Препараты для бактериотерапии

К ним относят препараты из живых бактерий симбионов. Препараты назначают для восстановления облигатной микрофлоры после длительного лечения антибиотиками и сульфаниламидными препаратами.

Колибактерин -лиофилизированная культура кишечной палочки (штам М-17). Молочный колибактерин готовят путем, закваски кипяченого молока, растворенным сухим колобактерином.

Лактобактерин -лиофизированная культура молочнокислых бактерии (штаммы Lb. fermenti, Lb. plantarum).

Бифидурумбактерин -лиофилизированная культура бифидобактерий (штамм B. bifidum).

Бификол- комплексный двукомпонентный препарат из бифидобактерий и кишечной палочки.

Бактериопрепараты выпускают в ампулах, флаконах или таблетированном виде.

Диагностческие преператы.

Такие препараты имеют различное назначение:

а) индентификация выделенного микроба (диагностические сыворотки, фаги, бактерйоцины)

б) Обнаружение антител в сыворотке крови (диагностикумы)

в) выявление микробной сенсибилизапии (аллергены)

1.6.1. Диагностические сыворотки

По типу реакций, в которых они используются диагностические сыворотки делят на агглютинирующие, преципитирующие, - гемолитические, противовирусные и пр.

Общий принцип их приготовления — гипериммунизацая животных (обычно кроликов) соответствующимиантигенами.

Агглютинирующие сыворотки.Цельные нёистощенные сыворотки содержат антитела ко всем антигенам данного микроба-видовым и групповым. Их применяют для реакции в пробирках, где сыворотка должна быть разведена до титра, указанного на этикетке ампулы. Титром алютинирующей сыворотки называют максимальное разведение, в котором она еще способна агглютинировать культуру, использованную для иммунизации. В низких разведениях реакция может быть неспецифической за счет наличия антител к антигенам, общим для разных, групп бактерий. Из таких сывороток можно приготовить,адсорбированные (истощенные) сыворотки путем связывания «ненужных» антител соответствующими антигенами. Такие сыворотки часто называтют моноспецифическими, монорецепторными. и применяют только в одном рабочем разведении для реакции агглютинации на стекле.

Например, специфическая, брюшнотифозная О-сыворотка содержит антитела к 0-антигенам NN 9, 12. Отдельно готовят сыворотки к Н-антигену. Для приготовления Н-сыворотки, иммунизацию животного, проводят живой культурой хорошо сформированными жгутиками и удаляют О-антитела при помощи сорбции взвесью гретых бактерий. Бактерии-адсорбенты удаляют из сыворотки путем центрифугирования фильтрования.

Прецитирующие сыворотки—применяют для обнаружения антитена в экстракте и исследуемого материала (кожа, моча, и т. д.). Обычно используют в неразведенном виде. Титр преципитирующей сыворотки определяется по максимальному разведению антигена с которым наблюдается положительная реакция. Преципитацию проводят в живой среде (кольцепреципитации), либо в геле (реакция иммунодиффузии по Оухтерлони, иммуноэлектрофорез).

Гемолитические сыворотки — готовят путем гипериммунизации кроликов взвесью чужеродных эритроцитов. В практике микробиологических исследований используют гемолитическую сыворотку к эритроцитам барана для остановки реакции связывания комплемента.

Нейтрализующие сыворотки — их применение основано на специфической нейтрализации бактериальных токсинов и биологической активности вирусов (цитопатический эффект, гибель животных, реакции гемагглютинации, гемадсорбции).

Иммунофлюоресцирующие сыворотки — применяют при экспресс-диагностике с целью быстрого обнаружения бактерий и вирусов в исследуемом материале. Используют два варианта реакции (по Кунсу): а) прямой метод одноэтапная обработка материала специфической рудной сывороткой меченной флюорохромом (изоцианат флюрооресцеина); б) непрямой (двухэтапный) метод — последовательная обработка специфической (диагностической) немеченной сывороткой (первый этап) и флюоресстирующей сывороткой, содержащей меченные антитела против видовых глобулинов диагностической сыворотки (второй этап). Например, при дизентерии на первом этапе мазок из испражнений больного обрабатывают специфичекой диагностической сывороткой во влажной камере, при температуре 37 ⁰ С в течение 20—30 мин, затем препарат предварительно промывают от избытка антител. На втором этапе препарат обрабатывают антиглобулиновой флюоресцирующей сывороткой, которая выявляет свечение комплекса антиген (дизентерийная палочка) — антитело.

В клинике - эти методы особенно полезны для индикации микоплазм и вирусов, выделение и, изучение которых, традиционными микробиологическими приёмами представляет значительные технические трудности

1.6.2 Диагностикумы

К этой группе относятся препараты, предназначенные для определения антител к возбудителям инфекционных заболеваний. Их активным началом являются микробные антигены, которые могут быть представлены в корпускулярной (взвеси бактериальных клеток (вирионов), растворимой или связанной формах. В последнем случае извлеченные антигены (например токсины) сорбируют или химически связывают с инертным корпускулярным носителем; чаще всего с эритроцитами (эритроцитарные диагностикумы). Это позволяет во много раз повысить чувствительность реакции, то есть выявить минимальное количество антител.

В зависимости от применения диагностикумов используют реакцию агглютинации (со взвесью убитых или живых бактерий), реакцию непрямой гемагглютинации (с эритроцитарными диагностикумами), реакцию связывания комплемента — РСК (цельные клетки, вирусы или растворимые антигены).

Отдельную группу составляют неспецифические антигены для серологической диагностики сифилиса, используемые реакциях Вассермана, Кана, Закса-Витебского.

Аллергены

Контакт с инфицирующими агентами и; вакцинными препаратами сопровождается иммунологическими сдвигами организме, определение которых составляет однуиз задач связанных с диагностикой инфекционных заболеваний. Обычно ее решают путем определения антител в сыворотке крови, используя для этого различные серологические, реакции и соответствующие бактериальные и вирусные диагностикумы

Наряду с образованием антител, которые выявляются подобными методами в ходе инфекционного процесса, пройсходит сенсибилизация лимфоцитов (Т-лимфоциты). При взаимодеиствии с микробными антителами, они пролиферируют, подвергаются функциональной трансформации, выделения комплекс биологически активных веществ (лимфокинов), формирующих аллергические реакции. Это можно наблюдать ин-витро по различным реакциям лимфоцитов и клеток-мишений, либо ин-виво, что обычно делают при внутрикомном введении антигенов. Такие реакции развиваются медленно, достигая максимума спустя 24—48 часов, а потому носят название аллергии (гиперчувствительности) замедленного типа (сокращенно—ГЗТ). Инфекционная аллергия чаще всего проявляется именно по этому типу.

Кроме того, аллергические реакции могут быть обусловлены особым классом иммуноглобулинов — Jqε — антителами. В этом случае реакция наступает быстро (в считанные минуты) и потому называется — гиперчувствительность немедленного типа (ГНТ). Обычно ГНТ формируется к антигенам неинфекционной природы (пыльца -растений, антигены животного происхождения. пищевые антигены), хотя иногда аллергия к продуктам микроорганизмов также протекает по типу ГНТ.

Антигены, которых вызывают аллергию и исполюзуются для ее изучения называются ангенами. Аллергеноактивные препараты из бактерий других микроорганизмов представляют собой, как правило сложную смесь белков и их дериватов; степень очисстки от других биохимических компонентов сильно варьирует. Например, туберкулин ППД, один из наиболее известных и хорошо изученных микробных аллергенов, включает более 30 пептидных компонентов. Способностью вызывать аллергию (так же, как и другие проявления иммунологического ответа) обладают многие антигены бактерий, грибов, вирусов. Поэтому степень очистки препаратов определяется задачами исследования.

По назначению можно выделить три основных группы

1. Аллергены, используемые для диагностики инфекционных заболеваний. Их готовят из патогенных видов микроорганизмов и применяют для суждения о текущей, либо перенесенной инфекции. Диагностическим признаком служит наличие положительной реакции при внутрикожном введении препаратов. Примеры - туберкулин, брунеллин. тулярин, орнитин.

2. Аллергены, предназначеные для суждения о напряженности специфического иммунитета у вакцинированных лиц. Примеры, туберкулин, антраксии, нестин (препарат из чумной палочки). Появление положительной внутрикожной реакции говорит об эффективности иммунизации.

3. Аллергены из условнопатогенных микроорганизмов. Их не используют для этиологической диагностики инфекционных заболеваний, ибо вследствии широкого распространения в нормальной микрофлоре, повышенная чувствительность определяется у большинства здоровых людей. Такие препараты находят применение в клинической аллергологии, так как в ряде случаев гиперчувствительность к продуктам нормальной микрофлоры вызывает симптомы характерные для аллергических заболеваний бронхиальная астма, риниты, холецистит и пр. Поэтому определение чувствительности к данной группе аллергенов всегда проводят на фоне обшего клиннко-аллергического обследования больных. Положительные аллергические тесты в подобных случаях служат основанием для назначения специфической гипосенсибилзирующей терапии. Обычно с этой целью используют препарат, на который получена наиболее сильная реакция. Из этой группы аллергенов в СССР в настоящее время выпycкают препараты пиогенного стрептококка, золотистого и эпидермального стафилококка, пневмококка, энтерококка: кишечной палочки, протея мирабилис, дифтероида. синегнойной палочки, кейссерий и др. Большинство из них представляют фракцию фильтрата 6-суточных бульонных культур, очищенную от иммунологически инертного балласта и прогретую при 100—110° для разрушения термолабильных токсинов.