Хронический вирусный паралич
Хронический паралич (лат. — Paralysis chronic apium; англ. — Chronic paralysis; паралич, вирусный паралич, ползучка) — вирусное заболевание куколок, взрослых медоносных пчел и доимагинальных форм пчел-листорезов.
Распространение.Заболевание пчел хроническим параличом отмечено на всех континентах, кроме Южной Америки и, возможно, стран Карибского бассейна. Широкое распространение болезни отмечено в Китае, она выявлена в ряде областей России, а также в Украине, Республике Молдова и Казахстане.
Возбудитель болезни.РНК-содержащий вирус эллипсовидной формы, размером 30...75 х 20...22 нм, культивируется в первичной культуре клеток медоносной пчелы. ЦПД вируса на культуре ткани отмечается через 48 ч после заражения.
Вирус размножается в цитоплазме клеток нервной ткани, тонкой кишки в месте впадения мальпигиевых сосудов, в мандибулярных и гипофа-ренгиальных железах взрослых медоносных пчел. В пораженных клетках образует скопления частиц различных размера и формы; цитоплазмати-ческие включения в виде базофильной грануляции в эпителиальных клетках тонкой кишки получили название телец-включений Морисона.
Вирус хронического паралича часто встречается в пчелах, пораженных вирусом острого паралича. При 30 "С размножение вируса хронического паралича подавляется вирусом острого паралича, при 35 "С отмечается обратная зависимость.
По устойчивости вируса к внешним воздействиям данные противоречивые. При температуре —70 °С сохраняется в трупах пчел более полугода, при температуре —15 °С — более 1 мес, при температуре 4 °С — 3...4 дня. Инактивируется при нагревании до 60 °С в течение 30...60 мин, при 75 °С — в течение 10 мин. Однако имеется сообщение, что при 95 °С вирус погибает через 30 мин. При 35 "С вирус сохраняется 7 дней, в 0,2%-ном растворе формалина при температуре 35 "С — 3 сут; под действием ультрафиолетовых лучей погибает за 1 ч.
640Эпизоотология.Гибель пчел может происходить в любое время года. Однако вспышки острого течения болезни чаще всего регистрируются летом. Хронический паралич наблюдают в некоторых семьях пчел или во всех семьях пчел пасеки.
Вирусоносительство широко распространено. Активизацию размножения вируса хронического паралича в организме пчел могут вызывать некачественные корма.
Внутри семьи вирус передается от больных пчел к здоровым при их соприкосновениях на сотах, удалении пораженных особей, а также кормовых контактах через слюну.
Вместе со слюной вирус поступает в заготовленную пергу. Распространению возбудителя между семьями пасек способствуют перелеты пчел и трутней, а также перестановка пчеловодом сотов с кормом.
Патогенез.Патогенез вирусных параличей, вероятно, имеет много общего: передача патогенеза происходит по ходу метаморфоза. Большая часть вирионов, поступивших с кормом личинки, погибает при ее преобразовании в куколку. Оставшиеся частицы встраиваются в клетки хозяина и могут оставаться в них в неактивном состоянии в куколке и вышедшей из нее взрослой пчеле. При различных нарушениях (стрессах) в результате изменившегося метаболизма происходит репликация вируса, выход вирионов в гемолимфу (вирусемия) и последующее заражение клеток.
Возбудитель хронического паралича при летальном и остром течение обнаружен в нервных клетках, клетках мандибулярных и гипофарингиальных желез, медового зобика. В околоядерной области клеток тонкой кишки формирует округлые, диаметром 0,5...5 мкм тельца-включения (тельца Морисона).
Насекомое погибает в результате полной дисфункции при высокой вирусемии.
Течение и клиническое проявление.При искусственном заражении признаки болезни отмечают у пчел на 4... 10-й день. Инкубационный период при введении минимальной дозы вируса в гемолимфу взрослых рабочих пчел составляет 7 дней, куколок — 5 дней. При размещении больных пчел с внешне здоровыми насекомыми гибель последних происходит на 5... 18-й день.
Болезнь характеризуется появлением на предлетковых площадках и летках ульев ползающих, не способных к полету пчел. Некоторые насекомые возбуждены, беспорядочно двигаются, прерывисто дрожат крыльями, взбираются по стеблям травы, но срываются, падают на землю, начинают быстро вертеться на боку, издавая характерное жужжание. Другие пчелы пассивны, часто собираются на почве или на растениях группами по 2...5 особей и более, плохо и неестественно медленно передвигаются, нередко волочат одну из конечностей, брюшко увеличено. Эти признаки чаще отмечают в начале весны и в конце осени.
В период повышенных температур летом более характерно появление черных, безволосых, блестящих пчел с уменьшенным брюшком, похожих на муравьев. У отдельных особей неровные, оборванные концы крыльев. Здоровые пчелы изгоняют больных из улья.
Проявившие внешние признаки болезни насекомые после паралича конечностей обычно погибают, что в конце концов приводит к сильному ослаблению или плохому развитию семей пчел. Выжившие после острого переболевания семьи пчелы могут в дальнейшем развиваться и давать продукцию, однако вирус в них сохраняется и вызывает постоянную небольшую гибель пчел.
Патологоанатомические признаки.Поверхность тела лишена волосков, концы крыльев обтрепаны, иногда увеличено брюшко. В цитоплазме клеток тонкой кишки на гистосрезах обнаруживают тельца Морисона.
41-7753
641Диагностика и дифференциальная диагностика.Диагностика основана на клинических проявлениях болезни, результатах лабораторных исследований и обнаружении телец-включений Морисона в протоплазме клеток тонкой кишки при окраске гистосрезов или мазков-отпечатков по Романовскому—Гимзе в соответствии с наставлением по гистологической диагностике вирусного паралича. Выявление телец-включений проводят также при помощи РИФ.
Наиболее четкие результаты при диагностике дает использование РДП иРН.
Хронический вирусный паралич необходимо дифференцировать от других вирозов взрослых пчел, спироплазмоза, фитотоксикозов и отравлений пчел, вызванных пестицидами.
Иммунитет, специфическая профилактика.Попытки создания иммунитета у насекомых путем скармливания инактивированного вируса результатов не дали.
Профилактика.Профилактика болезни складывается из охраны благополучия пасек от заноса возбудителя, создания нормальных условий содержания и кормления пчел, устранения перегрева гнезд. Не допускают зимовки пчел на меду, содержащем падь. Семьи пчел размещают в местности, богатой медоносами. Предупреждают пчелиное воровство на пасеках, не объединяют слабые семьи без выявления причин их ослабления. Вывод маток проводят в устойчивых к заболеванию семьях пчел, эти семьи используют для создания отводков. Поддерживают санитарное состояние пасеки и ульев, ведут систематическую борьбу с клещом варроа. С целью профилактики применяют эндоглюкин (эндонуклеаза) или виран (рибонуклеаза) согласно наставлениям по их использованию.
Лечение. Вбольных семьях меняют маток. Пчел обрабатывают указанными выше ферментными препаратами. Определенный лечебный эффект также получен при скармливании семьям раствора сульфата меди, метро-нидазола, препарата ТДА.
Меры борьбы.При установлении заболевания на пасеку накладывают ограничения: оповещают ветеринарных специалистов и владельцев пасек о выявленном неблагополучии; прекращают реализацию пчел, маток, продуктов пчеловодства и предметов ухода за пчелами, проводят ветери-нарно-санитарные мероприятия (старые непригодные соты перетапливают на воск; подвергают дезинфекции соты, бывшие в эксплуатации не более 2...3 лет, а также ульи, рамки, инвентарь, спецодежду); применяют противороевые меры, запрещают перестановку сотов с расплодом и кормом из больных семей, обезличенную обсушку сотов после откачки меда, не допускают содержание слабых и безматочных семей. Ограничения снимают после ликвидации заболевания.
ОСТРЫЙ ВИРУСНЫЙ ПАРАЛИЧ
Острый вирусный паралич (лат. — Paralysis acute apium; англ. — Acute paralysis) — заболевание куколок и взрослых медоносных пчел в семьях, пораженных клещом варроа, и шмелей.
Возбудитель болезни.Возбудитель острого паралича — РНК-содержа-щий вирус сферической формы, размером 30 нм. Репликация вируса происходит в нервной ткани, клетках глоточных желез и жирового тела взрослых пчел. Он образует однообразные цитоплазматические ацидофильные включения в клетках слизистой оболочки средней кишки. Куль-
642тивирование в лабораторных условиях осуществляют парентеральным введением пчелам и их куколкам или в первичных культурах клеток эмбрионов медоносной пчелы.
Штаммы вируса имеют незначительные серологические различия, но идентичны по протеиновым профилям.
Нагревание до 90 °С в течение 1 ч полностью инактивирует возбудитель, при 55 "С титр его значительно снижается, прогревание при 50 °С изменений не вызывает.
Эпизоотология. Вирус обнаруживают у внешне здоровых пчел с апреля по ноябрь.
Передача возбудителя внутри семьи осуществляется взрослыми пчелами, которые со слюной передают его друг другу и личинкам и заносят в формируемые обножки пыльцы и в пергу. Удаление из ячеек сотов отдельных погибших куколок усиливает инфицирование взрослых пчел. Однако внешние признаки ослабления или гибели семей в естественных условиях обычно отсутствуют, острый паралич протекает как инаппарант-ная (скрытая) инфекция, не имеющая экономического значения. Распространению вируса способствуют перелеты, роение пчел, практикуемые пчеловодные приемы (подсиливание слабых семей, перестановка сотов с пергой, размножение семей-носителей).
Вирус острого паралича не размножается в присутствии возбудителей черных маточников и мешотчатого расплода. Помимо медоносных пчел возбудитель обнаружен у отловленных в природе шмелей и в обножках пыльцы клевера, собранных этими насекомыми.
Острый паралич неоднократно отмечался при лабораторных работах с медоносной пчелой и специальных исследованиях ее на присутствие вирусов и в виде инаппарантной инфекции. С появлением и широким распространением клеща варроа инфекция стала явной во многих странах континентальной Европы, включая Россию, и в США.
Выделяемая при питании на куколках и взрослых пчелах самками варроа слюна активизирует репликацию вируса, возможно, повышает его вирулентность. Обнаружение вируса и проявление паралича в семьях пчел, пораженных варроа, находятся в прямой зависимости от численности этого паразита.
Вместе с тем естественное сокращение расплода, нарастание численности пчел, инфицированных самками варроа к осени, и высокая скорость развития острого паралича по сравнению с другими вирозами приводят к тому, что острый паралич становится основной причиной гибели пчел.
Патогенез.Сходен с таковым при хроническом параличе. Репликация вируса происходит в клетках нервной ткани, глоточных желез, жировом теле, в клетках слизистой оболочки средней кишки. Устанавливают однообразные цитоплазматические ацидофильные включения (Жиоффере, 1968).
Течение и клиническое проявление.Признаки болезни неспецифичны, их наблюдают при многих других заболеваниях пчел. В основном поражаются молодые взрослые пчелы, которые теряют способность к полету, ползают или подпрыгивают около летка и вблизи улья, иногда скапливаются на прилетной доске. Некоторые пчелы медленно вращаются, трясутся, у них увеличенное брюшко, неправильно расположенные крылья. Черных пчел при этом не находят. Пораженных насекомых чаще наблюдают в утренние часы. В это же время обнаруживают погибших пчел на дне улья и прилетной доске. Поражение сопровождается изменениями
41*
643содержания в ткани пчел аминокислот и нуклеиновых кислот, увеличением содержания общего белка гемолимфы, снижением ее объема, разрушением, агломерацией гемоцитов.
Среди взрослых пчел заболевание длится от 7.„18 дней до 3 мес. В некоторых случаях пораженные семьи выздоравливают без вмешательства человека, но обычно отстают в росте по сравнению со здоровыми. В течение сезона возможны рецидивы заболевания, повторные вспышки болезни проходят более тяжело. Отмечают осеннее резкое ослабление и гибель семей, сопровождающиеся большим отходом взрослых пчел, появлением признаков гнильца в открытом и печатном расплоде из-за развития се-кундарной микрофлоры.
Урон, наносимый острым параличом в семьях, различен и колеблется от гибели нескольких сотен пчел, снижения медопродуктивности и прироста семей пчел на пасеках до полной гибели семей, отдельных пасек и ряда пасек местности.
Патологоанатомические признаки.Чаще трупы не имеют внешних изменений. В гистосрезах эпителия средней кишки ацидофильные включения.
Диагностика и дифференциальная диагностика.Лабораторный диагноз на острый паралич устанавливают в РДП или ИФА.
Для дифференциации вирусов острого паралича и Кашмир-вируса в США используют серологический метод РИД при различных разведениях сыворотки, содержащей антитела к возбудителю острого паралича.
Профилактика.Профилактика болезни складывается из своевременного выявления семей — носителей вируса на пасеке. Размножение, подси-ливание семей, перестановку рамок с кормом из одной семьи в другую осуществляют с учетом их благополучия по острому параличу. Строго соблюдают правила содержания пчел, своевременно проводят противокле-щевые обработки, стремясь достигнуть максимально низкого уровня численности клещей варроа в семьях пчел. Следует учитывать, что проведение подобных обработок в момент появления признаков паралича обычно не дает должного эффекта, не приостанавливает запущенный механизм распространения вируса в семье пчел. В ряде случаев профилактический и лечебный эффект получают от применения эндонуклеазы (см. Хронический паралич) и общестимулирующей подкормки (полизин, биоспон, ВЭСП), которые более эффективны при приносе пчелами в улей свежей пыльцы.
Лечение. При подозрении на вирусный паралич применяют бактериальную эндонуклеазу. Для этого перед обработкой в 1 л воды растворяют 100 000 ЕД препарата. Для активизации фермента в раствор добавляют 1 г хлорида магния. Пчелосемьи обрабатывают с помощью распылителя, опрыскивая пчел, находящихся на рамках, при температуре воздуха не ниже 14 "С 6...8 раз с интервалом 10 дней. Каждую улочку с пчелами опрыскивают в течение 2...3 с. На одну пчелиную семью расходуют 40...50 мл раствора эндонуклеазы.
Ранней весной проводят подкормку пчел сахарным сиропом с биомицином, добавкой дрожжей и молока. Биомицин дают 3 раза через 2 сут по 200 000 ЕД на 500...600 мл сахарного сиропа на одну пчелиную семью. Порошок биовита распыляют на поверхность гнездовых сотов, не содержащих расплода. На одну пчелосемью распыляют биовита-40 5 г или биови-та-80 2,5 г.
644Меры борьбы.На неблагополучную пасеку накладывают ограничения, которые снимают после ликвидации болезни.
МЕДЛЕННЫЙ ВИРУСНЫЙ ПАРАЛИЧ
Медленный вирусный паралич (лат. —Paralysis lentus apium; англ. — Slow paralysis) — заболевание и гибель куколок и взрослых пчел с признаками паралича двух передних пар ног в семьях, пораженных клещом варроа.
Возбудитель болезни.Возбудитель — РНК-содержащий вирус. Диаметр вириона 30 нм. В естественных условиях медленный паралич протекает как скрытая и явная инфекция. Установлен как основная причина гибели взрослых пчел и расплода в семьях, пораженных клещом варроа в Великобритании. Вирус обнаруживают в теле клеща за 2 мес до появления в семьях погибших особей, что выявляют поздним летом по сокращению числа ячеек с расплодом и увеличению количества клещей.
Как возбудитель инаппарантной инфекции вирус выявлен у пчел в ряде районов Океании. На территории России и стран СНГ не выделялся.
Диагностика и дифференциальная диагностика.Диагностику проводят при помощи серологических методов.
Профилактика, лечение и меры борьбы.Не разработаны.
Контрольные вопросы и задания.1. Какие болезни пчел сопровождаются признаками паралича? 2. Назовите формы проявления хронического паралича. 3. Какие условия требуются для возникновения острого и медленного параличей? 4. Какие насекомые кроме пчел поражаются вирусом острого паралича?
ЭНТЕРОБАКТЕРИОЗЫ
Энтеробактериозы (Enterobacteriosis) — заболевания взрослых пчел и шмелей в результате проникновения в их гемолимфу микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae, приводящие к гибели насекомых.
Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб.Возбудители энтеро-бактериозов очень широко распространены в природе, присутствуют в почве, воде, на фруктах, овощах, зерне, цветковых растениях и деревьях, у различных животных от червей и насекомых до млекопитающих, включая человека. Микроорганизмы весьма разнообразны по особенностям экологии, кругу хозяев, патогенности для растений, насекомых, животных и человека. Ряд видов вызывает желудочно-кишечные заболевания, могут быть возбудителями оппортунистических инфекций у человека.
Из представленных в последнем, 9-м издании «Определителя бактерий Берджи» (1997) 30 родов семейства Enterobacteriaceae ту или иную патологию у пчел вызывают представители 10 родов: Citrobacter, Escherichia, Hafnia, Klebsiella, Proteus, Providencia, Salmonella, Serratia, Shigella, Yersinia.
Косвенное упоминание о связи пчел с бактериями этого семейства можно найти еще у Гиппократа (ок. 460—370 гг. до н. э.) и Колумеллы (I в. н. э.) Установление возбудителя данной патологии было начато в XX в. И. Л. Сербиновым в России, Л. Бахром (1919, 1926) в Дании и К. Е. Бернсайдом (1928) в США.
В отечественной и зарубежной литературе прошлых лет в разделе бактериальные болезни взрослых пчел сообщается о двух заболеваниях: паратифе и септицемии пчел (В. И. Полтев, 1948, 1964; В. И. Полтев, Е. В. Нешатаева, 1970; С. Ноуманофф, 1951;
A. Борчерт, 1966; А. Бризард, Дж. Албисетги, 1977, и др.). В последние годы намечается дифференцировка болезней по названию возбудителей: гафниоз (Р. М. Салимов, 1974;
B. И. Полтев, Е. В. Нешатаева, 1984, и др.), колибактериоз (Л. Н. Гузева, 1981). А. М. Смирнов детально разбирает и выделяет четыре самостоятельные болезни взрослых пчел: септицемию (правильнее — псевдомоноз), гафниоз, сальмонеллез и эшерихиоз (колибактериоз) (О.Ф. Гробов и др., 1987).
645Наиболее распространен и наносит самый значительный экономический ущерб гафни-оз. Гафниоз пчел установлен в Дании, Германии, Франции, Греции, Болгарии, Финляндии, Японии. На территории бывшего СССР паратиф (гафниоз) пчел был впервые выявлен в 1926 г. в Украине. Колебания по годам в целом по СССР составляли 0,95...6,55 %, в определенные годы возбудитель обнаруживали чаше.
ГАФНИОЗ
Гафниоз (лат., англ. — Hafniosis; паратиф, трихобациллез) — бактериальная болезнь взрослых пчел и шмелей.
Возбудитель болезни.Возбудитель — Hafhia alvei семейства Enterobacteriaceae, мелкая прямая палочка размером 1х2...5мкм; оптимальный рост отмечен при температуре 30...37 "С. Ультраструктура клеток типична для большинства грамотрицательных бактерий и идентична таковой возбудителей сальмонеллезов сельскохозяйственных животных. При общем сходстве с грамотрицательными бактериями у гафний не обнаружены мезосомы, выявлены вогнутости на одном или двух концах клеток. Микроб широко распространен в природе, встречается в фекалиях человека, животных, в том числе птиц, сточных водах, почве, воде, на растениях, в молочных продуктах, в организме насекомых.
Гафнии развиваются в организме насекомых и могут стать причиной септицемии. Патогенны для медоносных пчел, а также ос, выделены из гусениц тутового шелкопряда. Лабораторные животные (кролики, морские свинки и мыши) невосприимчивы.
Н. alvei сохраняет жизнеспособность в меде до 70...90 дней. В воске при 14...28 "С выживает до 146 дней, при 4 °С — 210 дней, в перге — 300 дней, на сотах при 4 "С — 240 дней, на стенках ульев — 200...270 дней. Кипячение убивает микроорганизм за 1...2мин, прогревание при 60...85 "С —за 10...30 мин; 0,1%-ный раствор гидроксида натрия — за 3 ч; 0,5%-ный раствор гидроксида натрия — за 35...85 мин; смесь 5%-ной карболовой кислоты и формалина — за 1...5 мин; в 0,025%-ном растворе прополиса возбудитель остается жизнеспособным в течение 1 сут.
Эпизоотология.Заражение пчел возможно при скармливании клеток возбудителя, опрыскивании, содержании здоровых насекомых в садках, где ранее находились инфицированные особи. Признаки поражения и гибель зараженных пчел отмечают на 3...12-Й день, но иногда и через 24 ч.
Н. alvei обнаружена в кишечнике здоровых рабочих пчел, трутней, маток, на куколках и перге в нормально функционирующих семьях пчел. Фактором передачи инфекции служит загрязненная возбудителем окружающая среда. Дальнейшему распространению микроорганизма способствуют пчелы и различные насекомые. Пчелы, осы, шмели, муравьи и особенно клещ варроа могут быть переносчиками возбудителя как внутри семьи, так и между насекомыми на местности.
Возникнув, заболевание быстро распространяется внутри пасеки за счет пчелиного воровства и манипуляций пчеловода. Очевидно, существует определенная породная чувствительность пчел к заражению.
Заболевание отмечают весной и осенью, в ряде случаев гибель пчел регистрируют в зимне-весенний период.
Гафниоз встречается в семьях пчел как самостоятельное заболевание (16,9%) или чаще при смешанных инфекциях (83,1 %), в ассоциации с варроозом (62,19 %), нозематозом (27,91 %) или обоими сразу (9,9 %). Отмечены также случаи одновременного поражения семей пчел гафнией, вирусом хронического паралича, шигеллами, сальмонеллами, псевдомо-
646налами, амебами. Возникновению и распространению болезни также способствуют нарушения в кормлении (наличие пади или пестицидов в зимних кормах, вызывающих увеличение порозности кишечной стенки) и содержании (повышенная влажность и беспокойство пчел в зимовнике). Предрасполагают к заболеванию длительная зимовка, неблагоприятные погодные условия, отсутствие нектаровыделения, длительные перерывы в медосборе. Частой особенностью гафниоза является одновременное поражение нескольких пасек на местности.
Патогенез.При попадании Н. alvei в кишечник пчел или шмелей и наличии благоприятных условий (ослабление перистальтики, что обычно у зимующих насекомых) микроорганизм начинает размножаться с выделением экзо- и эндотоксинов. В результате этого нарушается целостность стенки средней и тонкой кишки, бактерии проникают в гемоцель насекомого. Процесс проникновения возбудителя ускоряют нарушения порозности кишечника, возникающие при нозематозе, падевом токсикозе или под воздействием других факторов. Нарушаются процессы усвоения питательных веществ, что ведет к большему потреблению корма, изменяется водный баланс в организме. Переполнение кишечника приводит к непроизвольной дефекации жидким содержимым внутри зимующей семьи пчел, что способствует дальнейшему перезаражению особей в ней.
Проникновение гафний в гемолимфу пчелы обусловливает подавление гуморальных и клеточных факторов защиты организма хозяина, возбудитель начинает интенсивно размножаться в ней. Выделяемые токсины нарушают нервную деятельность, что вызывает малоподвижность пчел, отсутствие реакций на стук, свет, паралич летательного аппарата. Пчелы гибнут в результате сепсиса и интоксикации.
Течение и клиническое проявление. Впериод зимовки пчелы беспокоятся, клуб распадается, на дне улья много погибших насекомых. От улья исходит неприятный запах, реакция семьи на стук и свет отсутствует. Пчелы темнеют, медленно передвигаются по сотам, некоторые выходят из летка. Крылья расставлены, брюшко раздуто, при надавливании выделяется светло-желтая, коричневая, грязно-серая жидкая слизистая масса с неприятным запахом. Иногда леток, наружная передняя и внутренние стенки улья, соты покрыты пятнами фекалий. Облет вялый, недружный, вокруг улья много неподвижно сидящих, медленно ползающих, не способных к полету или перелетающих на небольшие расстояния, прыгающих пчел, у некоторых насекомых отмечают параличи ног. Семьи пчел часто погибают до появления в них расплода в зимовнике или в течение 7...8 дней после выставки, многие семьи резко ослабевают и в дальнейшем плохо развиваются, не дают продукции. Ослабшие осенью семьи нередко гибнут в период зимовки.
Клинические признаки заболевания у шмелей обычно проявляются через 1...4 дня после вывода маток из диапаузы. Больные шмели малоподвижны, брюшко увеличено, кал жидкий, клейкий, коричневого цвета, с неприятным запахом. Насекомые погибают в течение 3...8 дней.
Патологоанатомические признаки.Гемолимфа мутная, иногда белая. Грудные мышцы темно-серого, коричневого или черного цвета. Средняя и тонкая кишка отечны, растянуты, заполнены грязно-серым или серо-бурым содержимым. Задняя кишка переполнена, серого цвета.
Гистологически отмечают разрушение перитрофической мембраны средней кишки на отдельных участках или на всем протяжении, остатки мембраны в виде бесформенного оксифильного детрита прилегают к деге-нерированному эпителию. Мышечные волокна растянуты, границы их плохо прослеживаются. Аналогичные изменения отмечены в кутикуляр-ном слое и эпителии тонкой кишки.
Диагностика и дифференциальная диагностика.Диагноз ставят на основании выделения возбудителя из гемоцеля насекомого с учетом характерных признаков болезни и эпизоотологической ситуации.
647В лабораторию высылают 30 больных пчел или свежие трупы насекомых. Материалом для бактериологического исследования служат стерильно взятая гемолимфа или грудные мышцы. У шмелей исследуют гемолимфу, содержимое кишечника и испражнения. Используемый в практике посев суспензии из целого насекомого не может служить основанием для постановки диагноза. При проведении исследований руководствуются существующими определителями бактерий.
Результаты выделения возбудителя могут быть подтверждены РА со специфической сывороткой против Н. alvei.
Болезнь дифференцируют от других энтеробактериозов: саль-монеллеза, протеоза, эшерихиоза, цитробактероза, псевдомоноза, нозематоза.
Профилактика.Профилактика болезни складывается из поддержания хорошего санитарного состояния пасеки, территории, на которой она располагается, и мест хранения продуктов пчеловодства и пчеловодного оборудования. Особую опасность для пчел могут представлять загрязненные водоемы, стоки нечистот из навозохранилищ, туалетов, выгребных ям. Пасеку оборудуют поилками с чистой или слегка подсоленной водой (0,01%-ный раствор натрия хлорида), активно потребляемой пчелами, особенно весной при выращивании расплода. Весной после облета семью пчел пересаживают в чистый улей, удаляют лишние соты, гнездо сокращают и утепляют, дают побудительную подкормку, стимулируют яйцекладку маток. Пчел содержат на чистых сотах, бывших в эксплуатации не более 2...3 лет, с приносом пыльцы расширяют гнездо за счет рамок с вощиной для отстройки новых сотов. Проводят обработку семей против клеща варроа. Зимовку пчел осуществляют в сухом зимовнике на качественных кормах, в период зимовки семьи нельзя беспокоить (уничтожают грызунов и не допускают сотрясения стен ульев). Своевременно проводят выставку пчел. Не разрешают завоз неблагополучных семей и использование непродезинфицированного инвентаря и оборудования на пасеке. Систематически проводят дезинфекцию свободных сотов и ульев раствором пероксида водорода или пероксида водорода с муравьиной кислотой. Для предупреждения нозематоза годные для использования соты хранят в парах уксусной кислоты. С целью предупреждения гафнио-за шмелей отловленных в природе маток выдерживают в течение 10 сут в отдельных садках и исследуют их фекалии.
Лечение.Для лечения пчел можно использовать окситетрациклин, у шмелей применяют также другие антибиотики.
Меры борьбы.При выявлении в период зимовки неблагополучной семье проводят раннюю выставку. Пчел пересаживают в чистый улей, рамки очищают, удаляют рамки с кормом, гнездо сокращают и утепляют, дают доброкачественный корм, применяют антибиотики. На пасеку (хозяйство) накладывают ограничения (запрещаются выезд на медосбор, продажа семей, отводков, маток пчел, обезличенная перестановка сотов; осушивание сотов после откачки меда проводят только в тех семьях, откуда они взяты). Мед от больных и погибших семей может быть использован для пищевых целей при условии его термической обработки в кондитерском производстве. Подкормка таким медом других семей пасеки не допускается.
Ограничения снимают после ликвидации заболевания и проведения всех работ по улучшению санитарного состояния пасек и дезинфекции инвентаря и оборудования пасеки.
648Контрольные вопросы и задания.1. Преимущественно в какое время и при каких условиях отмечают энтеробактериозы в семьях пчел? 2. Какова роль клеща варроа при данных болезнях? 3. Перечислите клинические признаки при эшерихиозе, сальмонеллезе и гафниозе. 4. В результате чего происходит гибель пчел при энтеробактериозах? 5. От каких заболеваний следует дифференцировать энтеробактериозы? 6. Из каких тканей пчел следует выделять возбудитель при постановке диагноза на эшерихиоз, сальмонеллез, гафниоз?
ЭШЕРИХИОЗ
Эшерихиоз (лат., англ. — Escherichiosis; эшерихиоз) — заболевание взрослых пчел, характеризующееся диареей и гибелью в результате сепсиса.
Возбудитель болезни.Возбудителем эшерихиоза (колибактериоза) пчел является Escherichia coli (кишечная палочка), по свойствам не отличающаяся от возбудителя болезни у животных (см. часть 1, Эшерихиоз). Медоносная пчела, шмели, как и большинство других насекомых, не имеют специфических Е. coli. Из организма здоровых и больных пчел выделяют серотипы Е. coli: 0119, 0128, 0101, 0127, 0126, 0143, 055, 0103, 078, 018, 0126.
Е. coli находили в теле здоровых медоносных пчел и шмелей в различных регионах земного шара, обнаружены они в сотовом меде. У здоровых пчел размножение и развитие Е. coli происходят в пищеводе, медовом зобике, средней кишке и особенно в задней кишке. В лётный период заражено 18,7...36,4 % пчел в семье.
Данные по выживаемости возбудителя в меде противоречивы. При температуре 4...20 "С они выживают до 7 сут, выдерживают нагревание до 60 "С в течение 10... 15 мин; при 37 °С в меде жизнеспособны 13...60 дней; в воске и вощине при 14...28 "С — 200 дней, при 4 "С — 210 дней; на сотах — 240 дней; в 0,025%-ном растворе прополиса — 1 сут.
Эпизоотология.Заболевание регистрируется в зимне-весенний период. Е. coli чаще выделяют у зимующих пчел с пасек, расположенных в густонаселенных центральных областях России. Источником заражения служат загрязненные водные источники и пыльца.
Заражение пчел возможно при скармливании и инъекции клеток возбудителя в гемоцель взрослых пчел или при инокуляции куколкам. Чаще заражаются взрослые, ослабленные длительным содержанием в садке насекомые.
Распространению возбудителя внутри семьи способствуют начинающаяся в конце зимы и весной интенсивная очистка ячеек сотов, обмен корма между особями.
Кишечная палочка обнаружена также в самках клеща варроа, выделенных из расплода или с самих пчел. Возникновению заболевания в семьях пчел способствует также накопление микроорганизма в гнезде. Возбудитель легко передается с различным загрязненным оборудованием, чему способствуют нарушения санитарно-гигиенических условий содержания насекомых.
Предрасполагающими факторами проникновения микроорганизма из содержимого кишечника в гемоцель насекомого служат недоброкачественный корм, ослабление организма пчел в результате переработки большого количества сахара, наличие среди зимующих пчел большого числа старых особей, определенную роль, возможно, играет заболевание нозематозом и т. д. Эшерихиоз пчел может протекать самостоятельно или в ассоциации с протеозом.
649Заболевание медоносных пчел встречается сравнительно редко и лишь на отдельных пасеках, но может сопровождаться 75...100%-ной смертностью семей пчел. Иногда семьи резко ослабевают, плохо развиваются летом и восстанавливаются лишь к осени.
Патогенез. Как и при других энтеробактериозах (см. Гафниоз).
Течение и клиническое проявление.Инкубационный период при скармливании медоносным пчелам продолжается 10... 12 дней. Пчелы испытывают сильное беспокойство в период зимовки, плохо реагируют на стук, вялые, малоподвижные, с раздутым брюшком, выползают из летка, обильно выделяют зловонные каловые массы, покрывающие переднюю стенку и внутреннее содержимое улья. Около улья и на его дне большое число погибших пчел с неприятным запахом. Облет недружный. У зараженных куколок быстро темнеет кутикула, часть их погибает, из выживших формируются взрослые маленькие пчелы с укороченным брюшком. Признаки поражения могут наблюдаться до конца основного медосбора. Больные семьи непродуктивны и не могут обеспечить себя кормами для зимовки.
Патологоанатомические признаки.Патологические изменения сходны с таковыми при других энтеробактериозах.
Диагностика и дифференциальная диагностика.Предварительный диагноз подтверждают результатами лабораторных исследований. Диагноз ставят на основании выделения возбудителя из гемоцеля пчел с учетом признаков болезни и эпизоотической ситуации. Для диагностики в лабораторию высылают 30 пчел с признаками заболевания или свежие трупы насекомых. Диагностику проводят согласно Методическим указаниям по диагностике эшерихиоза пчел.
Заболевание дифференцируют от других энтеробактериозов и нозематоза.
Лечение.Для лечения больных пчел применяют пенициллин, окситет-рациклин, стрептомицин и многие другие антибиотики и сульфаниламидные препараты. В течение 1 сут после начала терапии количество бактерий в средней кишке достоверно уменьшается.
Профилактика и меры борьбы.Аналогичны таковым при других энтеробактериозах.
10.5.3. САЛЬМОНЕЛЛЕЗ
Сальмонеллез (лат., англ. — Salmonellisis) — заболевание взрослых пчел, проявляющееся поражением пищеварительной системы.
Возбудители болезни.Болезнь могут вызывать различные представители рода Salmonella: S. typhimurium, S. gallinarum-pullorum, S. enteritidis, S. dublin, S. florida (см. часть 1, Сальмонеллезы).
Сальмонеллы патогенны для животных и птиц многих видов и часто обнаруживаются у различных насекомых, скапливающихся у нечистот. Различные виды сальмонелл обнаружены в кишечном содержимом здоровых пчел, выделены из сотового меда.
При пассаже через гемолимфу пчел микроорганизм усиливает свою вирулентность для насекомых, срок жизни которых сокращается с 2...3 сут до 2...4 ч.
Сальмонеллы сохраняют жизнеспособность в воде 70...84 дня, в пыли помещений — до 80 дней. S. pullorum способна к размножению после хранения при 37 "С в меде 70...90 дней; при 13...27 °С от 20 до 210 дней, а при
6504"С— 176...270 дней. В воске при 17...24°С сохраняется 170 дней, при 4 "С — 210 дней; на сотах при 4 °С — 260 дней; в 0,025%-ном растворе прополиса— 10 дней. Сохранность S. typhivurium в различных медах при 37 °С- 60...95 дней; при 13...27°С-18...30 дней; при 4°С-17б... 270 дней.
Эпизоотология.Болезнь регистрируют в ряде стран мира. Чаще отмечают на пасеках, размещенных вблизи животноводческих помещений, мест стоянок скота, около загрязненных водоисточников.
Источником возбудителя инфекции служат различные животные и человек — больные и бактерионосители. Вымытые из удобренных навозом почв весенними стоками воды и дождями сальмонеллы могут широко разноситься и попадать на растения-медоносы заливных лугов, полей, садовых участков и тем самым включаться в цепь циркуляции медоносных пчел. От пчел чаще всего выделяют S. typliimurium и, возможно, S. enteritidis, что может быть связано с активным загрязнением сотов и инвентаря в сотохранилищах или гнезд пчел в зимовнике выделениями мышевидных грызунов.
Заболевание и гибель пчел регистрируют в зимне-весенний период, чаще в виде отдельных энзоотических вспышек на одной или нескольких близлежащих пасеках.
Предрасполагающие факторы заболевания те же, что и при гафниозе.
Патогенез, течение и клиническое проявление, патологоанатомические признаки.Аналогичны таковым при других энтеробактериозах (см. Гаф-ниоз).
Диагностика и дифференциальная ди