Причины ошибок при исследовании групповой принадлежности крови.

Ошибки в тестировании антигенов системы АВО могут быть обусловлены:

Техническими погрешностями:

· неправильная маркировка пробирок с кровью

· перепутывание пробирок от разных пациентов

· ошибочный порядок нанесения реагентов на пластину

· нарушение техники исследования

· несоблюдение положенного для реакции агглютинации времени

· неправильные количественные соотношения сывороток и эритроцитов

Недостаточно высоким качеством применяемых реактивов:

· узкий спектр специфичности анти-А антител цоликлонов, взаимодействующих не со всеми вариантами А антигена

· слабые стандартные сыворотки с титром ниже 1:32 или с истекшим сроком годности

Индивидуальными особенностями исследуемой крови:

· невыявление антигена А2 в группе крови А при проведении исследования стандартными сыворотками приводит к идентификации исследуемой крови как О. В группе крови А2В не выявление антигена А2 приводит к ошибочной идентификации ее как группы В.

· антигены групп крови не являются изолированными от условий окружающей среды и могут модифицироваться при ее изменении. Ослабление выраженности или полная утрата антигенных детерминант на эритроцитах отмечается у больных онкологическими заболеваниями, лейкозами, получившими значительную дозу радиоактивного облучения и др.

· выраженность антигенов А и В на эритроцитах коррелирует с применением гормональных средств, а также изменяется при беременности.

· низкая активность изогемагглютининов исследуемой крови. Может встречаться у новорожденных, у лиц пожилого возраста, при различных заболеваниях: гематологических, онкологических, у больных с ожогами. При проведении исследования перекрестным способом может отсутствовать агглютинация исследуемой сыворотки со стандартными эритроцитами. В этом случае, если изогемагглютинины не выявляются, заключение о группе крови делают на основании исследования со стандартными сыворотками, при этом исследование проводят параллельно с различными типами реактивов.

· неспецифическая холодовая агглютинация сывороток исследуемой крови. Неспецифические холодовые антитела, присутствующие в сыворотке крови исследуемого образца, могут взаимодействовать со стандартными эритроцитами при использовании перекрестного способа определения групп крови. Показателем присутствия таких антител является агглютинация исследуемых сывороток с эритроцитами О. Часто неспецифические холодовые антитела присутствуют в сыворотках больных гематологическими и онкологическими заболеваниями. Неспецифическая агглютинация исследуемой крови может быть обусловлена присутствием в сыворотке патологических белков (гипергаммаглобулинемия).

Антигены системы резус.

Для успешного переливания крови важно учитывать также и антигены системы резус. В этой системе существует 5 эритроцитарных антигенов: С,с,¯ D,Е и е¯. Они встречаются со следующей частотой: D – 85%, С – 70%, с¯ - 80%, Е – 30%, е¯ - 97,5%. Антигены системы резус обладают способностью вызвать образование аллоимунных антител. Наиболее активным в этом отношении является антиген D, который и подразумевается под термином «резус-фактор». По наличию или отсутствию антигена D все реципиенты делятся на резус- положительных и резус-отрицательных.

Наиболее иммуногенным является антиген D, иммуногенность других антигенов системы резус существенно ниже и убывает в следующем ряду: с¯>Е>С> е¯.

Согласно современному представлению о строении антигена D, известно, что антиген состоит из 30 структурных единиц – эпитопов. На эритроцитах различных индивидов с резус-положительной принадлежностью могут присутствовать все 30 эпитопов или отсутствовать некоторые из них.

Чаще всего эритроциты здоровых лиц содержат все эпитопы антигена D (нормально выраженный D антиген). Образцы эритроцитов, содержащие не все эпитопы антигена D, обозначают термином вариантный (D partial-частичный). В то время, как образцы эритроцитов, имеющие сниженную активность антигена D, называют D слабый (D weak). Ранее не существовало возможности дифференцировать D слабый и D вариантный антигены друг от друга, поэтому они обозначались общим термином Du. В настоящее время за рубежом термин Du больше не используется. Тем не менее, термин Du может использоваться лишь для обозначения образцов D+ эритроцитов, при типировании которых серологическими методами возникают затруднения с определением резус-принадлежности.

Частота встречаемости вариантов антигена D, объединенных в группу Du составляет около 1% в европейской популяции. Поэтому, если при определении резус принадлежности крови часто дается заключение о наличии антигена Du, это свидетельствует о применении низко активных реактивов анти-D и неэффективности метода исследования.