратов: учеб. пособие для системы послевуз. проф. Образования провизоров // С. А. Минина, И. Е. Каухова.-2-е изд., перераб. и доп. – М.:ГЭОТАР-Мед, 2009.-559 с.
12. Овчинников Ю.А. Биоорганическая химия. – М.: Просвещение, 1987. – 816 с.
13. Органическая химия: учеб. для вузов: В 2 кн. Кн.2: Специальный курс/ Н.А. Тюкавкина, С.Э. Зурабян, В.Л. Белобородов и др. – М.:Дрофа, 2008, - 592 с.
14. Официальный сайт Химик Электронный ресурс/ Режим доступа : http://www.xumuk.ru/ encyklopedia/ 2/4475.html, свободный
15. Пузыреплодник калинолистный Электронный ресурс/ Режим доступа: http://www.gardenia.ru/pages/puzire001.htm, своодный.
16. Рафаэлян И.В. Фитоэстрогены: Что известно на сегодняшний день/ И. В. Рафаэлян, В.Е. Балан, Л.А. Ковалева// Акушерство и гинекология.-2012.-№5.-С.4-9
17. Ремизов А.Н., Максина А.Г., Потапенко А.Я. Медицинская и биологическая химия: учебник для вузов-М.: Дрофа,2003.- 461 с.
18. Семѐнов А. А. Основы химии природных соединений: в 2 т. / А. А. Семѐнов, В. Г.Карцев. – М.: ICSPF, 2009.-569 с.
19. Травянистые растения СССР / Ю.Е. Алексеев, В.Н. Вехов, Г.П. Гапочка и др.; Отв. ред. Т.А. Работнов. – М.: «Мысль», 1971. – Т. 2. – 309 с.
20. Турова Е.А. Изофлавоны в коррекции возрастных изменений кожи/ Турова Е.А., Королевская Л.И. //Гинекология.- 2008. -Т. 10.- № 5. С. 80-83.
21. Тускаев В.А. Методы синтеза и биологическая активность производных куместана: научное издание/ В.А. Тускаев// Химико-фармацевтический журнал.-2013.-№1.-С.3-12
22. Фитоэстрогены как альтернатива заместительной гормональной терапии при гипоэстрогенемии (экспериментальное исследование) Электронный ресурс/ Режим доступа: http://medical-diss.com/medicina/fitoestrogeny-kak-alternativa-zamestitelnoy-gormonalnoy-terapii-pri-gipoestrogenemii, свободный.
23. Харкевич Д.А. Фармакология. – М.: ГЭОТАР – МЕД, 2006. – 561с.
24. Яковлев Г. П. Ботаника: Учеб. Для фармац. Институтов и фармац. Фак. Мед.вузов / Под ред. И. В. Грушвицкого. – М. : Высш. шк., 1990. – 367 с.
25. Яковлева Г. П. Фармакогнозия. Лекарственное сырье растительного и животного происхождения: учеб. пособие для студентов фармацевт. Вузов, обучающихся по специальности «Фармация». – Спб.: СпецЛит, 2010.-863 с.