Схема обнаружения агглютиногенов изосерологической системы АВО в высохшей крови путем реакции абсорбции

Объект исследо­вания	Сыворотки	Экстракт анти-Н	Обнару­женные агглюти-ногены
	Р (анти-В)	а (анти-А)
Пятна крови	исход­ная	абсорби­рованная	исход­ная	абсорби­рованная	исход­ный	абсорби­рованный
№1	+	+	+	+	+	—
№2	+	+	+	—	+	—	А, Н
№3	+	—	+	+	+	—	В, Н
№4	+	—	+	—	+	+	А, В

В последние годы разрабатываются методы («сме­шанная агглютинация», абсорбция-элюция), позволяю­щие обнаружить групповые антигены в чрезвычайно ма­лых следах, например в пропитанных или помаранных кровью ниточках материи длиной 2 — 3 мм.

Исследование агглютиногенов сопровождают выявле­нием в крови агглютининов, для чего применяют метод покровного стекла по Латтесу или способ экстрагирова­ния.

Определение групп изосерологических систем Р и Льюис осуществляют только методом абсорбции, по­скольку естественные агглютинины анти-Р и анти-Льюис не присутствуют в крови человека так регулярно, как аг­глютинины а и (3. Дифференцируют две группы системы р. р + и P — (р) и три группы системы Льюис: Le(a + b — ), Le(a — b + ) и Le(a — b — ). Обе эти системы представляют для судебно-медицинской экспертизы кро­ви меньший интерес, чем система АВО, так как группа Р+ очень распространена у населения большинства стран, в том числе и СССР, а на результаты определе­ния групп системы Льюис весьма неблагоприятно влияют загрязненные материалы вещественных доказательств.

Для судебной медицины большое значение имеют группы сывороточных изосерологических систем, в пер­вую очередь системы Gm, но введение их в практику тормозится затруднениями в получении необходимых стандартных сывороток.

Установление групповой принадлежности в следах крови на вещественных доказательствах и в образцах крови потерпевших и подозреваемых позволяет:

1) исключить происхождение крови на предметах, подлежащих экспертизе, от потерпевшего или подозре­ваемого;

2) предположить, что кровь на вещественных дока­зательствах могла произойти от потерпевшего (или по­дозреваемого), равно как и от любого другого человека с кровью той же группы.

Второй вариант вывода обусловливается тем, что судебно-медицинские эксперты пока оперируют группами крови, каждая из которых присуща многим людям, но он все же имеет значение для расследования преступле­ния в совокупности с другими доказательствами по делу. При этом следует учитывать, что достоверность предпо­ложения, содержащегося во втором варианте вывода, возрастает по мере увеличения числа подвергнутых ис­следованию изосерологических систем.

Определение групп различных изосерологических си­стем в жидкой крови (ABO, MNSs, P, Rh и др.), как правило, применяют при разрешении вопросов о спор­ном отцовстве (крайне редко о спорном материнстве), о замене детей в медицинских учреждениях или краже ре­бенка (чрезвычайно редкие случаи), о неправильном пе­реливании крови.

Экспертиза спорного отцовства основывается на оп­ределении групп крови матери, ребенка (детей) и пред­полагаемого отца, экспертиза о замене детей и краже ребенка — на установлении групп крови членов семей, относящихся к данному происшествию, и обе эти экс­пертизы — на известном порядке наследования группо­вых факторов.

Здесь возможны следующие варианты выводов.

О спорном отцовстве (спорном материнстве):

1) данный мужчина не является отцом обследуемого ребенка или данная женщина не является матерью об­следуемого ребенка;

2) отцовство (материнство) не исключается, в силу чего судебно-медицинская экспертиза крови не может разрешить вопрос о спорном отцовстве (материнстве).

О замене детей или краже ребенка:

1) ребенок Г. не мог родиться в семье Ивановых, но может происходить из семьи Петровых, а ребенок Н. не мог родиться в семье Петровых, но может происходить из семьи Ивановых (замена установлена);

2) ребенок Г. мог родиться как в семье Ивановых, так и в семье Петровых, а ребенок Н. не мог происхо­дить от Петровых, но мог родиться у Ивановых (частич­ное установление факта замены);

3) судебно-медицинская экспертиза крови не имеет возможности разрешить поставленный перед нею воп­рос, поскольку оба ребенка могут происходить как из той! так и из другой семьи.

Факт неправильного переливания крови, зависящего от ошибок в определении группы крови донора или ре­ципиента (лицо, которому была перелита кровь), выяс­няют путем исследования крови того и другого.

Выводы делают исходя из того, что при переливании имеют значение агглютиногены (антигены эритроцитов) донора и агглютинины (антитела сыворотки) реци­пиента.

Наряду с освещенными основными этапами экспер­тизы крови возможны некоторые дополнительные иссле­дования.

Региональное происхождение. Выяснение вопроса, из какой области тела вытекла кровь, образовавшая следы на вещественных доказательствах, основывается преи­мущественно на обнаружении морфологических элемен­тов, свойственных той или иной области. Так, присут­ствие клеток слизистой оболочки дыхательных путей свидетельствует об истечении крови из органов дыха­ния, примесь к крови кала — о кишечном кровотечении; на наличие менструальной крови указывает содержание в ней клеток слизистой оболочки матки и т. д.

Результаты морфологического исследования, как пра­вило, оказываются малонадежными и пока в большин­стве случаев не дают возможности доказать региональ­ное происхождение крови. Это зависит от изменений морфологических элементов в процессе высыхания кро­ви и последующего извлечения их из нее.

Для дифференцирования менструальной крови (точ­нее — менструальных выделений) от крови иного проис­хождения предложены и другие способы исследования (обнаружение фибринолитического фермента по оста­точному азоту, электрофорез и пр.), но и они не могут считаться достаточно эффективными.

Срок, прошедший с момента образования следов кро­ви на вещественных доказательствах (давность следов крови). Несмотря на довольно большое количество ре­комендованных методов (растворимость различными ре­агентами, изменение цвета, переход красящего вещества крови из оксигемоглобина в метгемоглобин, степень проникновения хлоридов из пятна в окружающий ма­териал и т. д.), вопрос, как правило, остается неразре­шенным. Это обусловливается тем, что результаты всех предложенных реакций зависят не только от срока, про­шедшего с момента возникновения следов крови, но и от воздействий на последние внешней среды (температура, влажность и пр.), которые обычно в каждом конкретном случае точно не могут быть учтены.

Количество жидкой крови, образовавшей следы на вещественном доказательстве. Определение количества крови, излившейся из тела, имеет большое значение, например, при выяснении, убит ли человек там, где найден его труп, или последний перенесен на место об­наружения.

Из существующих для этого методов наиболее прост и доступен способ, основанный на определении веса вы­сохшей крови, с последующим пересчетом на объем жидкой крови. Пределы ошибок данных методов — 15 — 20%.

Отличие крови плода или младенца от крови взрос­лого. Гемоглобин крови плода или младенца более ус­тойчив к действию щелочей, чем гемоглобин взрослого человека.

Сравнительное исследование основывается на сроке изменения цвета крови или вытяжки из следа крови после добавления раствора едкого натра; на быстроте перехода оксигемоглобина в гематин при действии ра­створа едкой щелочи (спектральное исследование); на денатурации гемоглобина щелочью с последующим оса­ждением сернокислым аммонием.

Половая принадлежность. Из высохшей крови извле­кают лейкоциты (белые кровяные тельца), часть кото­рых оказывается пригодной для данного вида исследо­вания.

Ядра сегментоядерных лейкоцитов носят на себе половоспецифические образования (половой хроматин) различной формы, что позволило разделить их на два типа, обозначенных прописными латинскими буквами — А и В.

Эти образования характерны для женской крови; подобные образования в крови мужчин встречаются зна­чительно реже.

Выводы о половой принадлежности крови делают на основании подсчета лейкоцитов, содержащих и не содер­жащих половоспецифические образования указанных типов.

Во избежание ошибочных заключений всегда необхо­димо предвидеть, не могли ли лейкоциты присутство­вать на предмете независимо от попадания на него кро­ви (гной, выделения из носа и т. д.).

Кровь при отравлении некоторыми ядами. При подо­зрении на отравление угарным газом кровь исследуют на присутствие карбоксигемоглобина, применяя спектраль­ный анализ и химические реакции. Спектр карбоксиге­моглобина характеризуется двумя полосами поглощения в желто-зеленой области видимой зоны электромагнит­ного спектра (л = 579 — 564 и 548 — 530 mм). При дей­ствии восстановителя карбоксигемоглобин переходит в гемоглобин медленнее, чем оксигемоглобин. Это исполь­зуется для дифференциальной диагностики.

Большинство химических реакций позволяет отли­чить кровь, содержащую карбоксигемоглобин, от кон­трольной крови с оксигемоглобином благодаря приобре­тению кровью неодинаковой окраски. Из этих реакций особенно широко применимы пробы с таннином и фор­малином.

Некоторые яды (нитробензол, анилин и др.) вызы­вают образование в крови метгемоглобина, который можно обнаружить спектральным исследованием.

Количественное определение карбоксигемоглобина и метгемоглобина в крови выходит за пределы судебно-биологических исследований,

Выделения человеческого организма. При расследовании преступлений неоценимую роль играют не только следы крови, но и следы различных выделений человеческого организма.

В случаях половых преступлений в содержимом вла­галища, на теле и одежде потерпевших, а также на ме­сте происшествия остаются следы спермы (семенной жидкости) насильников.

На месте убийств, краж и т. д. нередко обнаружи­вают окурки папирос со следами слюны на мундштуках или сигарет, брошенные или случайно оброненные уча­стниками совершения преступления. На слое клея поч­тового конверта подчас присутствует слюна человека, заклеивавшего его.

Иногда злоумышленник оставляет на месте преступ­ления свою мочу.

Пот и жиропот на предметах одежды или других ве­щах, забытых на месте преступления, может помочь найти преступника.

Обнаружение следов, подозрительных на то или иное выделение, описание, изъятие и направление их на эк­спертизу.Обнаружить следы выделений значительно труднее, чем следы крови, так как они не обладают таким цветом, который привлекает к себе внима­ние.

Наряду с тщательным осмотром предметов невоору­женным глазом или с лупой при достаточно ярком ос­вещении целесообразно облучать их ультрафиолетовы­ми лучами. Выделения, как правило, дают голубоватую макролюминесценцию (свечение) различных оттенков и яркости, но нужно иметь в виду, что при некоторых изменениях эти объекты утрачивают способность люминесцировать.

Описание и изъятие вещественных доказательств со следами выделений, упаковку их и направление в судебно-медицинскую лабораторию производят так же, как и при назначении экспертизы крови (стр. 306), с анало­гичной документацией (стр. 299, 302).

Для расследования преступления большое значение имеет правильное изъятие содержимого влагалища по­терпевшей. Его необходимо брать марлевым тампоном, а не в виде мазков на предметных стеклах: в мазках, как правило, невозможно определить групповую принад­лежность спермы из-за малого количества объекта ис­следования.

Сперма.

Внешний вид и свойства следов спермы.Семенные пятна, образовавшиеся на светлых текстильных тканях, имеют сероватый или желтоватый цвет, наиболее интен­сивный в периферической области пятен. На материях, окрашенных в темные тона, следы спермы представ­ляются беловатыми; сквозь них нередко просвечивает фон предмета-носителя. Двумя характерными свойства­ми семенных пятен являются их извилистые, так назы­ваемые ландкартообразные очертания и жестковатость, как бы накрахмаленность того места ткани, где они об­разовались. Если сперма попала на материал, имеющий ворс, то она подсыхает на ворсинках в виде беловато-сероватых чешуек. На предметах с невсасывающей или маловсасывающей жидкость поверхностью сперма обра­зует беловато-сероватые, иногда желтоватые корочки.

Вопросы, разрешаемые экспертизой.Судебно-меди-цинской экспертизой спермы обычно разрешают сле­дующие вопросы:

1) образованы ли обнаруженные на вещественных доказательствах следы спермой;

2) могла ли произойти сперма от подозреваемого или принадлежность ему спермы исключается.

Вопрос о том, от кого произошла сперма — от чело­века или животного, специально не выделяется, так как по действующему уголовному законодательству это не требуется. Кроме того, о принадлежности спермы чело­веку можно судить по данным морфологического иссле­дования при установлении ее наличия на предметах, подлежащих экспертизе.

Срок, прошедший с момента попадания спермы на вещественные доказательства, несомненно, представляет для следствия интерес, но установление давности сле­дов спермы (например, хлоридный метод) малоэффек­тивно по тем же причинам, что и определение давности следов крови.

Установление наличия спермы. Ввиду того, что следы спермы на вещественных доказательствах визуально мо­гут быть очень плохо различимы, судебно-медицинский эксперт вынужден прибегать к некоторым ориентировоч­ным методам исследования: макролюминесценции, хи­мическим и микрокристаллическим реакциям, например реакции Флоранса, при которой в случае нали­чия спермы выпадают кристаллы коричнево­го цвета в форме ко­сых параллелограммов, иногда с раздвоенны­ми концами.

Поскольку эти ме­тоды не являются доказательными для спермы, положитель­ный результат их толь­ко помогает эксперту выявить следы для дальнейшего исследования; отрица­тельный же исход не исключает семенного происхожде­ния следов.

Рис. 41. Сперматозоиды человека

Особенно большие затруднения возникают в случаях когда сперма содержится в пятнах крови.

Для обнаружения следов, подозрительных на спер­му, очень эффективна новая реакция с соком из клуб­ней картофеля. Картофельный сок агглютинирует чело­веческие эритроциты независимо от их групповой при­надлежности. В присутствии спермы агглютинация эри­троцитов не наступает. Степень задержки агглютинации проверяют микроскопически. При этом в препарате не­редко обнаруживают и сперматозоиды, что избавляет эксперта от дальнейших исследований. Задержка агглю­тинации происходит также при наличии женского моло­ка, но пятна спермы и молока легко дифференцировать при помощи реакции на жир.

Наличие спермы считается доказанным лишь при обнаружении ее морфологических элементов — сперма­тозоидов (рис. 41). Они состоят из головки, шейки и хво­ста, имеющих, как выяснено методом электронной мик­роскопии, очень сложную структуру. Головка человече­ского сперматозоида отличается по форме от головок сперматозоидов животных; она овальная и несколько сдавлена в верхней половине, вследствие чего в боковом положении представляется грушевидной. В нижней ча­сти головки содержится ядро, более интенсивно окра­шивающееся, чем остальная ее часть. Достоверным ос­нованием для вывода о семенном характере пятна служит выявление целого сперматозоида или сохранивше­гося не полностью, но состоящего из головки, шейки и хотя бы начального участка хвоста. Для обнаружения сперматозоидов предложено много методов: избиратель­ная окраска в предмете-носителе, извлечение из пятен различными способами, непосредственная микроскопия, микролюминесцентный анализ, способ отпечатков. Од­нако все они трудоемки, требуют немалой затраты вре­мени и не всегда ведут к цели, особенно если насильник страдал азооспермией. Поэтому изыскивают методы, ре­зультаты которых не зависели бы от наличия в сперме сперматозоидов. Многообещающими в этом смысле яв­ляются хроматография и упомянутая ранее реакция с соком из клубней картофеля.

Разрешение вопроса о возможности происхождения спермы от определенного лица. Разрешение вопроса о возможности происхождения спермы от подозреваемого в изнасиловании основано, во-первых, на определении групп изосерологической системы АВО и, во-вторых, на исследовании феномена «выделительства» антигенов этой системы.

Известно, что группа всех выделений, в частности спермы, каждого человека соответствует группе его кро­ви. Однако у небольшого числа лиц (примерно 20%) в выделениях, в том числе и в сперме, групповые антиге­ны либо не обнаруживаются обычными методами иссле­дования («слабые выделители»), либо вовсе не выяв­ляются («невыделители»). Категория «выделительства», присущая каждому человеку, качественно постоянна в течение всей его жизни. Это имеет большое значение, так как может быть использовано для весьма тонкого дифференцирования выделений, в частности спермы. Так, если сперма на одежде потерпевшей относится к группе В(III) и произошла от «выделителя» этого анти­гена, а подозреваемый тоже имеет группу В(III), но принадлежит к категории «слабых выделителей» или «невыделителей», то из этого следует, что, несмотря на совпадение группы, сперма на вещественных доказа­тельствах не принадлежит подозреваемому.

Одновременно с вещественными доказательствами в судебно-медицинскую лабораторию направляют:

1) образцы крови потерпевшей и подозреваемого (в жидком состоянии, а при необходимости длительной транспортировки — еще и в виде пятен на марле);

2) образец слюны или лучше всего спермы подозре­ваемого, а если потерпевшая жива, то образец и ее слюны.

В связи с тем, что категорию «выделительства» мож­но установить как по слюне, так и по сперме, обычно прибегают к тому образцу, который легче получить (в данном случае допустимо брать слюну вместо спермы). Слюну берет эксперт в судебно-медицинской лаборато­рии или врач больницы (поликлиники), а сперму — эксперт в судебно-медицинской амбулатории. Слюну и сперму выливают на марлю, помещенную в какой-либо чистый плоский сосуд (например, чашка Петри), и вы­сушивают при комнатной температуре. Необходимо иметь в виду, что в жидкой слюне групповые вещества быстро разрушаются и потому слюну высушивают не­медленно после взятия. Оставление ее в жидком состоя­нии даже в течение небольшого промежутка времени (несколько часов) может повлечь за собой ошибку в оп­ределении степени «выделительства» антигенов и непра­вильное экспертное заключение. С образцами слюны и спермы следователь поступает так же, как и с образ­цами крови (стр. 306).

В случаях, когда по образцу слюны выясняется, что подозреваемый является «слабым выделителем» или «невыделнтелем», вопрос уточняют по дополнительно затребованному образцу спермы, так как в слюне «сла­бых выделителей» групповые антигены могут быть вы­ражены слабее, чем в сперме.

Если потерпевшая погибла, категорию ее «выдели­тельства» можно установить по образцу крови из трупа путем определения группы изосерологической системы Льюис. Известно, что все люди с кровью группы Le(a — b-f) являются «выделителями» антигенов си­стемы АВО, а лица с кровью группы Le(a+ b — ) — «слабыми выделителями» или «невыделителями». Толь­ко при крови группы Le(a — b — ) вопрос о «выдели-тельстве» остается неразрешенным, поскольку кровь этой группы может быть как у «выделителей», так и у «слабых выделителей» или «невыделителей».

Образцы исследуют перед исследованием следов спермы на вещественных доказательствах.

В период, когда подозреваемый в совершении пре­ступления еще не установлен, судебно-медицинский экс­перт обязан проводить экспертизу без образцов крови, слюны и спермы подозреваемого, так как это важно для розыска преступника.

Группы спермы и слюны определяют методом абсорбции (стр. 316).

Установление групповой принадлежности спермы в следах на вещественных доказательствах, в образцах крови потерпевшей и подозреваемого, определение ка­тегории «выделительства» подозреваемого, а иногда и потерпевшей дают возможность:

1) исключить принадлежность спермы в следах на предметах, подлежащих экспертизе, подозреваемому;

2) предположить, что сперма на вещественном дока­зательстве могла произойти от подозреваемого или ка­кого-либо другого мужчины — «выделителя» той же группы.

Суждение о групповой принадлежности спермы в сле­дах на вещественных-доказательствах может быть за­труднено возможностью примеси выделений из влага­лища потерпевшей, которые у «выделителей» тоже со­держат групповые антигены; неблагоприятным для экс­пертизы сочетанием групп у потерпевшей и насильника; отсутствием подозреваемого.

Пример. Преступник не найден. Потерпевшая имела кровь группы А(II) с сопутствующим агглютиногеном О (агглютиногеном Н) и принадлежала к категории «вы­делителей». Отсюда следует, что в выделениях ее вла­галища присутствовали антигены А и 0. В содержимом влагалища, взятом тампоном после изнасилования, об­наружена сперма и выявлены два антигена — А и 0. Они могли произойти как из выделений влагалища по­терпевшей, так и из спермы. Поэтому в отношении груп­пы последней возможны лишь предположительные вы­воды сперма относится либо к группе А(II), либо к группе 0(1) либо принадлежит «слабому выделителю» или «невыделителю» любой из четырех групп — 0(I), А(П) В(III) и AB(IV). Категорически здесь можно только утверждать, что преступник не был «выделите­лем» группы В(III) или AB(IV).

Еще более сложно судить о группе спермы в случаях группового изнасилования.