Лабораторная диагностика бешенства, специфическая профилактика и лечение.
Билет 2
Лабораторная диагностика бешенства, специфическая профилактика и лечение.
Обнаружение включений Бабеша-Негри (не все биовары вируса) кора больших полушарий, кора мозжечка, продолговатый мозг
Выявление Ag в тех же препаратах (РИФ)
Выделение вируса слюна, секционный материал
-интрацеребрально б. мыши или кроликивнутримышечно хомячки
-мозг погибшего животного
-включения, Ag
Современные препараты для профилактики бешенства
Антирабические вакцины вирус выращен в мозговой ткани животных аттенуированные Ферми - Хемпта
Инактивированные Семпла
Хемпта-Николича вирус выращен на культурах клеток
Внуково-32 на линии клеток W1-38
Антирабический гаммаглобулин удлиняет инкубационный период (повышает эффективность вакцинации)снижает вероятность развития поствакцинальных осложнений.
Методы лабораторной диагностики энтеровирусной инфекции.
-Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций основана на обнаружении в клиническом материале от больного (носоглоточном смыве, ликворе, фекалиях) энтеровирусов вирусологическим методом, генетического материала энтеровирусов методом ПЦР, обнаружение в сыворотке от больного специфических антител и нарастание их титра не менее, чем в 4 раза серологическими методами.
-Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются фекалии больных, отделяемое носоглотки, при летальных исходах - кусочки головного и спинного мозга, лимфатические узлы. Выделение вирусов полиомиелита проводят путем заражения исследуемым материалом первичных (клетки почек обезьян) и перевиваемых культур клеток. О репродукции вирусов судят по цитопатическому эффекту. Идентифицируют (типируют) выделенный вирус с помощью типоспецифических сывороток в реакции нейтрализации (РН) на культуре клеток. Внутритиповая дифференциация «диких» (вирулентных) и вакцинных вариантов вируса полиомиелита проводится с помощью ИФА, РН цитопатического эффекта вируса в культуре клеток специфическими сыворотками, а также ПЦР. Серодиагностика включает РСК, РН с парными сыворотками больных с помощью эталонных штаммов вируса.
-Лабораторная диагностика. Исследуемым материалом служат фекалии, носоглоточный смыв, кровь, спинномозговая жидкость. Вирусы выделяют в культуре клеток и на новорожденных мышах. Выделенный вирус идентифицируют с помощью РН на соответствующих биологических объектах, а также РТГА (для энтеровирусов, обладающих гемагглютинирующей активностью). Серодиагностика такая же, как при полиомиелите.
Билет 3
Морфология, строение и химический состав вирусов.
Морфология вирусов:
- Палочковидная (вирус табачной мозаики);
- Пулевидная (вирус бешенства);
- Сферической (вирусы полиомиелита, ВИЧ);
- Нитевидные (филовирусы);
- Сперматозоидная (бактериофаги).
Структура вирусов:
Простой: НК+белковая оболочка (капсид)= нуклеокапсид
Сложный: нуклеокапсид+липопротеиновая оболочка (суперкапсид/пеплос)
Белковые субъединицы, формирующие капсид (от лат. сapsa – вместилище) – капсомеры
Способ укладки капсомеров - тип симметрии.
Типы симметрии вирусов
Кубический (икосаэдрический)- НК окружена капсомерами, образующими многогранник (адено, пикорна, герпесвирусы).
Спиральный- взаимодействие НК и белка осуществляется по оси вращения (коронавирусы, пара, ортомиксовирусы)
Смешанный- двойная симметрия характерна для бактериофагов: головка-кубический, отросток-спиральный тип симметрии
Суперкапсид :Мбелок, Билипидный слой, Глиеопротеины (шипы и ворсинки),гемагглютинин нейроминидаза
Функции суперкапсида:
- Стабилизация внутренних структур вирусов
- Определяет инфекционные свойства вирусов (адсорбцию и проникновению внутрь клетки)
- Защитная
Общая характеристика белков вирионов
1. Структурные
• капсидные
• геномные
• суперкапсидные
2. Функциональные (ферменты)
• Вирионные входят в состав вириона (проникновение в клетку и участие в репродукции)
• Вирусиндуцированные закодированы в вирусном геноме
Билет 4
Билет 7
Билет 8
Билет 11
Билет 14
Билет 15
Билет 17
Антигенная структура и причины изменчивости вируса гриппа.
Билет 18
Билет 22
Вирус кори и ПСПЭ, таксономическое положение и свойства.
Ультраструктура вируса кори
• Гликопротеины: ►Н (гемагглютинины) – фактор адгезии; ► F (Fusion – белок слияние) – образование синцития и симпластов;
• М-белок;
• Белки полимеразного комплекса (L, P);
• Нуклеокапсидный белок NP;
• РНК-зависимая РНК-полимераза.
Вирус кори: свойства
Гемолизирует и агглютинирует эритроциты обезъян, но не агглютинирует эритроциты кур и лаборатоных животных;
В культуре клеток почек человека и обезьян вирус проявляет ЦПД с образованием гигантских клеток и/или синцитиев, либо зернистых включений в цитоплазме и ядре;
Ig против Н и F вызывает иммуноопосредованное цитотоксическое действие на поражённые клетки
Неустойчив во внешней среде (после кори дезинфекцию не проводят);
Инактивируется при нагревании, УФ, при действии дезинфицирующих веществ;
Вирус имеет один серотип.
Корь: иммунитет пожизненный
Билет № 23
РТГА
1) для выявления антител в сыворотке больного с помощью стандартных антигенов-диагностикумов – для серологической диагностики инфекционной болезни;
2) для определения неизвестных антигенов (бактерий, грибов, вирусов) за известными стандартными сыворотками-антителами – для серологической идентификации возбудителей.
РТГА: Принцип РТГА состоит в том, что в пробирке (лунке) смешивают равные объемы сыворотки крови и вируса и после экспозиции (30—40 мин) добавляют эритроциты соответствующего вида животного.
Выбор эритроцитов зависит от вируса, используемого в РТГА. Так, для вирусов гриппа используют эритроциты кур, для ПГ-3 КРС — эритроциты морской свинки. Обычно используют 0,5—1%-ную взвесь эритроцитов
Эритроциты являются индикатором наличия вируса в смеси. Агглютинация эритроцитов указывает на наличие вируса в смеси, а отсутствие гемагглютинации — на его отсутствие, так как антитела полностью нейтрализовали гемагглютинирующую активность вируса.
3) Вакцина «Тетра кок»: Iгруппа, состав:дифтерийный анатоксин, столбнячный анатоксин, коклюшная суспензия, ИПВ 1,2,3 типов. Получение:из дифтерийного и столбнячного токсинов, инактивированных и очищенных и адсорбированных на гироксиде алюминия, коклюшной палочки (подвергнутой тепловой инактивации) и 3 типа вируса полиомиелита (приготовлен на культуре клеток Vero и инактивированных формалином). Применение: для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка и полиомиелита; подкожно или внутримышечно;формирует специфический иммунитет.
Билет 24
1) Семейство пикорнавирусов, классификация, морфология и структура.
Царство Vira
Отряд Picornavirales
Семейство Picornaviridae
Род Enterovirus (Poliovirus, Коксаки, ECHO); Rhinovirus (риновирус человека А и В); Hepatovirus (вирус гепатита А); Aphthovirus(вирус ящура) и др.
Семейство безоболочечных вирусов, содержащих однонитевую (+) РНК.
Структура: мелкие просто организованные вирусы d=30 нм.
Вирион состоит из икосаэдрического капсида, окружающего инфекционную однонитевую (+) РНК с протеином Vpg.
Капсид состоит из 12 пятиугольников (пентамеров), каждый из которых состоит из 5 белковых субъединиц – протомеров.
Протомеры образованы 4 вирусными полипептидами: VP1, VP2, VP3 (на поверхности вириона), VP4 (внутри вирусной частицы)
Классификация пикорнавирусов: семейство Picornaviridae
1)Enterovirus(111серотипов)
2)Rhinovirus(105 серотипов)
3)Aphtovirus(7серотипов)
4)Hepatovirus(3серотипа)
5)Cardiovirus(2 серотипа)
6)Erbovirus
7)Parechvirus
8)Cobuvirus
2) РБН: В РБН берут или двукратно возрастающие разведения исследуемых сывороток и постоянную дозу вируса, или одно (постоянное) разведение сывороток и 10-кратно возрастающие разведения препарата вируса. Реакция (РБН) применяется для определения вируснейтрализующей активности сывороток и носоглоточных смывов. Она высокочувствительна и штаммоспецифична, требует значительных затрат времени. Принцип метода основан на способности специфических антител сывороток крови или секрета дыхательных путей соединяться с соответствующим по антигенной структуре вирусом гриппа.
3)Герпетическая поливалентная вакцина: I группа, состав: инактивированные формалином ГВЧ-1и ГВЧ-2, полученные в культуре клеток куриного эмбриона. Получение: инактивирование формалином. Применение: для специфического лечения и профилактики рецидивирующей герпетической инфекции; вводят внутрикожно
Билет 25
Билет 2
Лабораторная диагностика бешенства, специфическая профилактика и лечение.
Обнаружение включений Бабеша-Негри (не все биовары вируса) кора больших полушарий, кора мозжечка, продолговатый мозг
Выявление Ag в тех же препаратах (РИФ)
Выделение вируса слюна, секционный материал
-интрацеребрально б. мыши или кроликивнутримышечно хомячки
-мозг погибшего животного
-включения, Ag
Современные препараты для профилактики бешенства
Антирабические вакцины вирус выращен в мозговой ткани животных аттенуированные Ферми - Хемпта
Инактивированные Семпла
Хемпта-Николича вирус выращен на культурах клеток
Внуково-32 на линии клеток W1-38
Антирабический гаммаглобулин удлиняет инкубационный период (повышает эффективность вакцинации)снижает вероятность развития поствакцинальных осложнений.